两种大鼠哮喘模型建立方法的比较

以两种方法建立哮喘大鼠模型,方法一:用新鲜配制的卵清蛋白(OVA)(0.2 mg)致敏,氢氧化铝作为佐剂,连续7天进行1%OVA雾化激发,30 min/次;方法二:用高剂量卵清蛋白(2 mg)致敏,氢氧化铝(Al(OH)_3)与百日咳灭活杆菌共同作为佐剂,先以1.7%OVA气管滴注染毒,随后1%OVA连续雾化激发6 d,30 min/次。通过肺组织形态学观察、无创肺功能测试、肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞分类及计数、组织样本中特异性蛋白IgE以及卵清蛋白特异性IgE(OVA-IgE)含量作为敏感指标判断哮喘模型建立成功与否。结果显示两种哮喘模型大鼠均表现出哮喘大鼠的肺组织病理学改变,肺功能降低,BALF中的细胞总数、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞数增加;采用方法二能够引起组织样本中IgE以及OVA-IgE含量增高,而采用造模方法一未观察到此类变化。因此,方法二能够更好地制备过敏性哮喘模型,可作为较好的哮喘大鼠模型建立方法。     

小鼠过敏性疾病模型的建立

为探索建立小鼠过敏性疾病模型的最佳条件,利用OVA与Alum混合的致敏原致敏BALB/C小鼠,建立过敏性疾病动物模型,采用正交试验的方法研究OVA剂量,Alum剂量与刺激频率3因素的3个不同水平对受试小鼠血清总IgE的影响,评价建立小鼠过敏性疾病模型的最佳条件.经直观计算与统计学分析,针对OVA与Alum混合致敏原致敏BALB/C小鼠模型,最佳试验条件为每次每只小鼠注射50μg OVA与含4mg Al(OH)3的Imject Alum明矾佐剂的混合液0.2mL,每隔4d注射1次,共注射4次.该试验为研究食品抗过敏功能提供了建立过敏性疾病动物模型的简便易行的方法,并提示在建立模型时应注意多试验因素的合理搭配.     

口服益生菌对食物过敏大鼠肠道粘膜免疫及病理变化的实验研究

采用4周棕色挪威大鼠,随机分为PBS对照组、OVA致敏模型组和益生菌治疗组,检测血清中OVA特异性IgE水平,采用HE染色和甲苯胺蓝染色观察肠道炎症水平以及腹腔肥大细胞变化,用电镜观察肠道超微结构组织形态的变化,建立大鼠食物肠道过敏模型,以研究口服益生菌对食物过敏大鼠肠道的免疫变化以及病理变化.研究结果表明:通过口服益生菌治疗,小鼠血清中特异性IgE水平降低,腹腔肥大细胞减少,肠道黏膜结构破坏减轻.采用口服益生菌疗法对大鼠食物过敏性肠道疾病有一定的治疗效果,对食物过敏性肠道疾病的预防治疗提供了一条新途径.     

花生过敏小鼠腹腔肥大细胞SOC活性与ROS相关性研究

研究花生过敏状态下的C57BL/6小鼠腹腔肥大细胞的激活与钙离子通道之间的内在联系, 以及探讨肥大细胞钙离子通道与ROS(reactive oxygen species)之间的关系. 18只雌性C57BL/6小鼠随机分为PBS组(A组)、花生过敏模型组(B组)、vitamin A和vitamin E灌胃治疗组(C组). 酶联免疫吸附实验检测各组腹腔上清液中特异性的IgE和IgG2a水平, 以及细胞因子的变化, 另外测定腹腔上清液与血清中的组胺、ROS含量. 腹腔灌洗液中细胞涂片, 进行肥大细胞计数和脱颗粒比例统计, 荧光共聚焦显微镜观察腹腔肥大细胞钙离子通道SOC(Store oprated channel)的活性. 腹腔上清液中花生特异性IgE、IL-4、IL-10、组胺、ROS、血清中的组胺和ROS、腹腔灌洗液中肥大细胞总数、肥大细胞脱颗粒比例, 都呈现出A组相似文献   

牛奶中过敏原组分的分离纯化及主要过敏原的鉴定

目的:分离纯化并鉴定牛奶中引起过敏反应的主要致敏原组分,并分析其与组胺释放的关系.方法:等电点沉淀、Sephadex G-50凝胶层析和DEAE-Sepharose离子交换层析等技术分离纯化牛奶过敏原组分.脱脂乳浸液免疫C57/BL6小鼠制备抗血清.Western-Blotting分析脱脂乳致敏原组分.间接ELISA检测抗血清中slgE和sIgG;同时荧光法检测各致敏组分体外诱发免疫小鼠腹腔肥大细胞组胺释放率.结果:分离纯化出酪蛋白、β-乳球蛋白、α-乳白蛋白等致敏组分(纯度>90%).免疫印迹表明酪蛋白是主要致敏原组分.抗血清sIgG水平差异显著,sIgE水平没有大的变化;组胺释放率与sIgG水平是一致的,而与sIgE水平没有明显相关性.酪蛋白抗血清sIgG效价最高为1:25 600,组胺释放率高达(73.28±9.31)%.结论:牛奶中主要过敏原组分鉴定为酪蛋白,对牛奶过敏症的体外诊断治疗以及低/无过敏原配方奶的研制有一定的意义.     

