系统药理学研究重楼皂苷Ⅰ对黑色素瘤增殖凋亡的作用及潜在机制

重楼皂苷Ⅰ治疗黑色素瘤的作用机制尚未完全阐明,仍需进一步研究.采用网络药理学联合细胞实验系统揭示重楼皂苷Ⅰ对黑色素瘤的作用及机制.结果显示重楼皂苷Ⅰ有104个治疗黑色素瘤的潜在作用靶点.PPI网络分析发现,TP53,AKT1,STAT3,MAPK8,MAPK14,JUN,MAPK3,MAPK1,CTNNB1,MYC,RELA,PIK3CA,NFKB1,CCND1,EGFR,VEGFA,TNF,FOS,RB1,IL6为重楼皂苷Ⅰ治疗黑色素瘤的重要靶点.重楼皂苷Ⅰ的潜在作用靶点富集到生物过程251条,涉及负调控细胞凋亡、正调控基因表达、药物反应、正调控基因转录、细胞对缺氧的反应、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、应激反应、肽丝氨酸磷酸化、细胞增殖调控、激活MAPK等;富集到细胞组成27条,涉及核质、胞质溶胶、线粒体、细胞质、细胞核、蛋白质复合体、核染色质、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶全酶复合物、线粒体外膜、细胞表面等;富集到分子功能40条,涉及蛋白结合、MAP激酶活性、蛋白激酶活性、转录因子结合、蛋白质丝氨酸/苏氨酸激酶活性、酶结合、激酶活性、染色质结合等;富集到KEGG通路106条,如癌症通路、FOXO信号通路、TOLL样受体信号通路、TNF信号通路、NOD样受体信号通路、T细胞受体信号通路等.进一步的KEGG通路网络发现,MAPK信号通路,PⅠ3K-Akt通路,凋亡,细胞周期,p53信号通路,Jak-STAT信号通路,TOLL样受体信号通路,mTOR信号通路,NF-kappa B信号通路,癌症通路连接度较高.细胞实验证实重楼皂苷Ⅰ能抑制A375细胞增殖,并且能促进细胞凋亡.文献证实重楼皂苷Ⅰ治疗黑色素瘤的分子机制与PⅠ3K-Akt信号通路有关.研究发现重楼皂苷Ⅰ通过多靶点、多通路调控细胞的增殖、凋亡、细胞周期,从而发挥治疗黑色素瘤的作用.     

贡嘎山东南坡重楼的土壤养分及栽培重楼的性状研究

通过对贡嘎山东南坡重楼资源实地考察,明确了贡嘎山东南坡野生重楼资源的土壤属冲积土壤和森林土壤,土壤中有机质含量和矿质元素丰富,保肥供肥能力强;对多叶重楼、毛重楼、滇重楼、禄劝重楼、花叶重楼、北重楼和卵叶重楼进行栽培,测定其鲜活地下块茎的径粗、径长、产量和新芽数量等指标,结果表明:多叶重楼地下块茎的径粗、产量和新芽数量最高,平均每株的径粗达5.30 cm,单株地下块茎重量达55.83 g,新芽数量达14.53个;栽培重楼时最适宜的重楼品种为多叶重楼,其次是滇重楼和毛重楼。     

华重楼极其常见混伪品的多重PCR快速鉴定体系的建立和应用

目的：建立快速鉴定重楼属中药材华重楼极其常见混伪品的多重PCR方法。方法：收集华重楼,其常见混种栽培种的根茎,叶片及种子样品,对华重楼极其常见混伪品的rDNA-ITS片段进行对比分析;基于重楼属植物rDNA-ITS的SNP位点,针对华重楼,球药隔重楼,黑籽重楼设计3组共6条特异性引物,建立并优化多重PCR反应体系;应用已建立的多重PCR方法对华重楼,球药隔重楼,黑籽重楼及常见的其他重楼属混伪品进行鉴别,验证方法的准确性。通过观察电泳检测扩增产物条带的位置及数量实现快速检测的目的。结果：建立的多重PCR鉴定方法能准确地对华重楼极其常见重楼属混杂栽培种进行快速鉴别。结论：多重PCR方法特异性强,灵敏度高,高效快速,可用于多基源中药材及同属近缘种的快速鉴别,同时为中药材的种质资源鉴定提供可行的方法。     

