根癌农杆菌介导的丝状真菌简青霉遗传转化的研究

利用根癌农杆菌LBA4404介导,建立了丝状真菌简青霉(Penicillium simpli-cissimum)H5的遗传转化系统.潮霉素抗性筛选、PCR和Southern blot分子鉴定等结果表明:筛选获得的转化子能够稳定遗传,外源的T-DNA以单拷贝随机整合到简青霉的基因组中.实验初步研究了农杆菌浓度、乙酰丁香酮浓度和共培养时间等因素对转化效率的影响,经过优化后转化体系的效率可达50个转化子/105个孢子.农杆菌介导的遗传转化方法在简青霉上的运用,将为研究该菌的基因工程改造提供强有力的工具.     

两株柑橘采后致病真菌的分离及生物学特性研究

从自然发病的宫川果实表面分离得到两株致病真菌（PD和PI）.致病力检测结果显示,接种PD菌的柑橘果实发病到全部腐烂需7 d,而接种PI菌的柑橘果实发病到全部腐烂则需13 d.形态学特征比较得知,PD和PI分别为指状青霉（Penicillium digitatum）和意大利青霉（P. italicum）.基础生物学特性结果表明,PD的致死温度为70 ℃,菌丝体生长最适温度为25 ℃,最适pH 7.0;PI的致死温度为80 ℃,菌丝体生长的最适温度为20 ℃,最适pH 10.0.     

木质纤维素降解酶系的基础和技术研究进展

山东大学微生物学科从事纤维素降解研究已有五十多年的历史。在木质纤维素微生物降解机理研究的基础上,从自然界中筛选到一株能高效降解植物纤维类生物质的斜卧青霉菌株,并获得该菌的多株抗降解物阻遏纤维素酶高产突变菌株。最近,已完成了对多株斜卧青霉菌株的全基因组测序,正在利用系统生物学技术深入探讨其酶系组成和酶合成调控机理。选育出的高产突变株,已用于规模化生产工业用酶,并开发出玉米芯生物炼制生产纤维素乙醇技术。     

从青霉菌丝体中提取核糖核酸的研究

文中研究了从青霉菌丝体中提取纯化核糖核酸的工艺条件。采用盐碱法破碎细胞,调抽提液 pH值至4.6以沉淀部分蛋白质,然后用中性蛋白酶AS1.398处理分级沉淀后的上清液,详细考察了蛋白酶用量、反应温度、初始pH值和反应时间对核酸纯度的影响。酶解液经截留相对分子质量为6.0×10⁴的超滤膜过滤后,核糖核酸的纯度和得率分别是72.1%和0.42%。     

头孢母核7-ACCA的合成与表征

7-氨基-3-氯-3-头孢烯-4-酸（7-ACCA）是合成多种头孢菌素的重要中间体。文中以3-氯代头孢二苯甲酯为起始物,经弱酸苯酚水解去4位二苯甲基和固定化青霉酶PGA-450 裂解去7位苯乙酰基两步反应制得7-ACCA,两步总收率达85.0%以上。用HPLC测定其含量,产品7-ACCA质量分数达99.0%以上,略高于所购进标品。用红外、元素分析和核磁共振对7-ACC A进行了结构表征,结果表明,样品7-ACCA的分析结果与标准样品7-ACCA的结果一致。试验发现,去4位二苯甲基最佳反应温度为60～65℃,去7位苯乙酰基的最佳温度为30～32℃,最佳pH值为9.0。在最佳反应条件下,进行了400～450批的批次实验,转化率和收率都无明显降低。本合成方法工艺简洁、产率高,所用试剂价廉易得,基本无污染。     

篮状菌属蓝状菌组的两个中国新记录种

在系统调查我国蓝状菌(Talaromyces)物种资源的工作中,我们从贵州麻江县、山东青岛沿海滩涂和湖北随州大洪山的土壤中分离得到的三株蓝状菌,即AS1-1=AS3.16070、QD4-1=AS3.16071和SZ1-1=AS3.16072,采用传统分类学和分子系统学方法分别鉴定为安妮索菲篮状菌(T.annesophi...     

圆弧青霉突变株HB01碱性脂肪酶基因的克隆和表达

圆弧青霉(Peniciuium cyclopium)突变株可产生一种具有工业价值的碱性脂肪酶(alkaline lipase,PEL),通过RT-PCR基因克隆及序列测定,获得了PEL完整的基因序列,该基因全长855bp,编码1个由285个氨基酸残基组成的酶蛋白,根据氨基酸组成推导该脂肪酶蛋白的分子量约为30kD.     

蛹草拟青霉有机代谢产物的合成特点及生理作用

研究蛹草拟青霉(Paecilomyces militaris)液体发酵液有机代谢产物的合成特点和固体栽培基质有机代谢产物对蛹草拟青霉菌丝营养生长的影响.结果表明蛹草拟青霉液体发酵液有机代谢产物总量与其菌丝体生物量呈显著负相关.将蛹草拟青霉固体栽培采收后,其培养基质的乙酸乙酯萃取物对其菌丝生长有显著的抑制作用,并能促进菌丝体转色,使其由营养生长阶段向生殖生长阶段的转变时间显著缩短.     

产植酸酶青霉菌株的诱变研究

对产植酸酶的青霉菌株Ａ２进行了诱变研究。分别以ＨＮＯ２－ＵＶ和ＵＶ－５Ｂｕ复合处理，进行了二轮诱变筛选后，得到高于Ａ２５０％以上的变异株６株，其中Ａ２－ＵＶ５９－２０株的酶活达０．８１２±０．０１９ｕ／ｍｌ，为出发菌株Ａ２的二倍多。     

葡萄糖氧化酶与血糖试剂盒的研制

葡萄糖氧化酶是测定血糖的关键工具酶。本文研究了用点青霉As.3.3871菌株发酵生产葡萄糖氧化酶的工艺和配制酶试剂盒的方法,研制的产品经检测符合国家卫生部临床检验中心的技术标准,临床验证表明与国内同类产品品质相同,填补了西北地区的空白,有良好的应用前景。