葡萄幼胚培养技术的研究(Ⅰ)——激素对胚培养的影响及培养基的筛选

选用巨峰、里扎马特和无核白葡萄的幼胚接种在附加了GA3、IAA、6-BA等的不同激素水平的MS培养基上进行培养,结果表明花后60d的巨峰和花后50d的无核白的幼胚在附加GA30.5mg.L-1、IAA2.0mg.L-1、6-BA0.5mg.L-1的培养基上分别得到了44.0±8.9%和96.0±8.9%的发育率与31.9±6.4%和37.5%的成苗率;花后60d的里扎马特幼胚在附加GA30.5mg.L-1、IAA0.5mg.L-1、6-BA0.5mg.L-1的培养基上得到了76.0±8.9%的发育率和63.5±5.5%的成苗率.筛选出了适合不同品种的最佳胚培养、萌发以及成苗培养基,为葡萄新品种的选育提供了新的方法与技术依据.     

里扎马特葡萄胚培养技术的研究

选用里扎马特葡萄在花后35～60 d,取其胚接种在含有GA3、IAA、6-BA的不同激素水平MS培养基上,进行胚培养,以研究里扎马特葡萄的胚培养技术.结果表明,里扎马特葡萄胚在花后60 d培养效果最好,在附加GA30.5 mg/L、IAA1.5 mg/L的MS培养基上得到了(84.0±8.9)%的发育率和(76.7±2.9)%的成苗率(p<0.01).     

巨峰葡萄胚培养技术的研究

选用巨峰葡萄在花后35～60 d,取其胚接种在含有GA3I、AA、6-BA的不同激素水平MS培养基上进行胚挽救,以研究葡萄的幼胚培养技术.结果表明,巨峰葡萄在花后60 d效果最好.在附加GA30.5 mg/LI、AA1.0 mg/L、6-BA0.5 mg/L的最佳培养基上得到了(76.0±16.7)%的发育率和(69.1±13.1)%的成苗率.     

以红宝石无核葡萄为亲本胚挽救育种技术的研究

为了提高无核葡萄胚挽救中幼胚的成苗率,对以红宝石无核葡萄为母本,巨玫瑰、玫瑰香和希姆劳特葡萄为父本的杂交胚珠进行胚挽救,分析不同父本、取样时间和培养基对杂交胚珠胚挽救效果的影响.结果表明,在胚的离体培养中,以巨玫瑰葡萄作父本更有利于胚的发育和萌发,红宝石无核×巨玫瑰、红宝石无核×希姆劳特和红宝石无核×玫瑰香杂交胚珠的最佳取样时期均为授粉后61 d,相应的胚萌发率分别为20.55%、6.56%和9.60%.分析不同发育培养基和萌发培养基对胚挽救效果的影响,适合红宝石无核×希姆劳特和红宝石无核×玫瑰香杂交胚发育的为N1培养基(Nitsch+1.5 mol/L IAA+0.5 mol/L 6-BA+0.5 mol/L GA3+60 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1 g/L活性炭,pH值为5.8),胚发育率分别为8.00%和13.92%.适合胚萌发成苗的为W1培养基(WPM+0.2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1.5 g/L活性炭,pH值为5.8).通过根尖染色体倍性鉴定,确定红宝石无核×巨玫瑰的9株杂交幼苗中,4株为三倍体幼苗,5株为二倍体幼苗.     

红宝石无核和希姆劳特葡萄杂交胚挽救技术研究

为了优化无核葡萄杂交胚的离体培养条件,分别以种子败育型无核品种红宝石无核和希姆劳特为父、母本杂交和自交胚珠的材料,进行亲本基因型、取样时期、发育培养基、萌发培养基对无核葡萄胚挽救效果影响的研究.结果显示:红宝石无核与希姆劳特正反交时,以红宝石无核作母本时杂交胚的发育率和萌发率均高于以希姆劳特作母本的杂交胚;红宝石无核自交胚的发育率和萌发率高于希姆劳特自交胚;红宝石无核×希姆劳特杂交胚珠和红宝石无核自交胚珠的最佳取样时期均为授粉后61 d,希姆劳特×红宝石无核杂交胚珠和希姆劳特自交胚珠的最佳取样时期均为授粉后54 d.适合于红宝石无核×希姆劳特和希姆劳特×红宝石无核杂交胚发育的培养基为:Nitsch+1.5 mol/L IAA+0.5 mol/L 6-BA+0.5 mol/L GA3+60 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1 g/L活性炭,胚发育率分别为8.40%和8.30%;适于红宝石无核×希姆劳特和希姆劳特×红宝石无核杂交胚萌发的培养基为:WPM+0.2 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖+5 g/L琼脂+1.5g/L活性炭,萌发率分别为7.32%和6.12%.     

