辣根过氧化物酶酶学特性及应用进展

辣根过氧化物酶(HRP)是一种以亚铁血红素为氧化还原中心的过氧化物酶,从植物辣根的根部提取,目前被广泛地应用在污水处理、食品工业、有机合成和分析检测等领域.本文综述了辣根过氧化物酶的结构、固定化及辣根过氧化物酶在各个领域的应用,并对其工业应用前景及未来研究方向进行了探讨.     

过氧化物酶在酚类废水处理中的应用

介绍了过氧化物酶在酚类废水处理中的应用现状以及合酚废水的危害及主要来源,其中包括辣根过氧化物酶、木质素过氧化物酶、氯过氧化物酶及其相应的固定化酶在含酚废水及含难降解的芳香族化合物废水、造纸废水处理中的研究和应用．过氧化物酶不仅可降低有毒含酚污染物的含量,而且使用固定化酶技术必然会降低处理含酚废水的成本,提高酶的使用效果．     

过氧化物酶在模拟人体胃肠环境中的稳定性研究

本以中国药典中的人工胃液和人工肠液模拟人体胃肠环境,对过氧化物酶的稳定性进行了一系列单独及综合的研究。结果表明,过氧化物酶在人工胃液中受到很强的破坏,而在人工肠液中则较为稳定。同时还发现,天然结构的过氧化物酶对胰蛋白酶具有较强的耐受力。     

谷胱甘肽过氧化物酶的研究

本文从组织细胞学分布、分子结构、分离纯化、酶学特性、硒的生物学作用诸方面,对谷胱甘肽过氧化物酶的现况予以综述,同时也阐明了该酶的生物学作用及应用前景.     

计算机辅助物豆壳过氧化物酶分子序列分析

从生物信息学角度,利用生物大分子数据库（ＧＥＮＥＢＡＮＫ、ＳＷＩＳＳ－ＰＲＯＴ和ＰＤＢ）及软件技术（ＤＮＡＳＩＳ和ＰＲＯＳＩＳ）对豆壳过氧化物酶分子进行了序列分析及结构预测;通过与其它植物及真菌来源的过氧化物酶的比较研究,分析了结构保守性与功能域的关系,从分子水平探讨了植物过氧化物酶超家族的活性位点局部保守序列、折叠模式及序列结构域特征。     

白腐真菌锰过氧化物酶的动力学研究

进行了白腐真菌锰过氧化物酶处理苯胺溶液的动力学研究,导出了酶降解动力学模型。通过测定不同苯胺质量浓度溶液吸光度值,确定苯胺溶液标准曲线,建立苯胺质量浓度与吸光度值的关系方程式。统计分析表明:米氏方程当作模拟模型,应用Lineweaver-Burk法进行数学回归分析,对锰过氧化物酶进行反应动力学研究是可行的。通过数学处理,确定了锰过氧化物酶重要的动力学特征参数:Vm=0.3527mg/L·min,Km=2.7696mg/L。为白腐菌的工业应用提供了重要依据。     

计算机辅助的豆壳过氧化物酶分子序列分析

从生物信息学角度 ,利用生物大分子数据库 (GENEBANK、SWISS PROT和PDB)及软件技术 (DNASIS和PROSIS)对豆壳过氧化物酶分子进行了序列分析及结构预测 ;通过与其它植物及真菌来源的过氧化物酶的比较研究 ,分析了结构保守性与功能域的关系 ,从分子水平探讨了植物过氧化物酶超家族的活性位点局部保守序列、折叠模式及序列结构域特征 .     

豆壳过氧化物酶活力测定条件的优化

应用响应面法从过氧化氢、愈创木酚、温度、pH值、酶浓度等方面对过氧化物酶活力测定方法进行单因素分析,以优化豆壳过氧化物酶活力测定条件.结果表明,豆壳过氧化物酶在70 ℃、pH值为6.0,愈创木酚和过氧化氢加入量分别为25 μL和21 μL条件下测定的活力为最优值.     

植物材料中的过氧化物酶细胞化学技术

过氧化物酶细胞化学技术广泛应用于植物细胞学、植物病理学等领域.但由于植物材料本身的特殊性,使得此技术的应用受到不同程度的限制.本文在自己工作及前人研究的基础上,针对过氧化物酶电镜定位的原理、实验程序进行了探讨和改良.     

