巴东红三叶愈伤组织的诱导和胚性细胞悬浮系的建立

以红三叶（Trifoliumpratense）野生品种巴东红三叶的叶片为外植体，在MB－1至MB－9的固体培养基上诱导愈伤组织，筛选出最佳培养基是MB－9培养基．愈伤组织形成以后，均经MB－9固体培养基上继代培养3～4次后，获得胚性愈伤组织，然后转至MB＋3mg／1.2，4－D＋0．7mg／LBA＋0．2mg／LNAA＋2mg／L甘氨酸十500mg／LCH＋3％蔗糖的液体培养基中，经强化培养两个月后，获得胚性细胞悬浮系．实验结果表明，缩短换液时间，即每隔3～4d换液一次，可加快胚性细胞悬浮系的建立．     

蒲苇愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以蒲苇成熟种子为外植体,MS为基本培养基并附加不同激素组合,筛选出诱导蒲苇愈伤组织产生和分化的最佳培养基,成功建立蒲苇的再生体系．试验结果表明：蒲苇种子最佳灭菌方式是将种子灭菌前用无菌水浸泡24h左右,然后用75％酒精消毒20s,再用0．1％（W／V）氯化汞消毒灭菌10min．愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2,4-D3．0mg/L＋6-BA0．1mg／L;愈伤组织分化的最佳培养基为MS＋6-BA 2．0mg／L＋NAA 0．1mg/L分化继代的最佳培养基为MS＋6-BA 1．5mg／L＋NAA 0．2mg/L;生根最佳培养基配方为1／2MS＋NAA 0．8mg/L＋6-BA 0．2mg／L＋（0．02％）AC．     

互叶白千层愈伤组织诱导及植株再生

本文报导了互叶白千层从无菌种子苗叶片诱导愈伤组织到植株再生的研究结果．实验表明：以继代代数不同的无菌苗叶片为诱导材料,在MS基本培养基中添加TDZ0．4mg／L＋2,4-D0．4mg／L的第五代继代苗诱导效果较好,愈伤组织诱导率达100％．在互叶白千层愈伤组织分化阶段,在MS基本培养基中,激素组合筛选中以添）m6-BA2．0mg／L＋IAA2．5mg／L的分化效果较好,分化率高达94．53％．在分化苗伸长生根阶段,以MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．8mg／L＋AC0．1％的效果较为显著,苗平均高度9．4cm,苗最壮,根粗且壮．     

不同苜蓿栽培品种再生体系的差异性比较

通过对10种不同苜蓿的栽培品种再生体系的比较研究,以及再生条件的优化,筛选出易于再生的费纳尔,金皇后,赛特6号3个苜蓿栽培品种．结果表明：胚性愈伤组织诱导培养基：改良Ms＋2,4-D2mg／L＋6-BA0．5mg／L＋蔗糖3％,胚性愈伤组织诱导率为65％～92％;胚状体诱导培养基：SH＋2,4-D2mg／L＋6-BA0．5mg／L＋LH300mg／L＋蔗糖3％;胚状体诱导率为42．3％～83．4％;胚状体再分化培养基：SH＋GA30．5mg／L＋LH300mg／L＋肌醇60mg／L蔗糖3％;胚状体萌发率为20％～75％;生根培养基：1／2Ms＋NAA0．3～0.5mg／L＋蔗糖2％,生根率为91％,移栽成活率93％．     

平车前愈伤组织的诱导和继代培养

平车前受精胚珠、叶及根分别接种于MS＋2．4—D2mg／L＋ZT0．1mg／L、MS＋2．4－D1mg／L＋ZT0．1mg／L及MS＋2．4－D1mg／L＋NAAmg／L＋ZT0．1mg／L培养基上，均能脱分化产生愈伤组织，继代培养获大量愈伤组织．     