食用百合组织培养及扩繁技术研究

以新鲜的兰州百合为材料,研究不同激素配比对诱导百合鳞片芽的产生及扩繁的影响,结果表明:培养基中NAA、IAA与6-BA同时使用,分化效果比单独使用NAA和IAA效果好,MS+IAA 0.05mg·L-1+6-BA0.1mg·L-1可作为鳞片多芽产生培养基,其诱导鳞片芽分化率最高,达100%,且芽长势良好.MS+NAA0.1mg·L-1+6-BA 0.25mg·L-1和MS+IAA0.25mg·L-1+6-BA 1.00mg·L-1作为芽继代扩繁的理想培养基,平均每个外植体增值率超过4.5.百合的组织培养的最适外植体是外层鳞片与鳞茎盘接连的下部鳞片.     

荷花成熟胚的组织培养

以荷花成熟胚为材料,研究不同消毒剂、培养基对荷花离体培养的影响.结果表明:0.1%HgCl2消毒8 min,污染率为0,成活率86.63%是有效消毒方式;根据不同浓度植物激素的培养基对成活率,萌发率及生长状况分析,MS+0.5 mg.L-16-BA+0.5 mg.L-1NAA为适宜诱导荷花成熟胚萌发的培养基;以MS+1.0 mg.L-16-BA+1.0 mg.L-1NAA为培养基所生成的根数、芽数相对较高.     

一品红离体培养及体细胞胚高频率发生的研究

一品红苞片为外植体进行离体培养,以MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1固体培养基愈伤诱导率及相对生长量最高。此培养基中继代的愈伤组织转入MS+2,4-D 1.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+水解酪蛋白80 mg.L-1固体培养基时体细胞胚分化率最高。加入活性碳1 g.L-1有利于高频率体细胞胚发生。MS培养基优于N6和B5培养基,有利于高频率体细胞胚发生。胚性愈伤组织及时转入液体培养基中悬浮振荡培养有利于高频率体细胞胚发生。     

葡萄幼胚培养技术的研究(Ⅱ)——接种时间及处理方法对胚培养的影响

选用花后35￣60d的巨峰、里扎马特和无核白葡萄,取其幼胚接种于不同激素水平M S培养基上,进行胚培养,以研究接种时间及处理方法对胚培养的影响.结果表明对花后60d的里扎玛特和巨峰的幼胚进行胚培养,其发芽率和成苗率显著高于层积处理后催芽播种的种子的发芽率与出苗率.低温和横切处理能有效地促进葡萄幼胚的萌发.花后60d的巨峰和里扎马特的发育率和成苗率最高;花后60d的无核白的幼胚发育率最高,花后50d的幼胚成苗率最高.     

青钱柳离体胚的培养及快速繁殖

以青钱柳离体胚为材料,采用正交试验设计对影响其萌发、快速成苗的各种因素进行研究,并进行了诱导增殖试验.结果表明,基本培养基种类是影响青钱柳离体胚萌发和成苗最关键的因素.离体胚萌发的最佳培养基组合为WPM GA3(10 mg/L) 蔗糖(30 g/L),萌发率可达100%;适宜成苗的培养基组合是WPM GA3(5 mg/L) 麦芽糖(30 g/L),培养60 d的无菌苗移栽成活率为100%;最适的增殖培养基为WPM 6-BA(0.5 mg/L),平均增殖系数为3.45.     

金边瑞香花瓣的愈伤组织诱导和植株再生研究

以金边瑞香的花蕾作为外植体,接种于MS附加不同种类外源激素及其浓度配比的培养基中。结果表明:MS 6-BA2.00mg.L-1 IAA0.10mg.L-1愈伤组织诱导率最高,达85.1%;MS Zeatin1.00mg.L-1 6-BA0.10mg.L-1愈伤组织的分化率最高,达97.5%;MS IBA1.00mg.L-1有利于生根,生根率达89.2%,且试管苗生长健壮.     

中间锦鸡儿组织培养体系的建立

以中间锦鸡儿茎段为外植体,建立了它的组织培养体系,具体条件如下:愈伤组织诱导培养基为MS+GA30.15mg/L+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.4mg/L+AC 0.1g/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,愈伤诱导率达33.33%;丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,诱导率为13.33%;诱导生根培养基为MS+IAA 0.5mg/L+GA30.15mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,生根率达60%;将生根幼苗移至蛭石和营养土体积比为2∶1的基质中,移栽成活率高达100%.     

紫苏离体再生体系的建立

以紫苏种子为材料,进行紫苏离体再生研究。试验结果表明:紫苏种子先用75%酒精处理30s,再用0.1%HgCl2消毒剂处理8min,在MS培养基上种子萌发率为43%;最佳不定芽诱导培养基为MS+0.5mg.L-1 NAA+3.0mg.L-1 6-BA;最佳增殖培养基为MS+0.1mg.L-1 NAA+2.0mg.L-16-BA;最适生根培养基为MS+0.2mg.L-1NAA,生根率达96.4%;移栽的成活率为74%。     

秋葵幼胚培养试验初步研究

以秋葵幼胚为试材,筛选较适合幼胚萌发和成苗的培养基,并研究胚龄分别为开花后4 d、6 d、8 d、10 d的幼胚萌发率和成苗率.结果表明,秋葵幼胚萌发和成苗的适宜培养基分别为Qz(Ms+0.1 mg/mL BA+1.0 mg/mL GA3)和QG(Ms+0.5mg/mL GA3);开花后8 d的幼胚萌发率和成苗率最高.由此建立秋葵幼胚培养的方案.     

