番木瓜环斑病毒株系的分子生物学方法鉴定

以PRSV株系牧民性引物对PRSV的PRSV126（PRSV日本分离物）、Ys、Vb和Sm等株系进行RT－PCR方法鉴定，引物PR21／PR22能把Ys从Vb和Sm中鉴定出来，PR300／PR301则能把Vb从Ys、Sm和PRSV126中鉴定出来；用限制性内切酶Hae Ⅱ、Sau3A I和Hinf I对PRSV的PRSV126、Ys、Vb和Sm等株系进行单酶切RT－PCR－RFLP分析，Hinf I能把PRSV126与Ys、Vb和Sm鉴别开来，Sau3A I能把Ys与Vb和Sm鉴别开来，Hae Ⅱ则能把Ys与PRSV126、Vb和Sm鉴别开来；以P1／P2为引物，对Vb、Ys和Sm株系进行RT－PCR－RFLP－SSCP分析，结果能一次把三者较好地区别开来。     

利用枯草杆菌整合表达嗜铬粒蛋白抗真菌片段

为实现CGA1-76片段基因在枯草杆菌中的稳定表达,将CGA1-76片段基因的表达元件重组到枯草杆菌转座子质粒pHV1249微转座子mini-Tn10内,利用mini-Tn10将CGA1-76片段基因的表达元件整合到枯草杆菌DB1342染色体上,用氯霉素和红霉素筛选枯草杆菌转座工程菌DB1342(TnSVTQ).DB1342(TnSVTQ)在无选择压力条件下经10 d连续传代培养,转座子内氯霉素抗性丢失率为0%,说明转座子稳定整合在DB1342染色体上.SDS-PAGE和免疫印迹分析结果表明,在蔗糖诱导下,CGA1-76片段基因在DB1342(TnSVTQ)中获得表达,产物被分泌到细胞外.孔穴琼脂扩散法测定表达上清的抑制真菌活性,结果表明重组CGA1-76能抑制烟曲霉菌和黄曲霉菌的生长,抑菌圈直径分别为9 mm和8 mm.     

改进的鸡胚绒毛尿囊膜技术--无气室孵育法

对传统的鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)方法进行改进。将孵育6d的鸡胚去掉气室后，将待测样品加入到CAM上，用无菌透明胶封口，继续孵育2—3d，去掉封口暴露CAM，用甲醇／丙酮等体积混合液室温固定10min后进行观察，结果鸡胚血管网完好无损，样品作用效果显示明显，表明该方法相对于传统方法而言，具有操作简单，鸡胚存活率高，样品效果显示更直观等优点。     

人血管能抑素免疫兔抗血清制备及其特性测定

纯化的人血管能抑素包涵体进行SDS-PAGE分离，切胶回收目的蛋白，与弗氏不完全佐剂充分乳化后，进行多点皮下注射免疫新西兰白兔，制备兔抗人血管能抑素抗血清，抗血清去除交叉反应抗体后，进行Western Blotting分析抗血清与人血管能抑素及其N端和C端片段的抗原抗体反应特性。结果表明，经过4次加强免疫后，获得了高效价的兔抗人血管能抑素抗血清。抗血清去除交叉反应抗体后，Western Blotting分析表明，它能与人血管能抑素发生特异的抗原抗体反应，同时还能与人血管能抑素的N端片段和C端片段发生特异性较弱的抗原抗体反应。证明制备的兔抗人血管能抑素抗血清能应用于人血管能抑素及其N端和C端片段免疫学研究中。