肺泡Ⅱ型细胞和肺表面活性物质研究进展

肺泡Ⅱ型细胞是构成肺泡壁的重要成分,其主要功能是分泌肺表面活性物质,本文综述了近年来国内外在肺泡Ⅱ型细胞和肺表面活性物质研究领域的重要进展。     

LPS致大鼠肺泡Ⅱ型细胞凋亡及对Fas抗原表达的影响

探讨Ｆａｓ信号通路在肺泡Ⅱ型细胞损伤作用的可能机制及意义．建立大鼠肺泡Ⅱ型细胞体外培养，采用流式细胞术、原位杂交、逆转录、多聚酶链式反应等方法，观察大肠杆菌内毒素（ＬＰＳ）对肺泡Ⅱ型细胞ＦａｓｍＲＮＡ、蛋白质及细胞凋亡的影响．成功建立大鼠肺泡Ⅱ型细胞体外培养技术，ＬＰＳ刺激后，肺泡Ⅱ型细胞ＦａｓｍＲＮＡ、蛋白质表达均显著增加（Ｐ＜０．０１），ＬＰＳ可诱导肺泡Ⅱ型细胞凋亡，并在一定范围内呈量－效关系，表明ＬＰＳ对肺泡上皮的损伤效应，除直接损伤作用外，还可能通过诱导Ｆａｓ抗原表达增加，而致细胞凋亡的方式进行     

小白鼠肺毛细血管和肺泡铸型的扫描电镜观察

用扫描电镜观察了ＡＢＳ丁酮溶液灌注的小白鼠肺泡及其毛细血管．小白鼠肺泡呈不规则的多面体形,大小不等,表面光滑,有较多的Ⅱ型细胞顶端压迹．两肺泡之间的桥样结构为肺泡孔,其数量、大小不等．胸膜下毛细血管网较稀疏,网孔粗大,网眼形态不规则．肺泡隔内的毛细血管为单层密集网．探讨了陆生脊椎动物肺微血管构筑情况与呼吸效率的关系．     

P311在肺泡发生中的作用初探

P311是一个由肺泡形成相关阶段相对于肺泡成熟期差减杂交库中获得的上游调节基因，为探讨其在肺泡发生过程中的可能作用，本以真实时间PCR(realtimePCR)和免疫组织化学方法确定了P311在肺器官发育过程中的表达特点，结果显示P311的表达无论在时间上还是在组织细胞分布上都与肺泡的发生密切相关．同时胎肺细胞植模型中，反义寡核苷酸阻断P311表达的研究亦显示P311在肺泡分隔膜形成过程中的重要性．     

电离辐射对不同发育阶段肺泡类器官的损伤及机制

为了研究电离辐射对不同发育阶段人肺泡的损伤程度及机制,以人源肺泡类器官为模型,通过qRT-PCR、免疫荧光、Western blot、流式细胞术等生物学方法,比较辐射对不同发育阶段人肺类器官的形态、发育潜能、细胞死亡以及细胞类型的影响.结果表明：(1)定型内胚层阶段的细胞较干细胞更耐辐射,辐射引起其更少的细胞死亡;(2)芽尖祖类器官辐射后形态学发生明显变化,出现细胞向外迁移现象,同时随着辐射剂量增加,其逐渐丧失诱导形成肺泡类器官的能力;(3)肺泡类器官辐射后仍保持着原有形态学特征,但7天后,Ⅰ型肺泡细胞和Ⅱ型肺泡细胞的比例均显著下调,同时恶性转化相关基因也出现显著性变化,说明辐射对肺泡类器官的功能产生较长期的影响.总体而言,电离辐射对肺的发育有显著性影响,该研究为临床放射性肺损伤及修复提供了一定的理论依据.     