苦豆子愈伤组织的诱导与继代培养的去褐化研究

利用苦豆子的子叶进行愈伤组织的诱导与继代,筛选出诱导愈伤组织及继代时的最佳培养基．实验发现各种培养基均能诱导出愈伤组织,0．5—1．0mg／L的2,4-D和0．5—2．0mg／L的细胞分裂素6-BA或与Zt共同添加,诱导的愈伤组织状态较好,且当NAA（浓度为0．5mg／L）存在时可改善愈伤组织的状态;浓度为2．0mg／L的Kt和1．0mg／L以下的2,4-D、NAA分别或同时使用时同样可得状态较好的愈伤组织．低浓度的2,4-D、6-BA混合使用或添加1．0mg／L以下的NAA是愈伤组织继代时较好的激素组合,同时观察到0．5mg／L2,4-D和0．5mg／L Kt以及0．5mg／L2,4-D、0．2m-g／LNAA和0．2mg／LTDZ两种组合也能较好的继代愈伤组织．愈伤组织的去褐化除调节激素的浓度与配比外,还采取了其他的去褐化措施,发现添加0．1％活性炭的条件下快速继代（2d继代一次）以及调整基本培养基是较好的去褐化措施．     

影响红掌品种＂若比诺＂愈伤组织诱导因素分析

以红掌品种“若比诺”的无菌苗为材料,研究了影响红掌品种“若比诺”愈伤组织的诱导因素．结果表明,基本培养基、外源激素、外植体类型和光照培养条件对愈伤组织的诱导都有显著影响．茎段在MS＋BA（2．0mg／L）＋2,4．D（0．2mg／L）培养基中愈伤组织诱导率最高,达到100％,叶片在1／2MS＋BA（2．0mg／L）＋2,4-D（0．2mg/L）培养基中诱导率最低（为0）．不同外植体的愈伤组织诱导率有明显的差异,其诱导率的大小依次为茎段〉叶柄〉叶片,茎段最适合做外植体源．光培养下的愈伤组织诱导率比暗培养下的高,光照有利于“若比诺”的愈伤组织的诱导．     

结缕草的组织培养

以辽宁产结缕草种胚为材料，在MS＋100mg／L肌醇＋0．4mg／L VB1 1．0mg／L 2，4—D＋30g／L蔗糖＋0．8％琼脂培养基上暗培养，产生愈伤组织，诱导率为85％．愈伤组织经多次继代培养后可保持分化潜力．光照培养后分化出丛生状叶片，并在培养基MS＋100mg／L肌醇＋0．4mg／L VB1＋30g／L蔗糖＋0．8％琼脂上大量生根，形成再生植株，再生率为80％．平均每个种胚可产生20—30个小植株，再生周期为80d左右。     

南方红豆杉的愈伤组织培养研究

以南方红豆杉（Taxus chinensis var．mairei Cheng et L．K．Fu）的营养器官嫩茎、叶和叶柄等为外植体进行愈伤组织诱导研究,试验结果表明：（1）各外植体中诱导愈伤组织的难易程度为叶柄处〉叶片〉茎段;（2）2,4-D比NKA更有利于愈伤组织的形成;（3）B5比MS培养基更有利于愈伤组织的形成,因此诱导南方红豆杉产生愈伤组织的最佳培养基配方是：B5＋2,4-D4．0mg·L^-1。＋ABT生根粉0．3g·L^-1,愈伤组织的诱导率达93％;（4）继代增殖培养的配方B5＋2,4-D0．1mg·L^-1＋ABT生根粉0．1g·L^-1,增殖系数可达3．6．     

