基于核壳荧光纳米颗粒的一种新型纳米pH传感器

改进了一种基于新型的荧光染料——二氧化硅的核壳荧光纳米颗粒的纳米pH传感器，以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的羊抗人免疫球蛋白IgG为核材料，采用实验条件简单的油包水的微乳液方法制备荧光纳米颗粒，该方法有效地防止了荧光染料在二氧化硅壳层中的泄露。这种FITC的核壳荧光纳米颗粒对pH敏感，在pH值5．5—7之间呈线性响应，且能被单个小鼠巨噬细胞吞噬，借此用于单细胞中pH的实时监测。     

小鼠巨噬细胞受S-O_2-1菌苗激活后的免疫增强效应

本文研究了小鼠巨噬细胞受S-O_2-1菌苗激活后的免疫增强效应.不同种鼠的小腹腔巨噬细胞均可被S-O_2-1菌苗激活,并能使其增殖,体积增大.激活后的巨噬细胞的亚微结构变化显著,细胞突起增多,表面积增加,线粒体及溶酶体增多,吞噬功能增强;细胞内溶菌酶、酸性磷酸酶及非特异性脂酶的活性明显增加.结果表明,S-O_2-1菌苗能增强小鼠巨噬细胞的免疫功能.     

Activation of proteinkinase ERK mediates induction of macrophage MMP-12 by OxLDL

The present study was undertaken to investigate the effect of oxidized low density lipoprotein (oxLDL) on the expression of maerophage matrix metalloproteinase-12 (MMP-12), and the possible mechanisms. Activation of extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2) was detected by Western blot analysis.Enzymatic activity of MMP-12 was determined by β-casein zymography. RT-PCR analysis was used to measure the mRNA expression level of MMP-12. OxLDL-stimulated macrophages produced increased casein-degrading activities and oxLDL also significantly increased the mRNA level of MMP-12 in a dose-dependent manner.OxLDL stimulated the phosphorylation of ERK1/2 in macrophages. The use of the specific inhibitor indicated that the ERK1/2 signaling pathway was required for the induction of MMP-12.These data demonstrated that oxLDL induced MMP-12 expression in macrophages through an ERK1/2-dependent pathway.     

桑色素对小鼠T细胞增殖、周期和巨噬细胞分泌NO的影响

目的:研究桑色素(morin)对小鼠T细胞增殖、细胞周期和腹腔巨噬细胞分泌一氧化氮(nitrogen monoxidum,NO)的影响.方法:以佛波醇酯(phorbol 12,13-dibutyrate,PDB)和离子霉素(ionomycin,Ion)联合刺激淋巴结来源的小鼠T淋巴细胞,再以不同终浓度的morin与上述细胞共培养,利用流式细胞术(FCM),以羧基荧光素双醋酸盐琥珀酰脂(carboxyfluorescein diacetate succinimide ester,CFDA-SE)染色检测T细胞的增殖;以碘化丙锭(propidiumiodide,PI)染色分析T细胞的细胞周期;脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激小鼠腹腔巨噬细胞,与不同浓度morin共培养,以Griess反应检测上清液中的NO含量.结果:CFDA-SE染色分析显示,PDB Ion组的增殖指数(proliferation index,PI)为1.70±0.05,各浓度的morin对PDB Ion刺激的T细胞增殖,具有明显地抑制作用,以100 μmol/L的morin抑制作用最明显,PI为1.03±0.01(P＜0.01).细胞周期的分析结果表明,morin组中处于S期的细胞比率较高,与PDB Ion组相比有明显差异.Griess反应检测NO含量的结果显示,各浓度组的morin均抑制LPS刺激巨噬细胞产生NO,100 μmol/L的morin可将LPS刺激巨噬细胞产生NO为(12.89±0.11)μmol/L降低为(7.25±0.05)μmol/L,抑制作用最强.结论:Morin可显著抑制PDB Ion刺激的T细胞增殖;其对增殖的抑制作用主要表现为S期的细胞的阻滞;对LPS刺激巨噬细胞产生的NO也有显著的抑制作用.     

