牡蛎低分子活性物质对人肺腺癌A549细胞的生物学效应

以新鲜牡蛎为材料，经特酸抽提和分子筛凝胶层析，获得牡蛎低分子活性物质，SDS－PAGE凝胶电泳分析鉴定为该组分为主要由8种蛋白组成，应用该物质处理人肺腺癌A549细胞，实验结果显示，经0．1mg/mL牡蛎低分子活性物质处理的人肺腺癌A549细胞，细胞生长抑制率达62．2％，细胞分裂指数下降28．95％。光镜观察显示经牡蛎低分子活性物质 处理的细胞形态发生明显改变。结果表明，牡蛎低分子活性物质能有效的抑制肺癌细胞的增殖。     

王瓜根蛋白的柱层析分离及其抗生育作用

应用Ambelie.IRC.50柱层析分离纯化王瓜根抗早孕蛋白,图谱显示抗早孕蛋白达到基线分离,用SDS.PAGE不连续电泳证实是电泳纯。应用本工艺生产的王瓜根抗早孕蛋白作小白鼠抗着床试验,其ED_(100)(100％抑制率)为1.5mg/kg,是结晶天花粉ED_(100)(10mg/kg)的6倍以上,提示这种蛋白有可能作妇女房事后避孕的新药。对应用王瓜抗早孕蛋白注射后的小白鼠子宫作组织学鉴定,由显微组织切片显示王瓜根抗早孕蛋白较天花粉蛋白作用强,子宫组织发生了变化。用王瓜根做抗早孕蛋白口服试验,也证实其效果好。这提示王瓜根蛋白可制成简便口服避孕片。     

促根霉(Rhizopus ferrugineus)产葡萄糖淀粉酶的活性肽研究

用Sephadex G—25分子筛层析、DEAE—Sephadex A—25 离子交换层析和高效液相色谱方法,从胰化酪蛋白胨中分离出对根霉(Rhizopus ferrugineus)产葡萄糖淀粉酶(Glucoamylase)有促进作用的活性肽。该活性肽为电泳纯物质,其理化性质为:最大紫外吸收波长200nm;N—末端氨基酸是丙氨酸;分子量1760 道尔顿;氨基酸残基数16;等电点PH约3.6;肽分子内不含芳香族氨基酸和含硫氨基酸,富合酸性氨基酸。该活性肽能使根霉葡萄糖淀粉酶的产量增长400％,但对细胞增殖和生长无影响。若将此肽水解为单个氨基酸,促产酶活性丧失。活性肽促产酶作用的最有效浓度为0.1mg/ml:肽浓度与促产酶活性呈饱和曲线关系。活性肽对根霉、曲霉一些菌株产葡萄糖淀粉酶都有较明显的促进作用。     

FOXP3在人肺腺癌细胞中的表达意义

目的通过检测FOXP3在人肺腺癌细胞中的表达情况,探讨FOXP3在人肺腺癌发生、发展中的作用机制.方法收集临床肺腺癌患者术后石蜡包埋标本42例和正常肺组织10例,采用免疫组化SP法检测FOXP3蛋白的表达水平,分析其在肺癌细胞组与正常支气管黏膜组表达的差异,以及其在肺癌细胞的表达与临床病理指标的内在联系.结果 FOXP3在人肺腺癌细胞高表达,阳性率为64.3%;在正常肺组织低表达,阳性率为20.0%,两组比较差异具有统计学意义(P=0.011).FOXP3蛋白表达与有无淋巴结转移显著相关,有淋巴结转移组FOXP3的阳性表达率为83.3%,无淋巴结转移组FOXP3的阳性表达率为50.0%,两组比较差异具有统计学意义(P=0.026).FOXP3蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤的大小和分化程度均无明显相关性(P0.05).结论FOXP3参与人肺腺癌的发生、发展,可作为评判肺腺癌恶性生物学行为的指标之一.     

NK细胞对A549细胞的β-catenin信号通路影响

目的:研究NK细胞对肺腺癌细胞系A549的杀伤作用.方法:无菌采集健康人外周血,培养NK细胞,对A549细胞进行杀伤活性的实验,检测NK对A549的杀伤活性,同时用Western blot检测A549细胞中β-catenin的表达.结果:NK对A549的杀伤率为82.64%,β-catenin的条带变浅,蛋白表达量逐渐降低.结论:NK对A549具有杀伤力,同时能够阻断A549细胞中的Wnt/β-catenin信号通路,可成为免疫治疗肺癌的一种新方法.     