冬青属苦丁茶不同种质材料的过氧化物酶同工酶分析

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了冬青属5种苦丁茶的过氧化物酶同工酶酶谱,并根据同工酶分析结果探讨了冬青属苦丁茶种间的亲缘关系以及种内不同种质材料的遗传差异。研究结果表明,所有不同物种的供试材料均有两条共同的特征谱带,同时又有丰富的酶带多态性。同一物种的不同种质材料的过氧化物酶同工酶酶谱也显现出一定的差异。过氧化物酶同工酶的酶谱分析结果可以作为判定不同物种间的亲缘关系及冬青属苦丁茶种级水平分类的依据之一,但同一物种内不同种质材料的遗传差异以及种下分类群的划分则尚需更多分子生物学及形态学研究结果相互佐证。     

Study on mimetic peroxidase and molecular recognition of phenols with inclusion complex of ironporphyrin immobilized by β-CD polymer

β-Cyclodextrin (β-CD) and its cross-linked polymer (β-CDP) were known as the mimetic models. Metalloporphyrin had been widely used in the enzymatic method of analysis and molecular recognition. In present work, it was investigation that supramolecular recognition for halogenated phenols, three crosols, three nitrophenols and three aminophenols, served respectively as the substrate of the mimetic receptor, iron-5, 10, 15, 20-tetrakis (sulforphenyl)-21H, 23H-porphine (FeTPPS) or FeTPPS-β-CDP. Supramolecular complex, FeTPPS-β-CDP with function of mult i-recognition and induced-fit, was a advanced kind of mimetic peroxidase; Methyl phenol or polyphenol was the substitute of chlorophenic acid, while aminophenols and other phenols were suggested not to be utilized to enzymatic assay of H₂O₂. Being a mimetic enzyme mimicking the space structure of overall proteinase, beaimed by immobilized mimetic enzyme with a large number of β-CD interior cavities, chlorophenol was identified optimal substrate in the system tested. Foundation item: Supported by the National Natural Science Foundation of China Biography: MAO Lu-yuan(1959-), male, Associate Professor, Postdoctor.     

过氧化物模拟酶的研究--四磺基铁酞菁与β-CD的包合物的分析应用

基于四磺基铁酞菁(iron-tetrasulfonatophthalocyanine,FeTSPC)催化反应的性质和-环糊精(-CD)的超分子特性,研究了以FeTSPC和-CD的包合物作为一种新的模拟过氧化物酶对邻苯二胺(OPDA)和H2O2的反应体系的催化作用并用于过氧化氢的定量分析中.研究表明FeTSPC和-CD包合的最适宜条件为1∶1,实验中最佳酸度条件为pH=5.8,最佳反应时间和温度分别为30min和40℃.在此反应条件下,H2O2在2.0105~1.2104mol/L范围内呈良好的线性关系,用此方法对样品中的H2O2的含量进行检测,结果满意.     

Study on the intermediate in theo-phenylenediamine oxidative reaction using hemoglobin as a mimetic peroxidase in aqueous-organic two phase

Hemoglobin was used as a mimetic enzyme for peroxidase to catalyze the oxidative reaction of o-phenylenediamine with H₂O₂ which functioned as an oxidant. The relationship between physicochemical properties of the intermediate and enzymatic activity of hemoglobin was studied. Since the solubility of the intermediate in the reaction is higher in butanol phase than in water phase, the intermediate itself diffused from the aqueous phase to the butanol phase. The experimental results showed that the rate of product and the stability of intermediate were associated with the temperature and the pH value of the buffer. The formation rate of intermediate and half-life period reveal the maximal in pH7, nevertheless, the whole rate of the catalytic reaction is the greatest in pH5, which the ratio of the initial rate in final product formation compared to that intermediate formation is the greatest. Foundation item: Supported by the National Natural Science Foundation of China (No. 39770200) Biography: Li Hai-cheng (1960-), male, Ph. D candidate, Pyongyang, D. P. R. Korea, research direction; mimetic enzyme.     