大鼠呼吸系统表面活性蛋白SP-A和SP-D分泌细胞的分布研究

为了揭示表面活性蛋白SP-A和SP-D分泌细胞在呼吸系统中的分布.使用大鼠鼻腔到肺的各部位组织冰冻切片,进行免疫组织化学染色.结果显示,从鼻腔到小支气管的小颗粒细胞和杯状细胞细呈SP-D阳性;在喉腺和气管腺及其导管上皮呈SP-D强阳性;在细支气管克拉拉细胞和肺Ⅱ型细胞均呈SP-A和SP-D阳性.揭示了在大鼠呼吸系统中SP-D分泌细胞比SP-A分泌细胞更广泛分布,SP-A与SP-D对于维持肺部无菌环境起到重要免疫防御作用.     

新生大鼠高氧损伤肺组织的超微结构

目的：探讨新生大鼠在高氧肺损伤不同时点肺组织各种细胞超微结构的改变。方法：99只新生大鼠随机分为高氧组和空气组,生后3、7和14d分批处死并取肺组织进行H．E染色病理检测,电镜检查各组肺组织的超微结构改变。结果：1）高氧组肺损伤主要表现为肺泡结构破坏、大小不一、肺间隔增厚以及胶原纤维沉积。2）超微结构主要表现为肺泡Ⅱ型细胞板层小体空泡化、肺泡Ⅰ型细胞胞浆溶解,成纤维细胞胞浆中的内质网、高尔基体和线粒体增多,肺泡Ⅰ型和Ⅱ型细胞线粒体肿胀等改变。结论：肺泡Ⅱ型细胞的不成熟、肺泡Ⅰ型细胞的变性和成纤维细胞合成胶原能力增强是导致高氧肺损伤病理改变的基础。     

应用肺表面活性物质治疗新生儿呼吸窘迫综合症最佳吸痰时间的研究

目的对应用肺表面活性物质治疗新生儿呼吸窘迫综合症的最佳吸痰时间进行研究。方法:将2007年1月至2008年11月收治的27例应用肺表面活性物质治疗的NRDS患儿随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三组,分别于应用肺表面活性物质治疗后3-4小时、6-8小时、12-14小时第一次吸痰,记录患儿治疗后24小时、48小时的动脉-肺泡氧分压比值(a/APO2)、胸片及氧疗时间三项指标。将数据进行统计学处理,判断三种吸痰时间的疗效差异。结果:Ⅰ组患儿用药后24小时、48小时的a/APO2及胸片的改善均不如Ⅱ、Ⅲ组(p<0.05),Ⅱ、Ⅲ组之间比较无明显差异;Ⅰ组患儿在相同的条件下需要氧疗时间长。结论应用肺表面活性物质治疗后6-8小时与10-12小时首次吸痰疗效优于3-4小时首次吸痰,前两者之间比较无明显差异。如无气道痰堵推荐10-12小时首次吸痰。     

小鼠胎肺Ⅲ型上皮细胞的分离纯化及原代培养

用免疫黏附和差速离心法分离和纯化小鼠胎肺Ⅱ型细胞,所得细胞纯度达(90±2)%,产量为每5只小鼠胎肺收获(23.6±7)×106个细胞.原代培养的小鼠胎肺Ⅱ型细胞在12～24 h 开始贴壁,在36～48 h呈指数生长,72 h后生长减缓,4～5 d左右细胞开始变形分化.免疫荧光鉴定胎肺Ⅱ型细胞表面活性蛋白C(SP-C)染色阳性,透射电镜观察到细胞内板层小体,细胞中proSP-C蛋白在培养48 h后表达较高.体外病毒转染成功,可见强烈荧光表达.成功建立了小鼠胎肺Ⅱ型上皮细胞的培养模型.     