新药研发实例——新型4-噻唑烷酮类抗癌先导化合物

以噻唑烷酮化合物为例,介绍了先导化合物的研发过程。运用组合化学的方法设计并合成了小分子化合物库,用以发现和优化先导化合物。用肺癌细胞、抗药性肺癌细胞和正常细胞进行高通量筛选,发现了选择性杀伤抗药性肺癌细胞的化合物。作用机制研究表明活性化合物抑制微管蛋白,将细胞阻滞在G2/M期且可诱导细胞凋亡和自噬,其抗癌活性不依赖于P-糖蛋白。这类先导化合物具有良好的细胞膜通透性,体内试验表明其可有效抑制肿瘤的生长。对60个人体肿瘤细胞系的筛选中,发现这类先导化合物具有广谱的抗癌活性,将在未来癌症治疗研究中起到重要的作用。     

文蛤(Meretrix Meretrix)凝集素(MML)的初步研究——Ⅱ.MML的分子组成及性质鉴定

文蛤凝集素(MML)经实验证明是一种唾液酸专一性结合的凝集素,MML的活力表现依赖于Ca~(2 )。MML对高于40℃以上的温度敏感,其活力在?pH5.0～8.5的范围内稳定。等电聚焦电泳测出MML的等电点是5.6.在12％胶浓度的SDS-PAGE上,用含或不含-S-S-还原剂的样品处理液进行电泳,以及用4％～30％线性梯度胶浓度的PAGE分析,所得结果推测MML分子是由分子量为29000和30000道尔顿的2条肽链组成,肚链间经-S-S-共价联系形成约59000道尔顿的大亚基,再由约18个这种大亚基聚合成1060000道尔顿的MML大分子。氨基酸组成及共价结合糖含量测定表明,MML分子是一种含5％的糖类的糖蛋白。初步观察到MML对人体癌变淋巴母细胞株(Raji细胞)的生长有抑制或杀伤作用。     

溴代香豆素对胃癌细胞的细胞毒活性与致死机制研究

为探究合成化合物溴代香豆素的生物活性,将该化合物作用于胃癌细胞进行了体外研究.本研究分别采用磺酰罗丹明染色法和生长曲线法研究了药物的细胞毒活性和癌细胞的致死过程.以彗星电泳技术和瑞士—吉姆萨染色法观察了化合物对细胞核形态变化和核酸损伤效应,最后以琼脂糖凝胶电泳法检测了药物对细胞总DNA的影响.结果显示,溴代香豆素对胃癌细胞具有显著的细胞毒活性,其IC50为21.56μg/m L.药物对细胞的增殖抑制效应和致死效应都具有显著的时间—剂量依赖性.药物作用癌细胞后可引起细胞核形态变化和染色质凝集断裂,并损伤细胞DNA,在电泳中呈梯度降解状态.结果表明,溴代香豆素对胃癌细胞的生长与增殖具有显著的细胞毒活性,并能诱导胃癌细胞发生凋亡.     

文蛤抗癌活性多肽的生理活性研究

以新鲜文蛤为材料,经有机溶剂萃取,分子筛凝胶层析,得到一种具有抗癌生物活性的文蛤多肽,SDS PAGE电泳测得该多肽的分子量约为18kD.用该多肽处理人胃腺癌细胞BGC 823,结果表明,当多肽浓度为10μg/mL,细胞生长的抑制率达到50%.此外,探讨了该活性多肽在体外对几种与肿瘤代谢相关的酶的效应,实验结果显示,该活性多肽能够激活碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶,当其浓度为10μg/mL时,可以使这两种酶活力分别提高150%和93%;该活性多肽对酪氨酸酶则是起到了抑制的效应,测定导致酶活力下降50%所需的效应物浓度(IC50)为1.50μg/mL,其抑制类型为混合型抑制,其抑制常数KI和KIS分别为4.37mg/mL和6.09mg/mL.     