蒜头果细胞悬浮培养的研究

采用蒜头果(Malania oleifera Chun et．K Lee)新鲜种子的胚乳在4种含不同激素浓度组合的培养基上诱导产生愈伤组织并建立起细胞悬浮培养体系。结果表明：愈伤组织诱导率为66．7％～86．6％，其中以MS 6-BA0.5mg／L 2，4-D 2．0mg／L 蔗糖3％的培养基最佳，其诱导出的愈伤组织具有较强的增殖能力和较好的脆散结构；最佳继代培养基为MS 6-BA0．2mg／L 2，4-D2．0mg／L 蔗糖3％；将继代后的愈伤组织转入6种含不同激素浓度组合的MS液体培养基中进行振荡培养，在综合分析各培养基的单细胞密度，细胞团块密度。细胞生物量增长率等指标后，初步筛选出MS 6-BA0．2mg／L 2，4-D 2．5mg／L 蔗糖3％培养基为较好的液体培养基。     

三叶半夏细胞悬浮培养和植株再生的研究

三叶半夏幼嫩叶片在MS+2,4-D2.0mg/L+BA0.5mg/L培养基上一个月内可以诱导出愈伤组织.取颜色鲜黄的愈伤组织进行悬浮振荡培养,经3～4次继代培养得到分散性好的细胞悬浮系.悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养12～16d达对数生长期,细胞鲜重在第18d达到最大值.悬浮液pH值的变化在对数生长期同生长曲线一致.将细胞悬浮液过滤得到的小细胞团接种于MS+NAA0.2mg/L+BA1.0mg/L分化培养基上,40d分化出小植株.     

杜仲细胞的悬浮培养

杜仲外植体在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ的培养基上可诱导出生长速度快、离散性好、适合于悬浮培养的愈伤组织；愈伤组织在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ的液体培养基上进行振荡培养，经３～４次继代，即可建立起悬浮细胞系；悬浮细胞的形状为长形、椭圆形、圆形和“月牙”形。     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养研究

以曼地亚红豆杉(Taxusmedia var.hickss)嫩茎和嫩叶为外植体,进行愈伤组织诱导和继代培养研究。愈伤组织诱导以MS为基本培养基,继代培养以MS和B5为基本培养基,分别添加不同浓度和组合的细胞分裂素(6-BA、TDZ、KT、2-ip)、生长素类激素(NAA、2,4-D),和水解乳蛋白、活性碳等抗褐化试剂,考察其对愈伤组织诱导和继代培养的影响。结果表明,曼地亚红豆杉嫩茎有很强的分生能力,比嫩叶更易于诱导愈伤;在培养基MS TDZ0.002mg/L NAA1.0mg/L、MS TDZ0.002mg/L 2,4-D1.0mg/L、MS TDZ0.002mg/L NAA1.0mg/L 2,4-D1.0mg/L和MS KT1.0mg/L 2,4-D1.0mg/L NAA1.0mg/L上,嫩茎愈伤的诱导率达100%,生长迅速,品质良好,利于继代培养;培养基B5 KT1.0mg/L 2,4-D2.0mg/L NAA1.0mg/L适用于愈伤继代,每30d增殖倍数5.2倍;培养基中添加活性碳500mg/L、维生素C 1000mg/L或水解乳蛋白1000mg/L对抑制材料褐化有一定的效果。     

大花君子兰单细胞培养再生绿色植株

以大花君子兰（ｃｌｉｖｉａ ｍｉｎｉａｔａ） 瘤状结构的胚性愈伤组织为单细胞培养来源,在附加２ ｍｇ／ＬＫＴ、１ｍｇ／Ｌ２ ,４ —Ｄ 及３ ％ 蔗糖的ＭＳ基本培养基上培养,诱导出的愈伤组织经同一诱导培养基长期继代培养后形成幼苗,将较大的幼苗转入状苗生根培养基（ 附加０－５ ｍｇ／ＬＫＴ 和０－１ｍｇ／ＬＮＡＡ的１／２ ＭＳ培养基） 上继代培养形成再生绿色植株。绿苗再生频率随继代时间的延长而提高。     

组培条件对何首乌愈伤组织诱导及生长的影响

为了寻找适合何首乌愈伤组织诱导与生长的培养条件，本文考察了愈伤组织形成的比率，分析了取样时间、光照条件、培养基中2，4-D、6BA和IBA的浓度对愈伤组织诱导和生长的影响。实验表明，在黑暗中，在添加有1．5mg/L2，4-D，1mg/L 6BA和0．5mg/L BA的MS培养基上，夏季取样的茎段，愈伤组织诱导率可达100％。     