1,25(OH)_2VD_3在过敏原特异性免疫治疗花粉过敏哮喘中的应用

以1,25(OH)₂VD₃为佐剂制备软叶针葵花粉变应原疫苗,以小鼠致敏哮喘模型为研究对象进行特异性免疫治疗.通过检测小鼠气道高反应性、血清中特异性抗体、细胞因子以及肺组织病理学切片等指标对治疗模型的构建进行评价,探讨1,25(OH)₂VD₃在过敏原特异性免疫治疗花粉过敏哮喘免疫机制中的作用.结果表明:以1,25(OH)₂VD₃为变应原疫苗能有效抑制花粉特异性IgE的产生和Th2细胞因子IL-4分泌,促进封闭性抗体IgG2a产生和Th1细胞因子IFN-γ的分泌,增加耐受性细胞因子IL-10生产,使Th2反应向Th1反应转变.1,25(OH)₂VD₃在花粉过敏性哮喘治疗中能大幅提高过敏原特异性免疫治疗的疗效.     

建立符合人类诊断标准的变应性鼻炎大鼠模型初探

建立符合人类诊断标准的变应性鼻炎大鼠模型。取6-8周龄的Wistar大鼠27只,雌雄各半,随机分为模型组(n=12)和对照组(n=12),另有3只空白大鼠用于被动皮肤过敏试验(PCA)。模型组以卵清蛋白(OVA)作为变应原辅以氢氧化铝佐剂进行腹腔注射,完成基础致敏;之后用2%OVA生理盐水进行鼻内激发。对照组以生理盐水替代OVA。模型组基础致敏阶段完成后,PCA(+),证明IgE产生;鼻内激发阶段完成后,各大鼠行为学评分均5分,出现喷嚏、鼻痒、流清涕等典型症状,鼻粘膜病理切片HE染色示嗜酸性粒细胞浸润。对照组无上述变化。本实验成功建立了符合人类诊断标准的可重复的变应性鼻炎大鼠模型。     

BALB/c和昆明（KM）小鼠脓毒症盲肠结扎穿孔模型的比较

目的比较应用BALB/c和昆明（KM）小鼠建立脓毒症盲肠结扎穿孔（Cecal Ligation and Puncture,CLP）模型的区别。方法 BALB/c和KM小鼠各30只,分别建立假手术组和CLP模型组,术后6 h进行血常规、生化检测、病理切片检查,术后72 h比较两种品系小鼠盲肠结扎模型的生存率。结果术后72 h两品系小鼠假手术组存活率均为100%,CLP组BALB/c小鼠存活率为40%,KM小鼠存活率为60%,BALB/c小鼠72 h生存能力低于KM小鼠（P〈0.05）。与各自品系的假手术组相比,BALB/c小鼠和KM小鼠在术后6 h白细胞上升,血小板下降,谷丙转氨酶、谷草转氨酶升高（p〈0.05）,肺损伤明显,而红细胞、尿素氮和肌酐无明显差异。结论 BALB/c小鼠较KM小鼠对脓毒症盲肠结扎模型的敏感度更高。     

特异性脱敏法治疗柳树花粉引起的 过敏性鼻炎的实验研究

目的 建立柳树花粉引起的过敏性鼻炎小鼠模型,并对其进行特异性脱敏治疗。 方法 提取柳树花粉蛋白, 对小鼠腹腔注射并滴鼻激发,建立过敏性鼻炎小鼠模型;通过递增变应原剂量对小鼠皮下注射,观察小鼠行为学症 状、鼻黏膜组织形态学变化和检测血清 sIgE 的含量,探索特异性脱敏疗法的效果。 结果 治疗前小鼠出现搔鼻、打 喷嚏、流鼻涕等过敏症状,鼻黏膜中嗜酸性粒细胞明显多于对照组,血清 sIgE 含量高于激发前,成功建立了过敏性 鼻炎小鼠模型;治疗后小鼠过敏症状 逐 渐 减 轻 至 消 失,鼻 黏 膜 中 嗜 酸 性 粒 细 胞 逐 渐 减 少,血 清 sIgE 含 量 减 少。 结论 柳树花粉能够建立过敏性鼻炎小鼠模型,且特异性脱敏法可将其治疗。     