基于网络药理学研究重楼皂苷抗肿瘤的协同机制

为系统探究重楼皂苷抗肿瘤的协同机制,基于重楼皂苷的含量和活性筛选其抗肿瘤成分,利用靶点数据库获取入选皂苷成分的抗肿瘤靶点,并借助蛋白互作网络分析选出重楼皂苷抗肿瘤的主要作用靶点,对主要作用靶点进行GO(gene on-tology)生物过程富集、KEGG(kyoto encyclopedia of genes and genomes)通路富集,使用Origin 2019b软件构建重楼抗肿瘤的主要皂苷成分-主要作用靶点-主要通路关联网络,分析该网络节点的拓扑参数,进一步明确重楼皂苷抗肿瘤的分子机制.结果显示重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷H、薯蓣皂苷及纤细薯蓣皂苷7个主要皂苷成分作用于38个抗肿瘤主要作用靶点,包括转录与凋亡相关的TP53、AKT1、MYC、CASP3、JUN、MAPK3、ERBB2、STAT3、SRC、MAPK8、BCL2L1、CTNNB1、MAPK1、CREB1、FOXO1、CASP8、FOS;炎症相关的IL6、TNF、IL1B、PTGS2、IL2;血管生成相关的EGFR、VEGFA、EGF、FGF2.参与DNA转录、细胞增殖及凋亡、RNA聚合酶Ⅱ启动子转录、一氧化氮生物合成、磷脂酰肌醇3-激酶信号转导等生物过程;调控卡波济肉瘤相关疱疹病毒(HHV-8)、人巨细胞病毒(HCMV)、人乳头瘤病毒(HPV),乳腺癌、大肠癌、前列腺癌以及PI3K-Akt、TNF、MAPK、mTOR、p53等通路.由此可见,重楼皂苷主要通过促凋亡、抗炎、抗病毒、抗血管生成,以及影响肿瘤细胞信号转导等多种机制,协同产生抗肿瘤效应.     

滇重楼的家种技术初探

重楼是我国著名的传统中药材。滇重楼因云南分布最广、药用价值最高而闻名。近年来，随着重楼用途的不断拓展，制药企业对滇重楼原料的需求量大幅度增加，导致野生资源锐减，供需矛盾增大。为满足市场需求，进行滇重楼的人工驯化和家种技术研究，为发展滇重楼种植业，建立规模化、标准化重楼种植基地提供技术支撑。     

云南重楼属植物资源现状与保护对策

重楼是一种珍稀药用植物,我国共有重楼19种,云南是主要分布地之一,且品种丰富,但由于工业生产对重楼需求量的不断增加,使得野生重楼越来越少,资源日渐枯竭.主要从介绍云南重楼资源的分布情况及分布特点入手,深入分析了重楼资源日渐稀缺濒危的原因,并提出确实可行的保护对策.     

不同栽培基质配比对重楼主要生物学性状的影响研究

以具有黏性的沙壤土、草碳和细河沙按照不同比例配比作为栽培基质,采用单因素试验研究华重楼、狭叶重楼和滇重楼主要生物学性状的表现。通过SSR法方差分析,结果表明:在沙壤土、草碳和河沙比例为1∶0∶0,1∶1∶0,1∶1∶1和1∶2∶1的配比基质中,配比为1∶1∶1的基质最适宜狭叶重楼、华重楼和滇重楼生长,主要生物学性状表现优异,特别是3种重楼的地下茎长、茎粗和单株地下茎质量均最高,3种重楼在6 m~2小区的平均产量分别为13.6,18.8和15.6 kg。狭叶重楼、华重楼和滇重楼在沙壤土、草碳和河沙配比为1∶1∶1与1∶2∶1基质中地下茎产量之间差异不显著,但其地下茎产量极显著高于配比为1∶0∶0,1∶1∶0的产量,狭叶重楼、华重楼和滇重楼在1∶2∶1配比基质中的地下茎产量显著高于配比为1∶0∶0的产量。通过土壤改良,在具有一定黏性沙壤土中种植重楼具有可行性,且其产量较高,具有较好经济收益。     

华重楼及其常见混伪品的多重聚合酶链式反应快速鉴定体系的建立和应用

收集华重楼常见混种栽培种的根茎,叶片及种子样品,对华重楼极其常见混伪品的r DNA-ITS片段进行对比分析。基于重楼属植物r DNA-ITS的SNP位点,针对华重楼、球药隔重楼、黑籽重楼设计3组共6条特异性引物,建立并优化多重PCR反应体系。应用已建立的多重PCR方法对华重楼、球药隔重楼、黑籽重楼及常见的其他重楼属混伪品进行鉴别,验证方法的准确性。通过观察电泳检测扩增产物条带的位置及数量实现快速检测的目的。建立的多重PCR鉴定方法能准确地对华重楼极其常见重楼属混杂栽培种进行快速鉴别。多重PCR方法特异性强,灵敏度高,高效快速,可用于多基源中药材及同属近缘种的快速鉴别,同时为中药材的种质资源鉴定提供可行的方法。     