高羊茅高频再生体系的建立

目的建立高频再生体系,为相关基因的转化提供良好的受体系统。方法以高羊茅(Fes-tuca.arundinacea)成熟种子为外植体,以MS为基本培养基,进行高羊茅胚性愈伤组织诱导、继代、分化及生根培养。结果初生愈伤组织在MS 2,4-D5 mg/L CH400 mg/L 蔗糖60 g/L 琼脂12 g/L的继代培养基诱导出体细胞胚后,在含6-BA2.0 mg/L NAA0.5 mg/L的MS培养基上分化形成丛生苗,分化率达78.9%;再生苗在1/2 MS NAA0.5 mg/L生根培养基上生根,生根率达100%。结论MS 2,4-D 9 mg/L为最佳愈伤组织诱导培养基,MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.5mg/L为最佳分化培养基,1/2 MS NAA0.5 mg/L为最佳生根培养基。     

水苏无性系技术建立的研究

以水苏根茎为材料,进行了愈伤组织的诱导和分化、试管苗的生根、移栽和定植的研究,建立起水苏无性系技术.结果证明:MS+BA 0.5 mg/L+2,4-D 1.0～2.0 mg/L是愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS+BA 0.5mg/L+2,4-D1.5mm/L是愈伤组织继代培养的理想培养基;MS+BA 0.5 mg/L...     

西红花球茎组织培养的研究

以球茎切块为外植体，MS为基本培养基，0．5mg·L^-1 6-BA和2mg·L^-1 2，4-D为激素，在（20±2）℃，黑暗环境下培养，可以获得98％的愈伤组织诱导率．愈伤转入MS＋5．0mg·L^-1 6-BA＋5．0mg·L^-1 NAA培养基中，可诱导丛生芽的产生，将丛生芽切成单个不定芽后转移到MS＋4．0mg·L^-1 6-BA＋0．5mg·L^-1 NAA的培养基中，光照条件下可诱导新生小球茎的产生．     

山苍子带芽茎段的组织培养

以山苍子(Litseacubeba)带芽茎段作为外植体进行组织培养实验。实验以MS为基本培养基,按不同比例添加激素,配制成3种培养基:MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA2.0mg/L,MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA2.0mg/L,MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA3.0mg/L,MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA3.0mg/L,MS培养基作为空白对照,在暗培养和光照培养条件下进行愈伤组织和芽的诱导分化。结果显示:MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA2.0mg/L为诱导愈伤组织的最好培养基,诱导率最高,达55.6%;MS+2,4-D0.5mg/L+6-BA3.0mg/L为最好的萌芽培养基,萌芽率最高,达60%;MS+2,4-D1.0mg/L+6-BA3.0mg/L为最好的丛生芽增殖培养基,增殖系数达8±1.4。     

小冠花高效体细胞胚胎发生与植株再生的研究

目的建立小冠花稳定高效体细胞胚胎植株再生体系。方法采用植物离体组织培养技术,通过优化外植体,基本培养基及其激素组合,提高体细胞胚发生和植株再生频率。结果子叶外植体在附加1.0mg/L 2,4-D,1.0mg/L NAA,0.5mg/L KT和100mg/L脯氨酸的MSB培养基上35d100%形成体细胞胚,产生体细胞胚数量达625个/g,在MS KT 1.0mg/L IBA 0.1mg/L 脯氨酸300 mg/L培养基上转换成完整植株的平均数为21棵/g。再生植株移栽成活率为80%,其形态特征和生长习性未见变异。外源激素是体细胞胚胎诱导所必需的,2,4-D是其中最关键的一种。结论建立了小冠花高频稳定高效体细胞胚胎发生和植株再生体系。