食源性过敏动物模型的研究现状与分析

在全球范围内人类所需的蛋白源性营养严重不足,越来越多的新品种蛋白进入人们的日常饮食,由此导致的食源性过敏也逐渐成为常见和高发的健康问题。虽然已经有一些食物过敏模型供临床诊断和研究使用,但是这种模型体系并不完善,因此以动物模型研究食源性过敏症发生的原因与特征显得愈加重要。本文对各种食源性过敏研究中动物模型的设计进行了分析,在相关实验中通过致敏剂量与致敏发生的关系得到阈值并对过敏反应进行评估,用不同的加工方式处理蛋白质使该蛋白质的致敏能力发生了改变。本文同时阐述了佐剂、饮食和相关因素对实验的影响,以及过敏反应的测量评定指标等。希望通过对以上各方面的分析和总结,为今后食源性蛋白质过敏反应动物模型的设计提供参考。     

Preparation, characterizationand preliminary in vivo studies of inactivated SARS-CoV vaccine

A large quantity of SARS-CoV virus was proliferated in Veto cells, inactivated with β-ptopiolactone, then purified by Sepharose 4FF column chromatography to prepare inactivated vaccine. The vaccine was identified by Western blot, mass spectrographic analysis, ELISA and electton microscopy. The vaccine with or without aluminum hydtoxide adjuvant was inoculated into female BALB/c mice at different dosages. The result showed that the antibodies to SARS-CoV were induced in the mice. The antibody levels induced by the vaccine with aluminum hydroxide were higher than those without aluminum hydroxide.     

粉尘螨疫苗免疫治疗过敏性鼻炎小鼠鼻黏膜的电镜观察

建立了粉尘螨小鼠过敏性鼻炎模型,观察粉尘螨疫苗免疫治疗鼻黏膜超微结构的变化,探讨粉尘螨疫苗免疫治疗的疗效.将24只BALB/c小鼠随机分为阴性对照组(A组)、过敏性鼻炎模型组(B组)、粉尘螨疫苗治疗组(C组),按本室常规方法建立尘螨过敏性鼻炎小鼠动物模型,观察抓鼻、流涕、喷嚏等症状,末次激发24 h后,麻醉小鼠,眼窝取血,ELISA法检测血清中Der f特异性抗体IgE和IgG2a;取鼻黏膜组织固定,切片、电镜观察.结果表明:建模后B组、C组均出现典型的喷嚏、流涕、抓鼻症状,但粉尘螨疫苗免疫治疗组较模型组症状明显减轻,正常对照组无任何行为异常.与B组相比,C组血清中Der f特异性抗体IgE显著降低(P<0.05),而B组和C组IgG2a的含量较A组显著增高(P<0.01).电镜观察:(1)正常对照组:嗅黏膜上皮细胞,表面有大量纤毛,排列整齐;胞质内细胞器丰富.(2)过敏性鼻炎组:嗅黏膜上皮细胞肿胀,嗅细胞表面的纤毛减少或消失,细胞排列紊乱、细胞间有炎症细胞浸润,细胞器退变、空泡化,核变形不规则、固缩.(3)粉尘螨疫苗免疫治疗组:嗅黏膜纤毛排列较整齐,粗细较均匀,纤毛密度较正常对照组低,线粒体致密,与空白对照组相比数量增多.粉尘螨疫苗可以有效改善过敏性鼻炎的症状,抑制过敏性鼻炎鼻黏膜炎症变化.     

FGFR2IIIc及其突变型腺病毒对小鼠乳腺癌作用的研究

目的：研究FGFR2IIIc及其突变型腺病毒对小鼠乳腺癌的作用。方法：确定腺病毒颗粒Ad、Ad-FGFR2IIIc及Ad-FGFR2IIIcS252W感染4T1细胞的最佳MOI,并通过RT-PCR检测外源目的基因的表达。建立BALB/c小鼠的4T1乳腺癌模型,在此模型上原位注射重组腺病毒颗粒治疗17天,观察其对小鼠肿瘤的作用。结果：当MOI=60时腺病毒对4T1细胞的感染率可达到95%以上,RT-PCR结果显示,FGFR2IIIc和FGFR2IIIcS252W可在4T1细胞中成功表达。与对照组和Ad组比较,Ad-FGFR2IIIc对小鼠肿瘤无明显作用,Ad-FGFR2IIIcS252W能显著减缓小鼠肿瘤体积和质量的增长。结论：FGFR2IIIc对BALB/c小鼠4T1乳腺癌无显著作用,FGFR2IIIcS252W能够显著抑制BALB/c小鼠4T1乳腺癌的生长。     

甲型流感病毒感染BALB/c鼠动物模型的建立

目的:建立甲型流感病毒感染BALB/c鼠动物模型,为研究病毒变异、致病机制及抗病毒药物筛选提供模型动物.方法:通过滴鼻的方法将甲型流感病毒感染到BALB/c鼠,观察小鼠的症状和组织病理改变.结果:BALB/c鼠的临床症状明显,病理变化典型.结论:甲型流感病毒感染BALB/c鼠的疾病模型建成.     

