牛角膜皮皮45.4kd水溶性蛋白质在脊椎动物角膜中特异性 …

用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法，制备了４５．４ｋｄ的水溶性牛角膜上皮特异性蛋白质，免疫家兔得到其抗体。利用免疫组化方法研究了此蛋白质在脊椎动物角膜中表达的普遍性。结果表明，此水溶性蛋白质在小白鼠、豚鼠、家兔、羊等哺乳动物和以鳖为代表的爬行动物角膜上皮细胞中呈阳性反应，而在鲤鱼、热带鱼、花背蟾蜍、鸡、北京雨燕等其他脊椎动物角膜中呈阴性反应。     

ELISA法检测乙肝患者血清乙肝病毒前S1蛋白

目的:探讨检测乙型肝炎病毒前S1蛋白(Pre-S1)的临床意义。方法:本文用酶联免疫分析(enzymelinkedimmuno-adsorbedassay,ELISA)法对22例急性乙型肝炎患者及160例慢性乙型肝炎患者进行Pre-S1蛋白及HBV标志物检测,同时用荧光定量PCR法(fluorescencequantitativepolymemsechainreaction,FQ-PCR)检测HBV-DNA。结论:在急性乙型肝炎中,Pre-S1转阴,提示疾病的预后良好;Pre-S1蛋白和HBV-DNA相关较大,能反映HBV复制,有可能作为体内HBV复制的实验室指标。     

多聚酶链式反应

1985年以前进行遗传病的产前诊断一般都用羊膜穿刺术采取羊水中的胎儿脱落细胞,抽提它们的DNA,然后用分子杂交等方法进行检测,一次检测需要几天时间,而且胎儿至少四周,操作既复杂又较不安全,1985年美国Cetus公司人类遗传学实验室的科学家发明了一种     

传染性法氏囊病快速诊断技术的建立及其应用

根据已发表的IBDV各致病型毒株的序列，在病毒结构蛋白VP2编码基因的高变区(VP2 variable domain,vVP2)两端外侧的保守序列内设计合成了2条寡核苷酸引物，对各种不同致病型的12株参考毒株进行逆转录酶一聚合酶链式反应(RT—PCR)的检测．结果 12个参考毒株均能扩增出约679 bp的目的片段，而对作为阴性对照的常见5种鸡病病原NDV、IBV、CAIV、E．coli、pM均没有扩增出任何片段；应用建立的技术对疑似IBD的34份临床病料进行检测，并同时在基础RT—PCR扩增的片段内设计另一对引物进行Nested—PCR检测．结果基础RT—PCR方法检测到ll份阳性，Nested-PCR检测到23份阳性．研究的结果表明建立的IBD的RT—PCR诊断技术具有特异、快捷、敏感的特点．在此基础上设计的Nested—PCR则大大提高了阳性检出率(提高52．1％)．     

番木瓜环斑病毒株系的分子生物学方法鉴定

以PRSV株系牧民性引物对PRSV的PRSV126（PRSV日本分离物）、Ys、Vb和Sm等株系进行RT－PCR方法鉴定，引物PR21／PR22能把Ys从Vb和Sm中鉴定出来，PR300／PR301则能把Vb从Ys、Sm和PRSV126中鉴定出来；用限制性内切酶Hae Ⅱ、Sau3A I和Hinf I对PRSV的PRSV126、Ys、Vb和Sm等株系进行单酶切RT－PCR－RFLP分析，Hinf I能把PRSV126与Ys、Vb和Sm鉴别开来，Sau3A I能把Ys与Vb和Sm鉴别开来，Hae Ⅱ则能把Ys与PRSV126、Vb和Sm鉴别开来；以P1／P2为引物，对Vb、Ys和Sm株系进行RT－PCR－RFLP－SSCP分析，结果能一次把三者较好地区别开来。     

人胎盘G—蛋白ab3a cDNA的克隆

为了获取全长的小分子G－蛋白Rab3a，以用于研究Rab3a与其他蛋白相互作用关系，本实验以人胎盘总cDNA为模板，PCR扩增到人Rab3a cDNA全编码区。产物回收后克隆于质粒pYESTrp2的BamHI/Xhol位点，测序结果表明，本实验获得的Rab3a cDNA包含了起始和终止密码子。与PCR引物设计的参照Rab3a比较有5个核苷酸变异，与翻译的氨基酸序列完全一致。由此表明本实验获得的Rab3a cDNA可用于进一步研究。     

Rapid Amplification of 5‘ cDNA End of S.Liaotungensis Choline Monooxygenase Using Inverse PCR RACE

Based on part of a known cDNA sequence of Suaeda Liaotungensis choline monooxygenase the author successfully cloned the 5‘ cDNA end of Suaeda Lianotungensis choline monooxygenase using Inverse PCR RACE with a specially designed 5‘-phosphated RT primer and two pairs of specific inverse PCR primers.Compared with the anchored PCR RACE,inverse PCR RACE has bettter specificity and higher amplification.     

崭露头角的PCR技术

1865年,美国第16任总统林肯遇刺身亡,时年才56岁。然而,一些研究人员声称,他即使不遇害,也将寿终正寝了。因为他已经患上了一种叫“马方综合症”的疾病,患此病的人大多数只能活到这个年纪。 当前,这种事后诊断的依据只能来自于对林肯DNA所进行的遗传分析。林肯死亡已100余年,漫长的岁月已使他的遗传试样变得很稀少,显然这种分析是相当困难的。但是现在科学家已经发明了一项新技术,它可对遗传试样进行几乎是无限的扩增和复制,从而有可能获得足够多的林肯遗传材料,来证实他们的猜测诊断。     

上海人群HLA-Dw4,Dw10和HLA-DR9呈连锁不平衡

用纯合分型细胞判别的HLA特异性称为Dw,代表HLA Ⅱ类基因编码的同种异体抗原表位效应的总和,其多态性的构成具有明显的人种差异,并与疾病易感性的产生密切相关。本文报道上海人群可检出属于HLA-DR 4抗原家族的6种Dw特异性,然而其中的Dw 4和Dw 10(可能还包括Dw 13)却不与DR 4,而与另一抗原家族DR 9呈现连锁不平