运动与巨噬细胞的研究进展

巨噬细胞(Mφ)是参与免疫应答的重要细胞。中、小强度的运动使巨噬细胞的吞噬能力增强,而大强度运动使巨噬细胞的吞噬能力下降;同时运动也使机体内一些神经递质、激素的分泌水平发生变化,而激素、神经递质的改变又影响神经内分泌系统对巨噬细胞的免疫调节作用。     

小鼠腹水瘤巨噬细胞对大肠杆菌O157免疫应答的膜蛋白质组学研究

采用膜亚蛋白质组学方法研究小鼠腹水瘤巨噬细胞Raw 264.7对致病性大肠杆菌O157的免疫应答反应,筛选并鉴定到24个差异表达的膜蛋白质.这些膜蛋白质与细胞免疫、细胞周期、细胞发育、细胞骨架、细胞生长等有关.在蛋白质水平上对巨噬细胞与大肠杆菌间的相互作用关系进行了一些探索性研究,为进一步揭示机体对病原反应的作用机制提供理论基础.     

突变人GM-CSF基因在大肠杆菌中的表达及纯化

目的构建重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的高效表达质粒,将其表达产物用于分离纯化的研究。方法用人外周血单核细胞获得总RNA作为模板和修饰的5′端密码子的引物经RT-PCR反应扩增到人GM-CSF基因,插入温控表达载体pDH构建了突变的hGM-CSF表达质粒,并将在E.coli中获得表达的突变rhGM-CSF包含体8 mol/L脲提取液进一步用离子交换色谱柱分离纯化。结果rhGM-CSF在大肠杆菌表达占菌体总蛋白量的22%,用弱阴离子交换色谱对rhGM-CSF的工程菌表达产物8 mol/L脲提取液直接经35 m in分离纯化,所得产物纯度可达95%,质量回收率可达到60%。结论这表明用离子交换色谱可进行rhGM-CSF的复性与同时纯化。     

氧化低密度和极低密度脂蛋白对鼠腹腔巨噬细胞的增殖作用

巨噬细胞源性泡沫细胞增殖在动脉粥样硬化(As)的形成过程中起重要作用.用形态学、细胞计数、MTT掺人法和氚标胸腺嘧啶脱氧核苷(3H-TdR)掺人实验观察比较了氧化修饰脂蛋白(Ox-LDL,Ox-VLDL)和相应的天然型脂蛋白对培养的鼠腹腔巨噬细胞增殖的影响.结果发现,Ox-LDL和Ox-VLDL均能显著刺激巨噬细胞内DNA合成增加促进细胞增殖(与天然脂蛋白相比,P<0.001),其中Ox-VLDL的作用最为明显(与Ox-LDL相比P<0.05);低浓度的氧化型脂蛋白(蛋白浓度0～5mg/L)促巨噬细胞呈剂量依赖性增殖,浓度为5mg/L时,达到最高峰,随着浓度的进一步增加.促增殖作用逐渐减弱;而天然LDL及VLDL不能促进巨噬细胞增殖.上述结果表明,与Ox-LDL相似,Ox-VLDL促进巨噬细胞增殖可能是其致As的机制之一.     

金水六君煎口服液对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响

目的：了解金水六君煎口服液对小鼠巨噬细胞吞噬功能及抗炎效果的影响。方法：用金水六君煎口服液为小鼠灌胃,２１ｄ后每只小鼠腹腔注射５％的鸡红细胞悬液（ＣＲＢＣ）,１２ｈ后,颈椎脱臼处死小鼠,吸取腹中洗液滴于载玻片上,油镜观察,计算巨噬细胞吞噬指数和吞噬百分率,检测小鼠巨噬细胞吞噬功能。于每鼠左耳背滴二甲苯２滴致炎,３０ｍｉｎ后处死小鼠,左耳肿胀部位及右耳相应各打下一耳片,于分析天平称重,以左右耳片重量     

粒/巨噬细胞集落因子在中耳胆脂瘤中的表达和作用研究

为探讨粒／巨噬细胞集落因子（GM－CSF）在继发性中耳胆脂瘤中的表达情况,分析其在胆脂瘤上皮增殖、骨质破坏特性中的作用,应用免疫组化SABC染色方法和计算机图像分析法,检测25例胆脂意上皮和10例正常外耳道皮肤中GM－CSF的表达情况。结果表明,GM－CSF在22例胆脂瘤上皮组织的全层细胞的胞浆中有强表达,阳性率为88％;GM－CSP在10例正常外耳道皮肤上皮中有弱表达,阳性率为40％。染色结果经计算机图像分析仪定量分析,两者的平均光密度分别为2．332和1．474,差异呈高度显著性（P＜0．05）。说明中耳胆脂瘤上皮中GM－CSF的含量显著高于正常外耳边皮肤的含量。推测GM－CSF可能参与了胆脂瘤的发生、发展及可能参与了胆脂病上皮增殖、骨质破坏的作用。