半枝莲多糖的研究 分离纯化及其基本性质

半枝莲经乙醚脱脂,热水提取,Sevage 法脱蛋白质,乙醇沉淀后得半枝莲多糖粗品.经 DEAE-纤维素(DE-52)柱层析和 Sephadex G-200凝胶过滤得半枝莲多糖精品.紫外光谱分析表明不含有核酸和蛋白质.经乙酸纤维薄膜电泳、琼脂糖电泳和 Sephadex G-200凝胶过滤法柱层析结果表明均为单一条带或者单一峰,证明此多糖精品是均一的.分析表明此多糖精品的总糖含量以半乳糖为标准为115%,以葡萄糖为标准为56%,以糖原为标准是58%.用 SephadexG-200分子筛法测得平均分子量为1×10~4道尔顿.体外实验表明半枝莲多糖对移植肉瘤 S-180细胞和腹水癌细胞均有一定的抑制作用.     

论院前急救

1 院前病人特点 院前急救有别于门诊与病房,它接待急发或慢性病急性发作的病人,其特点有: 1.1 急发症状顾名思义,院前救治就是对急发症状的诊断与处理,关键是要知道这些急发症状可对应的诊断与鉴别诊断.从症状到诊断的困难在于症状包含范围大,特异性差.例如胸痛可以是急性心肌梗死、心包积液、肺栓塞、夹层动脉瘤等.对于急性心肌梗塞,现场心电图变化有助诊断,而后几种疾病心电图检查没有特异性,只有作CT或MRI方能确诊.院前病人处于急发、进展阶段,发病时间短,主要疾病征象尚未完全表露,病情处于初发阶段,发病时间愈短、病情进展的可能性愈大,所以愈要严密观察.     

二叶葎多糖的研究——1.分离、纯化及其基本性质

二叶葎用沸水抽提,三氟乙酸—正丁醉除蛋白,乙醇沉淀得二叶葎多糖粗品.比粗品进一步通过 CTAB 和 DEAE -纤维素柱层析纯化.其主要成份用 Sephadex G—150分子筛、纸层析、醋酸纤维薄膜电泳和琼脂糖电泳均证明是均一的.用 Sephadex G—200凝胶过滤法测得分子量是79000.纯多糖糖含量以葡萄糖为标准是69%,以半乳糖为标准是156%,以糖原为标准是70.4%.糖醛酸含量是74%.体内试验表明二叶葎多糖对移植 S—130肉瘤细胞具有抑制作用.     

苦瓜籽核糖体失活蛋白的基本性质研究

采用 Affi- Gel亲和层析和 Sephacryl S- 10 0分子筛层析等方法获得苦瓜籽核糖体失活蛋白 (RIP) ,经 SDS- PAGE,PAGE,IEF和 PAS方法分析均表明为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带 .根据 SDS- PAGE测得表观分子量为 30 0 0 0 ,经 IEF- PAGE结果计算其 PI为 9.0 ,对无细胞系统中蛋白质生物合成抑制活性明显 ,其 IC50 为 5.3× 10 -10 mol/ L左右 .体外生物活性试验结果表明其对人肝癌细胞 ,Vero,SP2 / 0 ,3T3,Kb,Navana,S- 180等肿瘤细胞株和麻疹病毒均表现有不同程度的抑制作用 ,而对完整人胚肺二倍体细胞却毒性极小 .     

两种新型倍半萜类化合物诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡

研究两种从盘花垂头菊中分离出的高含氧甜没药烯型倍半萜（HOBS）化合物对肿瘤细胞的影响．结果显示HOBS能够诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡．单细胞电泳实验证明HOBS能够以剂量依赖的方式诱导SMMC-7721细胞损伤,流式细胞技术显示HOBS能够以剂量依赖的方式诱导SMMC-7721细胞凋亡,凋亡率达到38．9％,Ci（Ca^2＋）的测定显示HOBS能够诱导,Ci（Ca^2＋）升高,所有的结果证明HOBS能够诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡．提示这两种化合物有抗人肝癌细胞的SMMC-7721活性,为抗肿瘤药物的设计提供了新的思路．     

西藏砂生槐生物碱抑菌抑瘤的实验研究

砂生槐是西藏南河谷地带分布极广的一种多年七豆科灌木．为青藏高原持有植物种，是一种极为宝贵的植物资源．我们首次从砂生槐种子中提取中物碱．用K—B法和最低抑菌浓度测定法进行体外抑菌活性研究．用MTT法测定生物碱对肿瘤细胞增殖的抑制作用．结果表明砂生槐种子总生物碱具有抑制金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌生长繁殖的活性．对SPC-A-1和GLC-82肺腺癌细胞的增殖有明显的抑制作用，且抑制作用随药物浓度的增加和作用时间的延长而增强，这一发现为开发砂生槐的药用价值提供了重要依据。     

蓖麻β—半乳糖苷酶的研究

蓖麻种子黄化苗提取液中存在高活性的β—半乳糖苷酶。经硫酸铵分级分离、DEAE—纤维素(DE—52)离子交换层析分离得到具有β—半乳糖苷酶活性的2种酶,分别称为β—半乳糖苷酶Ⅰ和Ⅱ。分别经Sephadex G—150分子筛层析后用PAGE分析表明二者纯度均达到60以上。以邻硝基苯酚—β—半乳糖苷为底物,β—半乳糖苷酶Ⅰ和Ⅱ的Km分别为5.9mmol/L和2.9mmol/L。以乳糖为竞争性抑制剂,其Ki分别为150mmol/L和175mmol/L。β—乳糖苷糖Ⅰ和Ⅱ最适pH分别为4.5和3.8。酸碱稳定区域分别在pH 3.6—7.0和4.6—7.0。二者的最适温度均为50℃。用Sephadex G—200分子筛层析测得β—半乳糖苷酶Ⅰ和Ⅱ的相对分子量分别为67000和85000。不同离子强度缓冲液,不同种类缓冲液以及金属离子对酶活性的影响也进行了讨论。     

熊猫豆β—D—半乳糖苷酶的基本性质研究

经硫酸铵分级分离,DEAE－cellulose 52,CM-cellulose 52和Sephacryl S 100HR凝胶过滤层析方法从熊猫豆黄化苗中获得了一种β－D－半乳糖苷酶,活性收率为8．0％,纯化倍数为245。经PAGE显示单一蛋白着色带,用IEF－PAGE测定其PI为4．1。SES－PAGE显示2条蛋白着色带,其相应分子量分别为40kD和29kD.Sephadex G200层析法测得表观分子量为68kD,以ONPG和PNPG为底物测得该酶的表观Km分别为3.02mmol/L和0．33mmol/L。最适pH为4．2,最适温度为52℃。以乳糖为底物测得表观Km为43mmol/L.HgCI2,DTNB,NEMI,半乳糖和乳糖对酶表现出不同的抑制作用。对某些金属离子和化学修饰剂对酶活性的影响也进行了探讨。