Fluorescence spectra and enzymatic property of hemoglobin as mimetic peroxidase

0　IntroductionHemoglobin(Hb)isthemajorhemeproteinofredbloodcells(RBCs)andisresponsibleforthetransportofoxygentothetissues.ThefunctionofHbdependsupontheabilityoffer rousironinthehemegrouptobindandreleaseoxygen .Despiteitsprincipalroleasanoxygen carrier,theHbmoleculepossessesdifferentenzymaticactivities[1 ] andamethodwasdevelopedforthedeterminationofHbbasedonitsenzymaticactivityfortheox idationofo phenylenediamine (OPDA)withH2 O2 asanoxi dant[2 ] .Hbasamimeticenzymeofperoxidase ,cancataly…     

PP333对水稻幼苗过氧化物酶的调节

PP333处理后,苗高明显矮化,根长则表现为低浓度促进高浓度抑制,同时苗体内过氧化物酶(POD)活性及其同工酶谱带随之发生相应变化。统计分析的结果表明:苗高与POD活性呈显著负相关(r=-0.9325);根长与POD活性呈不显著负相关(r=-0.4216)。用外源GA_3逆转PP333的抑制作用时,POD活性下降,同工酶谱带着色变浅,C_3带几乎消失,用NAA处理未见有逆转PP333的抑制效应,同时POD活性提高,同工酶谱带增加两条(B_1、C_2带)。由此可以认为:PP333对植物生长的调节作用是通过对酶的影响而实现的。     

Study on the Intermediate in the o-Phenylenediamine Oxidative Reaction Using Hemoglobin as A Mimetic Peroxidase in Aqueous-Organic Two Phase

Hemoglobin was used as a mimetic enzyme for peroxidase to catalyze the oxidative reaction ofo-phenylenediamine with H2O2 which functioned as an oxidant. The relationship between physicochemicalproperties of the intermediate and enzymatic activity of hemoglobin was studied. Since the solubility of theintermediate in the reaction is higher in butanol phase than in water phase, the intermediate itself diffusedfrom the aqueous phase to the butanol phase. The experimental results showed that the rate of product andthe stability of intermediate were associated with the temperature and the pH value of the buffer. The for-mation rate of intermediate and half-life period reveal the maximal in pH7, nevertheless, the whole rate ofthe catalytic reaction is the greatest in pH5, which the ratio of the initial rate in final product formationcompared to that intermediate formation is the greatest.     

模拟过氧化物酶Fe[Ⅱ］-丁二酮肟络合物催化显色反应及分析应用

研究了Fe[Ⅱ］-丁二酮肟的络合物作为模拟过氧化物酶对过氧化氢、4-氨基安替比林和苯酚显色反应的催化活性.将显色反应与葡萄糖氧化酶反应偶联，测定了葡萄糖注射液及五味子蜜中葡萄糖的含量，取得了满意的结果.     

过氧化物模拟酶Fe-TPPS_4-隐性结晶紫-H_2O_2体系的催化显色反应研究

本文研究了Fe(Ⅲ)与meso-(四(4-磺基苯)卟啉(TPPS_4)的螯合物(Fe-TPPS_4)作为过氧化物模拟酶催化H_2O_2氧化隐性结晶紫为结晶紫的显色体系。该体系用于测定H_2O_2时的摩尔吸光系数为3.8×10~4,工作曲线的相关系数为0.996。此体系可与葡萄糖氧化酶催化反应偶联,用标准加入法测定人血清中葡萄糖的含量。     

辣根过氧化物酶在酚类废水中的应用

辣根过氧化物酶(HRP)是一种重要的含血红素酶,具有结构特殊、酶源丰富、性质稳定、价格低廉等优点,在众行业中用途广泛。本文综述了辣根过氧化物酶的特性、作用机理及辣根过氧化物酶处理酚类废水的应用,并对现存问题和解决途径进行了探讨。     

金属胶束模拟辣根过氧化物酶催化过氧化氢氧化苯酚

研究了咪唑衍生物钴配合物Co(biap)·Cl2和胶束形成的金属胶束作为模拟辣根过氧化物酶(HRP)催化H2O2氧化苯酚反应;探讨了过氧化氢浓度、反应温度、酸度和胶束性质影响催化反应的原因;提出了金属胶束催化氧化苯酚的反应历程;建立了金属胶束催化苯酚氧化的动力学数学模型.