二氧化硅对肺泡巨噬细胞的毒性作用

测定了鳞石英、α—石英和硅胶以及它们和卵磷脂作用的表面ξ电位,研究了它们对家兔肺泡巨噬细胞的毒性作用。结果表明:二氧化硅的表面ξ电位越高,与卵磷脂等肺表面活性物质作用越强,因而致硅肺作用越强烈。毒性作用顺序为:鳞石英>α—石英>硅胶。     

胎肺的光镜和扫描电镜观察

68例受精龄18-32周胎肺制成光镜和扫描电镜标本,进行肺组织发生的观察。结果显示:18周胎肺属腺状期,其发育类似外分泌腺。以支气管树发育为主,其终末类似腺泡。细支气管上皮由纤毛细胞、无纤毛细胞和分泌细胞构成。22周肺属小管期,以呼吸部发育为主。呼吸性支气管、原始肺泡出现。28周肺属原始肺泡期,以大量肺泡发育为主。肺泡表面有粗细不一的微绒毛。间质中布满交织成网的纤维。     

豹猫肺的组织结构观察及AQP-1、SP-A和EGF在肺中的表达

利用切片方法观察了豹猫(Prionailurus bengalensis)肺的组织结构,应用免疫组织化学方法检测了水通道蛋白-1(AQP-1)、肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)和表皮生长因子(EGF)在肺中的表达。结果显示,豹猫和大多数哺乳类肺的组织结构一样,包括导气部(支气管、细支气管和终末细支气管)和呼吸部(呼吸性细支气管、肺泡管、肺泡囊和肺泡)。支气管、细支气管管壁较厚。肺泡壁的细胞结构清楚,肺泡直径约为67.52±18.63μm,肺泡隔厚度约为7.783±0.657μm。AQP-1、SP-A和EGF在细支气管、呼吸性细支气管和肺泡管等的上皮细胞中呈免疫反应阳性,三者的表达强度有差异。结果表明,AQP-1、SP-A和EGF可能发挥不同的功能,它们的协同表达可能与肺内液体转运和肺内水平衡、防御疾病及维持肺的正常生理功能有关。     

肺泡蛋白沉积症6例临床分析

目的:研究肺泡蛋白沉积症的临床特征,诊治方法,提高临床诊治水平,减少误诊、误治.方法:分析近9年来收治患者的临床特征,肺部影像学表现,总结诊治经验,分析误诊、误治原因.结果:患者多表现为活动后气促,咳嗽.胸部高分辨CT主要征象:双肺弥漫性磨玻璃影6例,呈地图样分布5例,铺路石征3例,支气管充气征2例.仅凭胸部CT,误诊率高,入院前3例误诊肺炎,1例误诊肺结核,1例误诊特发性肺间质纤维化.6例患者入院后经肺泡灌洗液、支气管肺活检确诊.肺泡灌洗治疗后症状改善.结论:肺泡蛋白沉积症临床表现缺乏特异性,诊断有一定困难,仅凭胸部高分辨CT检查,误诊、误治普遍.当患者有活动后气促,胸部HRCT呈地图样、铺路石样改变时,需考虑PAP.肺泡灌洗是最有效治疗方法.诊断不清时避免盲目治疗.     

肺泡上皮细胞在高氧急性肺损伤中的作用研究

目的:观察新生小鼠肺组织甲状腺转录因子[TTF-1]及肺表面活性物质蛋白B[SP-B]的表达,探讨高氧急性肺损伤[HALI]可能存在的损伤机制.方法:新生1d的C57BL/6小鼠30只,随机分为:高氧暴露组及空气对照组,每组15只.高浓度氧暴露72h建立ALI小鼠模型,各组于24,48及72h随机取5只小鼠肺组织标本,测定肺湿/干重(W/D)比值、观察肺组织形态学变化并进行病理评分及肺泡计数(RAC),荧光定量PCR法及免疫荧光标记法检测各组各实验点TTF-1,SP-BmRNA及蛋白的表达情况.结果:与空气对照组比较,高氧暴露48h时,肺组织出现肺泡间质细胞数量增多及肺水肿等HALI的表现;W/D比值及病理评分显著升高(P0.05);RAC显著减少(P0.05).高氧暴露72h时,TTF-1,SP-B mRNA及蛋白表达较空气对照组下调(P0.05).结论:高浓度氧暴露能导致ALI,肺泡上皮细胞的损伤在HALI发生进程中可能发挥重要作用.     