三峡大老岭地区野生重楼属植物分布格局研究

野生重楼属植物资源是我国重要的药用植物.为掌握宜昌野生重楼种质资源分布和生长现状,推进野生资源的有效保护,更有效服务于宜昌林下中药材种植产业,我们采取野外实地样方调查、典型调查与室内相关资料查对相结合的方法,利用SPSS22.0软件进行统计分析.结果表明：(1)该地区主要分布野生重楼属植物有3种4变种,按照多度指标排序为七叶一枝花>球药隔重楼>华重楼>具柄重楼>小重楼>巴山重楼.(2)不同重楼分布因海拔、坡向、植被类型、土壤养分等因子而差异显著.(3)不同重楼分布格局方面,集中于800～2 000 m,七叶一枝花最宽泛;西南向、硬阔植被分布最集中;七叶一枝花、球药隔重楼、华重楼在阔叶类优势树种群落分布最为集中最为明显;根际土壤有机质、全氮、速效磷、速效钾在理化性质中的系数大.     

滇重楼皂苷提取及含量测定

采用小型浓缩提取设备提取重楼并制备重楼浸膏粉,用高效液相色谱法测定重楼皂苷的含量：色谱柱Lichrospher100RP-18e（5um,4．6mm×250mm）,以乙腈-水为流动相,流速1．0mL／min,检测波长203nm,柱温25℃．在此条件下测定重楼浸膏中皂苷含量为Ⅶ：90．86mg／g,PA：89．93mg／g,H：198．02mg／g,Ⅵ：302．57mg／g,Ⅰ：27．22mg／g,Ⅱ：137．18mg／g．此法制备重楼浸膏简单方便,能够简易快捷测定重楼浸膏中重楼皂苷的含量．     

贡嘎山东南坡重楼资源现状与保护研究

通过对贡嘎山东南坡重楼资源的实地考察,明确了该生态区重楼资源的种类、数量、分布和栽培现状,并针对该生态区重楼资源正在被大量采挖、销售、减少和频临灭绝的现状,提出了相应的保护建议。     

不同育苗基质及激素处理对华重楼种子出苗的影响研究

针对重楼育苗常遇到的出苗时间长、出苗率低和种子播种后腐烂严重的问题,对最佳育苗方式、育苗基质及在较短时间内获得较多的重楼种苗等方面进行研究,旨在为重楼栽培和育苗方面提供一些技术参考。研究了不同厚度稻草覆盖、土壤与草炭不同配比、不同浓度KNO₃与赤霉素（GA3）溶液浸种重楼种子对重楼种子出苗的影响。结果表明：在重楼种子播种前的土壤表面覆盖厚度为4 cm的稻草后播种重楼,再在重楼种子表面覆盖厚度为4 cm的稻草,重楼种子的出苗率最高,达90.8%,与其他覆盖厚度的差异具有高度统计学意义,出苗时间为播种后的第20月;土壤与草炭质量比为1∶3时,重楼种子的出苗率为73.0%,与其他质量比的出苗率的差异具有高度统计学意义,出苗时间为播种后的第20月;用c（KNO₃）为19 mmol/L、c（GA3）为600 mg/L的溶液浸种重楼种子,种子下胚轴长出率最高达56.67%,与排第2位溶液组合（c（KNO₃）为16 mmol/L、GA3的质量浓度为600 mg/L）下胚轴长出率的差异具有高度统计学意义,出苗时间为浸种处理后的第8月。3种育苗方式比较表明：稻草覆盖厚度为4 cm、土壤与草炭质量比为1∶3的育苗基质利于提高重楼种子的出苗率,c（KNO₃）为19 mmol/L、GA3的质量浓度为600 mg/L的溶液浸种重楼种子,可大大缩短重楼种子的育苗时间,幼苗获得率约50%。     

有机肥与无机肥配施对重楼植株表型的影响研究

为了研究有机无机肥配施条件下重楼地上植株和根状茎的表型变化,解决人工种植重楼有机无机肥配施问题,研究人员采用有机肥和无机肥二因素完全随机组合设计进行试验,结果表明:有机无机肥配施对重楼地上茎基径的增粗有明显作用,且对根状茎增大作用极其明显,有利于重楼根状茎产量增加。     

攀枝花市旅游业发展现状、问题及措施

攀枝花旅游起步晚,旅游基础薄弱,旅游发展滞后。本文结合攀枝花旅游业发展的实际情况,深入分析了攀枝花旅游业发展中存在的一些问题,提出了促进攀枝花旅游业可持续发展的相关措施。     

