高产Monacolin K的红曲霉诱变育种

为了提高Monacolin K的产量,以紫红曲霉M2为出发菌株进行诱变育种(紫外诱变、常压室温等离子体ARTP诱变),通过构巢曲霉对峙培养、高效液相色谱HPLC等方法筛选高产Monacolin K的优秀突变菌株。结果显示:相对于原始出发菌株M2,两种方法均能够高效筛选到红曲菌株,对6株高产Monacolin K诱变菌株进行5次传代培养,发现诱变菌株产Monacolin K的能力均有下降;但紫外诱变菌株Z-4和ARTP诱变菌株M-43的Monacolin K产量分别下降2.83%和1.97%,表现为良好的遗传稳定性,说明Z-4和M-43具有潜在应用价值。     

通过红曲霉-土曲霉属间原生质体融合提高Monacolin K产量

为获得高产Monacolin K的红曲霉菌株,将高产Monacolin K的土曲霉Aspergillus terreus CA99与低产Monacolin K的红曲霉Monascus anka M-3进行原生质体融合．生长24 h的A．terrus CA99和M．anka M-3菌株用0．5％溶壁酶、0．3％蜗牛酶和0．3％纤维素酶混合酶液分别在34℃和30℃下处理5 h和3．5 h,原生质体的形成率分别为1．76×10~7/mL和1．68×10~7/mL．两种原生质体分别置于30W的紫外灯下,距离30 cm照射3 min灭活,等浓度混合后用浓度为30％的PEG 6000融合15min．再生平板上共选取363株融合子,从中筛选得到多株Monacolin K产量高于出发菌株的高产融合子,其中有10株产量的提高幅度超过60％,有2株融合子(F49和F104)产量提高了将近一倍,分别为460μg/mL和457μg/mL．对F49的发酵培养基进行优化,Monacolin K发酵单位达到了1216μg/mL．     

Different Solid-state Fermentation technology of Functional Red yeast rice has an effect on the morphological change of MonacolinK

Different technical conditions in the process of solid-state fermentation of red yeast rice has a certain impact on the production of acid-form and lactone form Monacolin K.When cultured in the loose rice medium,the acid form Monacolin K accounts for 50%-60%;while the acid form Monacolin K accounts for 80%-90%cultured in the consolidated rice medium.And we also found that the proportion of the acid form and lactone form Monacolin K will decrease with the increase of fermentation time.     

烟酰胺对紫色红曲菌生长和次级代谢产物合成的影响

以北京市食品添加剂工程技术研究中心实验室保藏的 Monacolin K产量稳定的紫色红曲菌M1为出发菌株,利用紫外-可见分光光度法、超高效液相色谱法以及实时荧光定量PCR法,通过测定红曲色素含量、Monacolin K含量等,探究烟酰胺添加对红曲菌合成次级代谢产物的影响。结果表明:实验组红、橙、黄3种色素产量与对照组菌株相比均有所降低；Monacolin K产量较对照组提高了31.34%,达到124.23mg/L。电镜观察发现,实验组菌株的孢子头和菌丝体褶皱程度明显多于对照组菌株。实时荧光定量PCR发现,实验组与Monacolin K产量相关的mokA、mokB、mokC、mokD、mokE、mokF、mokG和mokH基因的表达量均呈上调趋势,而mokI基因呈下调趋势。实验以烟酰胺为添加物进行探究,以期为红曲菌培养基优化,高产Monacolin K产品筛选提供参考。     

精氨酸等物质对紫色红曲菌产Monacolin K及红曲色素的影响

基于前期的非靶向代谢组学研究结果,在红曲菌发酵液原有营养成分的基础上添加精氨酸、L-苹果酸、D-葡萄糖、烟酰胺、α-酮戊二酸、苯丙氨酸、赖氨酸、焦磷酸硫胺素、黄素单核苷酸、L-乳酸等差异代谢物,对发酵第8天和第15天的红曲色素以及Monacolin K的产量进行了分析。结果表明:精氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸以及黄素单核苷酸的添加对Monacolin K产量的提高效果较好,推测氨基酸类物质的添加对Monacolin K产量有促进效果;其中精氨酸添加后效果最为显著,Monacolin K产量约为对照组的2.2～3.7倍。不同含量的烟酰胺对Monacolin K有不同的影响,低含量具有促进作用;而高含量则表现为抑制作用。赖氨酸、苯丙氨酸以及黄素单核苷酸对红曲色素提升效果较好,其中黄素单核苷酸可使红曲色素产量约提高至对照组的1.5～3.0倍。     

红曲霉玉米发酵产Monacolin K最佳条件研究

研究红曲霉的生物学特性,对发酵条件进行优化.以Monacolin K产量为评价指标,利用单因素试验与正试验相结合的方法对影响它的主要因素进行分析.红曲霉M5028最佳发酵条件为500 mL的三角瓶装液量50 mL;摇床转速150 r/min;发酵时间14 d;发酵液初始pH值为4.5,Monacolin K产量达到168.732μg/mL.     