人参快繁条件的优化

以人参种子在无菌条件下培养出来的无菌苗的幼嫩叶片以及不同器官、人参成体的块茎及叶作为外植体,接种到附加着不同浓度的NAA、KT、IAA、6-BA以及它们分别组合的MS固体培养基上；总结出外植体在同样的诱导条件下有很大的差异,且不同的培养基对外植体的影响不同。结果表明,MS+NAA0.1mg·L-1+KT0.5mg·L-1是诱导愈伤组织的最好的培养基；最理想的诱导丛生芽的培养基为MS+6-BA1.5 mg·L-1+NAA0.5mg·L-1；最佳诱导不定芽生根的培养基为MS+KT0.5mg·L-1+IAA0.3mg·L-1+6-BA0.2mg·L-1+活性炭3g；移栽、扦插的试管苗在炉灰渣中生长得最旺盛,所以最理想的基质是炉灰渣。     

人参快繁条件的优化

以人参种子在无菌条件下培养出来的无菌苗的幼嫩叶片以及不同器官、人参成体的块茎及叶作为外植体,接种到附加着不同浓度的NAA、KT、IAA、6-BA以及它们分别组合的MS固体培养基上;总结出外植体在同样的诱导条件下有很大的差异,且不同的培养基对外植体的影响不同。结果表明,MS+NAA0.1mg·L-1+KT0.5mg·L-1是诱导愈伤组织的最好的培养基;最理想的诱导丛生芽的培养基为MS+6-BA1.5 mg·L-1+NAA0.5mg·L-1;最佳诱导不定芽生根的培养基为MS+KT0.5mg·L-1+IAA0.3mg·L-1+6-BA0.2mg·L-1+活性炭3g;移栽、扦插的试管苗在炉灰渣中生长得最旺盛,所以最理想的基质是炉灰渣。     

西红花柱头状物再生条件的优化

以西红花(Crocus sativusL.)的花被和花柱为外植体诱导培养花柱柱头状物,以MS+NAA 5mg.L-1+6-BA 5mg.L-1+蔗糖4%+琼脂0.8%和B5+KT 5mg.L-1+IAA 4mg.L-1+2,4-D 1mg.L-1+Pro 0.5mg.L-1+蔗糖6%+琼脂0.8%为诱导培养基,选取不同长度的顶芽,在不同的温度、光照条件,以及蔗糖梯度浓度条件下,对柱头状物再生的条件进行优化.结果表明,在培羊基MS+NAA 5mg.L-1+6-BA 5mg.L-1+蔗糖6%+琼脂0.8%上,18℃,黑暗条件下培养,花被柱头状物再生的诱导率达75.0%.     

凤仙花的组织培养与离体快繁

以凤仙的带芽茎段、茎尖、幼叶为外植体,在附加不同种类及浓度的植物激素的MS培养基上进行快速繁殖,诱导芽的最适培养基为MS 0.5 mg·L-1 BA 0.01 mg·L-1 IAA 0.01 mg·L-1 GA3,芽的增殖培养基为MS 1.0 mg·L-1 BA 0.01 mg·L-1 IAA 0.01 mg·L-1 GA3;增殖系数为6～8倍.根诱导最佳培养基为MS 0.1～0.5 mg·L-1 BA 0.005 mg·L-1 IAA.     

金银花(Lonicera Japonica Thunb.)愈伤组织的诱导和分化

以金银花的茎、叶片、芽为外植体,在70个不同浓度IAA、NAA、6-BA组合的MS培养基上进行愈伤组织诱导,分析了金银花的快速繁殖体系的培养条件,发现芽是金银花组织培养的最佳外植体,IAA和NAA的最佳浓度均为1 mg·L-1,6-BA的最适浓度为0.1 mg·L-1,确定适宜的初代培养基为 MS 6-BA 0.1 mg·L-1 NAA 1 mg·L-1,诱芽培养基为MS 6-BA 0.1 mg·L-1 NAA0.02 mg·L-1.     

番茄高效再生体系的建立

比较了不同基本培养基,不同激素及其不同浓度组合对番茄愈伤组织的增殖、不定芽分化及其生根的效果.结果表明:MS+NAA0.02～0.10mg·L-1+6-BA3.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1(pH=5.8)均可诱导愈伤组织的增殖,但以MS+6-BA3.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1+蔗糖30g·L-1最佳;MS+IAA0.1mg·L-1+6-BA2.0mg·L-1+蔗糖30g·L-1培养基对愈伤组织分化不定芽的效果最佳;MS+IAA0.1mg·L-1+蔗糖20g·L-1培养基对生根较好.