表观遗传调控滇重楼内生真菌活性物质的合成

提出化学表观筛选——分子遗传平台策略,利用表观遗传理论调控滇重楼内生真菌抗菌活性物质的合成。化学表观遗传筛选是对真菌进行高通量化学表观抑制剂的筛选,旨在经济快捷地获得抗菌活性物质合成受到表观调控的菌株;建立分子遗传平台是根据同源基因克隆真菌的相关表观遗传酶类基因,靶向改变表观遗传酶类的表达,旨在获得遗传稳定性高的改良菌株。     

攀枝花市高等教育发展方向研究报告(之二)--攀枝花高等教育发展的方向目标及对策措施

三、攀枝花高等教育发展方向及其对策 (一)攀枝花高等教育发展的总体目标和基本任务 根据攀枝花经济社会发展对高级专门人才的要求,结合全省乃至全国高等教育发展的基本态势,我们认为,攀枝花未来高等教育发展的的总体目标应该是,以攀枝花学院和四川机电职业技术学院为基础,努力发挥攀枝花电大的作用,充分挖掘攀枝花高等教育资源潜能,努力扩大攀枝花高等教育规模,进一步提高攀枝花高等教育办学层次。到2005年,使各类     

攀枝花钒钛铁精矿粉体特性

为了探索攀枝花钒钛铁精矿烧结强化的途径,对其粉体特性进行的研究结果表明,该精矿颗粒粗大、表面光滑、活性差和疏水、烧结时不易制粒、透气性差是利用系数低的主要原因。     

HPLC法测定重楼块根中4种重楼皂苷含量研究

建立HPLC测定重楼块根中4种重楼皂苷含量的方法。结果表明:重楼皂苷Ⅰ质量浓度在0.054~0.540 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.999 6 (n=5),回收率为99.12%,RSD为1.95%;重楼皂苷Ⅱ质量浓度在0.043 4~0.434 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.990 8 (n=5),回收率为99.10%,RSD为1.89%;重楼皂苷Ⅵ质量浓度在0.012 6~0.126 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.993 3 (n=5),回收率为99.46%,RSD为2.01%;重楼皂苷Ⅶ质量浓度在0.010 3~0.103 mg·mL^-1范围内线性关系良好,r=0.999 1 (n=5),回收率为96.52%,RSD为2.25%。HPLC法能够准确检测出重楼块根的主要皂苷成分及其含量,且操作简便,可为重楼中4种主要皂苷含量的检测提供科学方法。     

积淀于心灵深处的“攀枝花情结”──评“攀钢职工文艺作品精选丛书”散文卷《心灵的回声》

散文集《心灵的回声》所传达的“攀枝花情结”表现为：一是对攀枝花创业时期那段岁月异乎寻常的迷恋；二是对那段岁月的陶醉；三是对作为城市和作为物种的攀枝花的偏爱。只有具有独特意义的“攀枝花人”，他们才会产生“攀枝花情结”，才会感到“攀枝花情结”的产生是自然的，才会认定“攀枝花情结”是有价值的。     

重楼活性单体PP-26抑制结肠癌SW620细胞增殖并诱导细胞凋亡

目的:探讨重楼活性单体PP-26对人结肠癌SW620细胞增殖抑制作用及其机制.方法:采用噻唑蓝(MTT)法和克隆形成抑制实验观察不同浓度的重楼单体PP-26对人结肠癌SW620细胞增殖抑制作用;PI单染及Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blotting检测PP-26对细胞周期、细胞凋亡相关蛋白以及Akt和ERK蛋白的表达.结果:与正常肝LO2细胞相比,重楼单体PP-26能显著抑制SW620细胞的生长,作用呈剂量-效应关系;随着PP-26浓度的增加,细胞克隆形成逐渐减少,与细胞对照组相比有显著差异;不同浓度PP-26作用后,细胞阻滞于G1期;PP-26作用细胞24 h后,CDK4、CDK6表达下降,P15、cyclin D1表达增加;不同浓度PP-26作用后,细胞晚期凋亡率增加,随浓度增加有上升趋势;PP-26作用细胞24 h后,线粒体相关凋亡信号通路蛋白Caspase-9、Caspase-3表达下降,PARP切割条带增加,细胞促凋亡蛋白Bax的表达增加,抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-x L减少,p-Akt和p-ERK蛋白表达均下降.结论:重楼活性单体PP-26通过上调p15促进结肠癌SW620细胞阻滞于G1期,通过抑制P13K/Akt信号通路及ERK信号通路,活化线粒体凋亡通路,诱导细胞凋亡.