发酵液中Monacolin K的高效液相色谱分析方法研究

对高效液相色谱(HPLC)测定发酵液中Monacolin　K的含量进行了研究，找到了最佳流动相配比和流速等条件。通过测定其重视性、回收率等项指标，证明此方法对有效物质的检测具有准确、快速的特点。     

利用Co60γ-射线选育优良红曲霉菌株的研究

利用不同剂量Co60γ-射线辐照丹溪1号红曲霉菌,分离、筛选出一株低桔霉素（2.1ppm）,较高活性淀粉酶（685u/g）和Monacolin K（11760ppm）的红曲霉变异菌株,暂时命名为丹溪1-1号,经连续发酵试验证明这变异菌株性能稳定,是较为理想的红曲霉菌株。     

纳豆红曲胶囊活性成分及其保健功能研究进展

纳豆红曲胶囊是以保健红曲和纳豆冻干粉为原料制成的保健食品,不仅含有红曲的活性物质,如红曲色素、Monacolin K、麦角甾醇、γ-氨基丁酸等,还含有纳豆的活性成分如纳豆激酶、纳豆菌、维生素K2、异黄酮等,因此纳豆红曲胶囊具有传统红曲和纳豆的双重保健功效,具有降血脂、溶栓、抗心脑血管疾病、抗菌、抗癌等功能.本文对红曲和纳豆的主要活性成分及其保健功效作了简单的介绍,并对其发展前景进行了展望.     

碱蓬红斑病病原菌鉴定及生物学特性研究初报

从碱蓬（Suaeda glauce）红斑病感病植株单斑分离出2种真菌SK‐X1和SK‐X2,形态学和分子生物学鉴定结果表明,SK‐X1为石楠拟盘多毛孢（Pestalotiopsis pho‐tiniae）、SK‐X2为胶孢炭疽菌（Colletotrichum gloeosporioides ）．2种菌均具有致病性,但生物学特性有别：二者菌丝生长及孢子萌发温度范围为15～35℃、最适温度为28℃,但菌丝致死温度S K‐X1为70℃、S K‐X2为73℃;孢子致死温度S K‐X1为55℃、S K‐X2为58℃．最适p H值为7,但孢子萌发p H值范围S K‐X1为5～10、S K‐X2为4～12．湿度为100％时菌丝生长最快、产孢量最大,但菌丝生长适宜湿度S K‐X1为86％～100％、S K‐X2为65％～100％,孢子萌发适宜湿度S K‐X1为90％～100％、S K‐X2为86％～100％．光照对菌丝生长无影响,但全光照利产孢．     

嗜水气单胞菌发酵条件的优化研究

研究了嗜水气单胞菌的最佳培养条件,通过单因子实验得到该菌株的最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为大豆蛋白胨,初始pH值为7.5,最适生长温度和时间为28℃、36h,最佳氯化钠浓度为6.84mg/mL;在其他培养条件不变的情况下,通过对大豆蛋白胨、葡萄糖、K2HPO4浓度、初始pH值做四因子三水平的正交实验,得到培养基最佳组合为:葡萄糖10 g/L、大豆蛋白胨10 g/L、K2HPO44.56mg/mL、初始pH值7.5.研究结果为嗜水气单胞菌规模化发酵培养奠定了基础.     

微波对K562/MDR细胞凋亡及热休克蛋白70表达的影响

研究微波引起白血病耐药细胞株K562／MDR的凋亡以及对热休克蛋白70表达的影响。使用MTT方法检测细胞存活率，AnnexinV/PI双参数法检测K562／MDR细胞的凋亡率，流式细胞仪检测热休克蛋白70的表达。结果表明，微波可起K562／MDR细胞的凋亡，经0.20,0.60W/cm^2功率密度微波作用20min（保持43℃），37℃培养24h后，细胞凋亡率分别为10％、13．6％，而水浴加热引起的凋亡率仅为3．8％，微波照射影响细胞内热休克蛋白70的表达，在43℃时，0.20,0.60W/cm^2功率密度微波作用20min抑制HSP70的表达，实验说明微波能引起K562／MDR细胞的凋亡，该凋亡与微波引起的热休克蛋白表达的改变可能有联系。     

产脂肪酸菌种的筛选及部分酶学性质

从含油污泥中筛选出一株产脂肪酶活力较高的微球菌,此菌最适产酶条件：2％的蛋白胨为氮源,1％的橄榄油为碳源,pH8.0,28℃培养48h．酶学性质研究发现,在28℃和45℃脂肪酶有较高催化活力,其中28℃活力更高些,最佳反应pH为8．0,pH稳定范围在6．0～10．0之间,Ca2 和K 对酶有激活作用,Fe2 ,Cu2 和Mn2 等对酶有抑制作用．     