氢气对实验性小鼠过敏性鼻炎减轻作用的研究

摘要:目的 观察氢气能否减轻小鼠过敏性鼻炎。 方法 BALB / c 雌鼠 24 只,随机分成正常组、模型组、氮氧组、氢氧组。 除正常组外,其余三组小鼠,前 14 d 内,每 2 天一次,腹腔注射溶有 50 μg 卵白蛋白( ovalbumin,OVA) + 2 mg氢氧化铝[ Al( OH) 3 ]的生理盐水 0. 3 mL;第 15 ~ 21 天给予两鼻腔内滴 10 μL 内含 200 μg OVA 生理盐水进行过敏性鼻炎造模。 在造模过程中,氮氧组小鼠每天给予吸入氮氧混合气体(66. 7% N2 + 33. 3% O2 )2 h;氢气组每天给予吸氢氧混合气体(66. 7% H2 + 33. 3% O2 )2 h。 从第 15 ~ 21 天,观察各组小鼠鼻腔给药后 10 min 内搔鼻子及打喷嚏次数,于第 21 天统一处死各组小鼠,行鼻腔病理组织切片苏木素-伊红( HE) 染色,进行鼻黏膜内嗜酸性粒细胞计数。 结果 造模后,模型组和氮氧组小鼠搔鼻子次数较正常组增多,差异有统计学意义( P < 0. 05) ,而氢氧组小鼠搔鼻子次数与正常组间差异无统计学意义。 造模后,模型组小鼠打喷嚏次数和鼻腔黏膜嗜酸性粒细胞较正常组明显增多( P<0. 05) ,而氢氧组小鼠打喷嚏次数和鼻腔黏膜嗜酸性粒细胞计数较模型组、氮氧组少,差异有统计学意义( P<0. 05) 。 结论 氢气对小鼠过敏性鼻炎有一定的减轻作用。     

Enhancing cellular immune response to HBV M DNA vaccine in mice by codelivery of interleukin-18 recombinant

OBJECTIVE: To investigate the effect of interleukin-18 (IL-18) on immune response induced by plasmid encoding hepatitis B virus middle protein antigen and to explore new strategies for prophylactic and therapeutic HBV DNA vaccines. METHODS: BALB/c mice were immunized with pCMV-M alone or co-immunized with pcDNA3-18 and pCMV-M and then their sera were collected for analysing anti-HBsAg antibody by ELISA; splenocytes were isolated for detecting specific CTL response and cytokine assay in vitro. RESULTS: The anti-HBs antibody level of mice co-immunized with pcDNA3-18 and pCMV-M was slightly higher than that of mice immunized with pCMV-M alone, but there was not significantly different (P>0.05). Compared with mice injected with pCMV-M, the specific CTL cytotoxity activity of mice immunized with pcDNA3-18 and pCMV-M was significantly enhanced (P<0.05) and the level of IFN-Gamma in supernatant of splenocytes cul-tured with HBsAg in vitro was significantly elevated (P<0.05) while the level of IL-4 had no significant difference (P>0.05). CONCLUSION: The plasmid encoding IL-18 together with HBV M gene DNA vaccines may enhance specific TH1 cells and CTL cellular immune response induced in mice, so that IL-18 is a promising immune adjuvant.     

吉林人参低聚肽的免疫调节作用

 为研究吉林人参低聚肽(GOP)对小鼠的免疫调节作用, 选取280 只SPF 级雌性BALB/c 小鼠, 随机分为7 组:空白对照组、乳清蛋白组(150 mg/kg)及5 个GOP 组(37.5、75、150、300、600 mg/kg)。连续灌胃30 d 后, 进行免疫7 项实验测定, 观察GOP 对小鼠免疫器官相对重量、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能和NK 细胞活性的影响。结果表明:GOP 显著提高了ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力、迟发型变态反应能力、抗体生成细胞数、小鼠碳廓清指数、巨噬细胞吞噬率和吞噬指数、NK 细胞活性(P<0.05), 且效果优于乳清蛋白。由此可知, GOP 可以通过增强细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞吞噬能力和NK 细胞活性, 起到增强免疫力的作用。