苦瓜籽核糖体失活蛋白的基本性质研究

采用 Affi- Gel亲和层析和 Sephacryl S- 10 0分子筛层析等方法获得苦瓜籽核糖体失活蛋白 (RIP) ,经 SDS- PAGE,PAGE,IEF和 PAS方法分析均表明为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带 .根据 SDS- PAGE测得表观分子量为 30 0 0 0 ,经 IEF- PAGE结果计算其 PI为 9.0 ,对无细胞系统中蛋白质生物合成抑制活性明显 ,其 IC50 为 5.3× 10 -10 mol/ L左右 .体外生物活性试验结果表明其对人肝癌细胞 ,Vero,SP2 / 0 ,3T3,Kb,Navana,S- 180等肿瘤细胞株和麻疹病毒均表现有不同程度的抑制作用 ,而对完整人胚肺二倍体细胞却毒性极小 .     

Comparative study on the effect of integrin αvβ3 on secretion of matrix metalloproteinases in human normal and carcinoma trophoblasts

The invasion of cytotrophoblast cells into the maternal endometrium during embryonic implantation is very similar to the metastasis of carcinoma cells. However, the significant difference is that the former is a highly controlled process. In this report, the effects of integrin αvβ3 on the secretion of matrix metalloproteinase (MMP) were compared between normal cytotrophoblast cells and choriocarcinoma cells by RT-PCR, gelatin zymography and immunocytochemistry. The results reveal that both normal cytotrophoblast cells and choriocarcinoma cells can express integrin αvβ3. The secretion of MMPs in normal cytotrophoblast ceils is up-regulated by anti-αvβ3 antibody, whereas, decreased in choriocarcinoma cells. It was suggested that αvβ3 can modulate the expression of MMPs in trophoblasts, and this action is carried out through distinct mechanisms in normal and carcinoma cytotrophoblast cells.     

复合光伏阵列的优化匹配研究

为了提高光伏发电效率,降低独立光伏发电系统成本,将强光特性的单晶硅电池和弱光特性的非晶硅电池复合应用在发电系统中。通过对太阳电池的I-V特性分析,构建复合光伏阵列输出功率与辐照强度、温度之间的关系,通过辐射量、日照时数等气象参数对定容量的独立光伏发电系统进行了光伏复合组件的优化研究。     

太极拳锻炼对免疫平衡影响及其机制研究进展

通过整理与分析国内外文献,分析了太极拳锻炼影响CD4+/CD8+细胞平衡与T1/T2平衡的作用与机制.研究认为,太极拳锻炼可引起CD4+细胞数量与CD4+/CD8+细胞比值升高,该变化可能与MDC数量的增高促进了Th细胞的分化过程有关;太极拳锻炼可提升Th1细胞数量与Th1/Th2细胞比例以及Ⅰ型细胞因子IFN-γ,IL-2含量与IFN-γ/IL-4比值,诱发T1/T2平衡向T1方向漂移.该变化的机制可能是Treg数量的增高抑制了Th细胞的分化过程,从而降低了IL-4对Th1细胞分化的交互抑制作用.     

新型除草剂异丙脂草醚对小鼠细胞DNA损伤的比较研究

应用单细胞凝胶电泳试验，测试了新合成的除草剂——异丙酯草醚对小鼠骨髓细胞和睾九细胞的DNA损伤情况．实验结果显示：与对照组比较，异丙酯草醚对小鼠骨髓细胞和睾丸细胞DNA均有一定损伤（p〈0．05），且对小鼠睾丸细胞的作用更为敏感，呈剂量-反应关系。     

微囊藻毒素对Hela细胞和Vero细胞的毒性效应

ＭＣＹＳＴ－ＬＲ,ＭＣＹＳＴ－ＲＲ,ＭＣＹＳＴ－ＹＲ稀释后的毒素溶液处理Ｈｅｌａ细胞和Ｖｅｒｏ细胞后得到如下结果：１．３种毒素溶液对培养的Ｈｅｌａ细胞均有明显的抑制作用和毒性作用,其毒性作用与浓度成正比,致死细胞边缘不整齐不规则,细胞呈脱水状态。倒置显微镜下可见细胞变黑无折光性。高浓度毒素溶液（包括ＭＣＹＳＴ－ＬＲ,ＲＲ和ＹＲ３个样品）作用细胞２４ｈ后,细胞完全致死脱落,３个样品间无明显差别;２．     