不同贮藏温度对4种杨树花粉生活力的影响

采用花粉离体培养的方法对不同温度条件下贮藏的4个杨树无性系花粉活力进行了研究,并对超低温贮藏1年后杨树花粉用于杂交育种的可行性进行了研究。结果表明,杨树花粉在离体培养28 h萌发率达到最大。贮藏3个月后,-20℃贮藏条件下4个杨树无性系花粉的萌发率最高,分别是:白杨84 K为36%,白杨毛新杨×银灰杨为35.2%,中菏1号为39.2%,钻天杨为41.9%。-80℃贮藏1年后的花粉仍具有生活力,能够正常授粉并获得正常发育的种子。     

一种新型水玻璃砂溃散剂

本文对自制的一种新型水玻璃砂溃散剂——K溃散剂的工艺性能进行了试验研究,并对K溃散剂的成本进行了分析,结果表明:加K溃散剂的水玻璃砂800℃和1200℃时的残留强度明显降低,且其成本仅为树脂砂的1/4.最后,文中还对K溃散剂的溃散机理进行了初步探讨.     

重组促性腺激素释放激素基因原核表达的影响因素

为得到较多的GST-GnRH/TRS融合蛋白,深入研究其性质,对工程菌内GST-GnRH/TRS基因表达的条件进行了研究。结果表明,诱导GST-GnRH/TRS基因原核表达的最佳IPTG浓度为0.2mmol/L;在30℃诱导培养,能够获得较高的蛋白表达量;最佳诱导培养时间2h;最佳诱导培养的初始pH值为7.0;在振荡转速为135r/m1n、诱导培养时间为2h时,增大接种量,有利于原核基因的表达;在培养基因中添加适量的葡萄糖,能够提高GST-GnRH/TRS基因的原核表达,但葡萄糖含量较高时也不利于GST-GnRH/TRS基因原核表达;K 、Mg2 、Ca2 、Fe3 抑制GST-GnRH/TRS基因的原核表达,其中K 抑制作用最为强烈;添加少量的NH4 有利于提高GST-GnRH/TRS基因原核表达的量,但NH4 含量过高也不利于GST-GnRH/TRS基因原核表达。     

凝结芽胞杆菌产碱性脂肪酶的条件研究

本文对分离获得的产碱性脂肪酶的5株菌进行复筛,对产酶量大的一株菌F12进行鉴定,确定该菌株为凝结芽胞杆菌(BacillusCoagulans)。此菌产碱性脂肪酶的最适条件是:黄豆饼粉2.5,玉米浆1.5,可溶性淀粉0.5,K2HP40.5,NaNO30.5,起始pH9.0,培养温度28～30℃,培养周期22～26h。     

果胶裂解酶液态发酵条件的研究

通过单因素及正交实验对黑曲霉(Aspergillus niger)产生果胶裂解酶的发酵条件进行优化,研究了该酶的性质。实验表明,该酶的最适产酶培养基组成为(g·L-1):麸皮60,玉米秸杆40,尿素20,K2HPO4·3H2O 2．0,KCl 7．0,CaCO310．0。最适培养条件为:初始pH 6．0,30℃,接种量8％,培养2 d,此时酶活力为8．47 U／mL。该酶的最适温度50℃,最适pH 6．0。     

层状化合物K_(0.81)Li_(0.27)Ti1.73O_4的合成

研究以K2CO3,Li2CO3和TiO2为反应原料合成层状钛酸盐K0.81Li0.27Ti1.73O4过程中合成条件对产物的影响.结果表明:反应温度在1000～1200℃,反应原料配比为n(K2CO3):n(Li2CO3):n(TiO2)=(0.405～0.42):(0.135～0.165):1.73时,均可以得到产物K0.81Li0.27Ti1.73O4,延长反应时间及升高反应温度均有利于产物的生成;在1200℃高温条件下,使用刚玉坩埚为反应容器时,最佳的反应条件是:反应温度为1100℃,反应原料配比为n(K2CO3):n(Li2CO3):n(TiO2)=0.405:0.135:1.73,反应24h.     

一株脂肪酶的筛选和产酶条件及其酶性质的研究

从东营油污样中分离获得一株产脂肪酶的菌株BYCM-1,经鉴定为根霉属.研究了该菌株的产酶条件及其酶性质.研究表明该酶最适的产酶条件为:培养基初始pH 6.5,温度40℃,培养时间72 h.酶作用的最适pH值为8.0,最适温度为40℃.Ca2 和K 对酶活性有一定的激活作用,而Mg2 ,Cu2 ,Fe2 对酶活性有不同程度的抑制作用.