治疗早产儿呼吸窘迫综合症的物质

在正常足月新生儿肺泡的表面有一层表面活性物质,它是一种化合物,主要成份是磷脂,能降低肺泡表面的张力,防止肺泡过度膨胀或萎陷。这种物质是在妊娠最后一周内产生。早产儿由于肺泡表面活性物质不     

游蛇和烙铁头肺微血管铸型的扫描电镜观察

利用微血管铸型方法和扫描电镜观察研究了虎斑游蛇和菜花烙铁头的肺微血管构筑情况．结果发现：在虎斑游蛇和菜花烙铁头肺内壁上均有许多网状隔膜、次级隔膜、三级隔膜和肺泡隔，将其肺内壁分隔成大量的囊状室、小室、亚小室和肺泡．但菜花烙铁头肺内壁上的网状隔膜比虎斑游蛇明显稀少．在各级隔膜和肺泡壁上均有丰富的毛细血管并互相吻合成单层密集网．虎斑游蛇和菜花烙铁头肺泡毛细血管径和网眼孔径分别为6．5～13μm，7～11μm和5～42μm，8～25μm．微动脉以不同的弯曲行走于各级隔膜之内，并相互吻合成不规则的动脉网烙。在微动脉和终末微动脉铸型表面有明显的环行平滑肌细胞的压迹。     

磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C在人肺癌A549细胞分化中的作用研究

为探讨磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C在人肺癌肺泡Ⅱ型上皮细胞A5 4 9分化中所起的作用 ,本文利用该酶的特异性抑制剂D6 0 9抑制此酶的活性 ,用倒置相差显微镜观察了D6 0 9处理体外培养的人肺癌A5 4 9细胞形态变化 ,用流式细胞技术测定了D6 0 9对A5 4 9细胞周期及凋亡率的影响 .结果发现D6 0 9促使该细胞拉长 ,并向Ⅰ型上皮细胞分化 ,表现出形成肺泡结构的趋势 ,同时改变了细胞周期的分布 :G0 1 期细胞数目增加 ,S期和G2 M期细胞数目明显减少 .结果表明 ,磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C在使A5 4 9细胞维持其Ⅱ型细胞状态中具有重要作用 .     

绵羊肺泡巨噬细胞的分离培养和形态学观察

从绵羊肺组织中分离肺泡巨噬细胞进行原代培养，通过台盼蓝拒染试验和鸡红细胞吞噬试验检测肺泡巨噬细胞活力。利用电子显微镜对原代培养的巨噬细胞进行形态学观察。结果表明，本试验采用的方法适合分离培养绵羊肺泡巨噬细胞，活细胞数能达到90％以上。能为开展细胞病理学和细胞内寄生菌存活机理研究提供很好的试验材料。     

肺音信号非高斯ARMA模型及双谱研究

应用高阶累积量方法，从肺音信号辨识肺胸系统的ARMA模型参数.分别在肺胸系统正常和异常的情况下，对肺泡呼吸音、哮呜音和喘钟呜音进行了分析。实验结果表明，高阶累积量能够很好地抑制高斯噪声，并能提取由于肺部机能异常引起的肺胸系统声传递函数的变化，对肺胸系统自动分类、识别和肺部疾病的快速诊断具有重要价值。     

牛肺表面活性物质的化学成份分析

对从成年牛肺中提取的肺表面活性物质的化学成份进行分析.结果表明:磷脂含量达73.16%,蛋白质占2.69%.磷脂成份中卵磷脂占50.68%,磷脂酰乙醇胺、磷脂酰甘油、鞘磷脂和磷脂酰肌醇分别占12.36%、12.23%、11.78%和9.19%.尚有少量磷脂酰丝酸氨和磷脂酸.这些结果均与人羊水、小牛肺、猪肺表面活性物质基本相似.