微血管内皮细胞与肺动脉平滑肌细胞增殖的相互调节

研究常氧下微血管内皮细胞(MVEC)与肺动脉平滑肌细胞(PASMC)增殖的相互调节。先滤膜培养大鼠肺微血管内皮细胞(LMVEC)后，再与PASMC复合培养，采用流式细胞仪检测PASMC周期的变化。复合培养后，正常情况下使PASMC的G1期细胞数减少，S＋G2／M期细胞数增多，即促进细胞生长；使LMVEC田C的G1期细胞数增多，S＋G2／M期细胞数减少，即抑制细胞生长。可见，MVEC与PASMC复合培养后，常氧下促进PASMC细胞生长，抑制LMVEC的增生，存在相互作用。     

不同来源CIK与DC细胞联合治疗中晚期肺癌的临床研究

为对癌症患者采用个体化治疗,用患者自体、同种异体外周血和脐血进行细胞因子诱导的杀伤细胞(Cytokins Induced Killer,CIK)及树突状细胞《Dendritic Cell,DC)扩增,并应用流式细胞术检测其CIK、DC-CIK表型,然后回输患者,对中晚期肺癌患者进行自体、异体和脐血的CIK细胞联合治疗。结果显示:21例患者中,2例病情得到完全缓解(CR),7例病情部分缓解(PR),与治疗前相比,生活质量明显提高,治疗后患者CD3~ 和CD8~ 明显升高(P<0.05)。结果证明,根据不同病人情况采用个体化治疗,应用不同来源的CIK、DC-CIK治疗中晚期肺癌有一定的临床疗效,该方法为中晚期肺癌患者的治疗提供了一种有效的免疫治疗手段。     

局部背接触太阳电池背场铝浆研究

为了提高局域背接触太阳电池的电性能,研究了铝粉物性(氧含量、粒径)对局域背接触太阳电池背场铝浆性能的影响,探究了烧结工艺对局域背接触太阳电池填充率、铝背场厚度和电性能的影响.结果表明:低氧含量铝粉和小粒径铝粉活性较高,铝粉和玻璃粉的反应温度较低,铝硅原子间扩散程度较大,可获得较厚的铝背场和较低的填充率;适中的烧结温度能够平衡填充率和铝背场厚度,峰值烧结温度为778.6℃时,填充率达到62.35%,铝背场厚4μm左右,转化效率最高,达到21.16%.     

空间微重力环境对人牙髓间充质细胞的影响初探

通过实际空间搭载实验,研究空间环境对人牙髓间充质细胞的影响。将人牙髓间充质细胞无源(细胞保存于密闭环境条件中,没有细胞培养所需的5%CO2、37℃、饱和湿度标准条件的适宜环境)搭载长征2号飞船进入空间环境,空间飞行时间为17d,返回地面后,继续培养成活并传代,观察其细胞骨架的改变。激光共聚焦显微镜观察显示:空间实验组细胞骨架出现弥散性的变化,局部微丝解聚。实验结果表明:人牙髓间充质细胞经历空间飞行后可以继续成活,并且细胞骨架发生了明显改变。     

乳腺癌患者细胞免疫指标的检测及意义

目的检测乳腺癌患者外周血T淋巴细胞总数及CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD45RA~+T细胞、CD45RO~+T细胞等T淋巴细胞亚群的百分率,用以评价患者的免疫状态.方法选择女性原发性乳腺肿瘤患者50例为病例组,并以病理检查的TNM分期结果做进一步分组,其中乳腺癌Ⅰ期27例,乳腺癌Ⅱ+Ⅲ期23例;选择女性健康体检者40例为健康对照组.应用流式细胞仪,分别检测各组外周血T淋巴细胞亚群的数量,统计分析各组检测结果的差异性.结果乳腺癌Ⅱ+Ⅲ期组CD3~+T细胞和CD4~+T细胞百分率明显低于正常对照组和乳腺癌Ⅰ期组,差异具有统计学意义(P0.05);乳腺癌Ⅰ期组CD45RA~+T细胞明显低于正常对照组,乳腺癌Ⅱ+Ⅲ期组CD45RA~+T细胞明显低于乳腺癌Ⅰ期组,差异具有统计学意义(P0.05);乳腺癌Ⅰ期组CD45RO~+T细胞明显高于正常对照组,乳腺癌Ⅱ+Ⅲ期组CD45RO~+T细胞明显高于乳腺癌Ⅰ期组,差异具有统计学意义(P0.05).结论T细胞亚群检测是评价肿瘤患者细胞免疫功能的重要指标,具有重要的临床应用价值.乳腺癌患者免疫功能与肿瘤恶变的发生、发展、临床分期有一定相关性,随着病情的进展,机体免疫功能呈现下降趋势.