欧洲鳗鲡抗体生成规律的初步研究

用山羊IgG注射欧洲鳗鲡背部肌肉后,采用山羊IgG-琼脂糖亲和层析柱对欧鳗血清免疫球蛋白（IgM）进行分离纯化,并通过SDS-PAGE电泳对纯化后的IgM进行检测,同时制备兔抗欧鳗IgM血清,运用间接ELISA检测正常欧鳗血清（第0天）以及山羊IgG注射欧鳗后第7、14、21、28、35、42天的血清抗体水平,同时利用荧光定量PCR测定了第0天至第28天的欧鳗肾脏、脾脏和鳃中IgM基因表达水平变化.结果表明：纯化后的欧鳗IgM经SDS-PAGE检测含有一条分子质量约68 ku的重链,以及分子质量分别为26 ku和28 ku的两条轻链,获得的兔抗欧鳗IgM血清效价达1/51 200;欧鳗血清抗体水平在第28天达到峰值,脾脏IgM基因表达水平在第14天达到峰值,肾脏和鳃均在第21天达到峰值,血清抗体水平以及三种组织器官IgM基因表达水平的变化规律均为先升高、达到峰值后再降低.     

北京鸭血清IgM及其抗血清的提纯和腔上囊中B淋巴细胞IgM表达的初步研究

从未经超免的正常北京鸭血清中分离纯化鸭IgM,制备了兔抗鸭IgM抗血清,并进一步用鸭IgG进行了亲和纯化。本研究还试将此抗血清用于免疫荧光法对北京鸭胚胎后期腔上囊B淋巴细胞发育中IgM的表达进行了初步观察。     

牛初乳中IgG1、IgG2的制备色谱分离与纯化

以二甲基十二烷基苄基溴化胺为预处理物质，采用DEAE Sepharose F.F离子交换色谱和Sephacryl S-200HR凝胶过滤色谱分离纯化了牛初乳中的IgG1和IgG2用亲和高效液相色谱法测定了IgG1、IgG2的含量。     

正己酸-低温乙醇沉淀法纯化小鼠腹水IgM类单抗的研究

用不同有机酸-低温乙醇纯化腹水,确定纯化效果最好的有机酸为正己酸,纯化的IgM纯度可达95％,收率将近90％;用正己酸沉庭法配合低温乙醇沉淀法分别纯化不同抗原免疫的三种IgM型单抗,对多数IgM类抗体纯度可达到85％以上,IgM回收卒大于85％,表明这种纯化方法适用于多数IgM类单抗的纯化;用硫酸铵沉淀法及正己酸-低温乙醇沉淀法纯化相同的抗体,对活性都不影响,但正己酸-低温乙醇沉淀法纯化的抗体纯度远高于硫酸铵沉淀法、因此正己酸-低温乙醇沉淀法是一种简单、快速、温和的从小鼠腹水中纯化IgM方法,可满足一般实验的要求、     

三聚氰胺多克隆抗体的制备及鉴定

用三聚氰胺偶联蛋白为抗原,按不同的时间规律及抗原剂量对成年兔进行免疫,获得特异性的三聚氰胺多克隆抗体.效价检验应用蛋白质电泳和间接ELISA方法.应用10%及12.5% SDS-PAGE,验证血清中IgG抗体的产生情况,再用间接酶联免疫吸附试验测得第4次免疫后抗体效价达到1.2×107.此法易于实施,且获得的血清样品具有较高的效价,为今后三聚氰胺多克隆抗体的分离纯化提供了可靠的实验依据.     

唾液、DTT、2-Me三种物质对IgM抗体中和能力的比较

探索了三种物质对IgM抗体中和能力，选取5例0型孕妇产前检查标本，分别采用唾液、DTT、2-Me三种物质中和IgM抗体，检测IgG抗体效价。5例孕妇血清经唾液中和，测得IgG效价分别为抗A：0；抗B：0；抗A：1：2；抗B：0；抗A：0抗B：0；抗A：0；抗B：0；抗A：0；抗B：0。采用DTT中和后测得IgG效价分别为抗A：1：8；抗B：1：16；抗A：16；抗B：1：16；抗A：1：16；抗B：1：8；抗A：1：8；抗B：1：8；抗A：1：16；抗B：1：16。采用2-Me中和后测得IgG效价分别为抗A：1：2；抗B：1：64；抗A：1：128；抗B：1：4；抗A：1：32；抗B：1：128；抗A：1：16；抗B：1：32；抗A：1：64；抗B：1：32。结果表明唾液型物质不仅中和IgM抗体，而且中和部分IgG抗体，DTT对IgM抗体中和能力较差。2-Me对IgM抗体中和能力较强，而且对IgG抗体破坏小。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体7C11的纯化与鉴定

为获得高纯度的抗肾综合征出血热病毒单克隆抗体,建立杂交瘤细胞株7C11两步纯化的方法并进行亚类及特异性鉴定。采用Balb/c小鼠制备7C11单克隆抗体腹水,辛酸-硫酸铵法初步分离纯化,蛋白G亲和层析柱进一步分离纯化并鉴定。经初步分离纯化后,单抗IgG纯度>80%,回收率>50%;经过Protein G层析柱二次分离纯化后,单抗IgG纯度>98%,回收率>50%。亚类鉴定为IgG1,且特异性较好。成功获得高纯度的抗HFRS单克隆抗体,为抗汉坦型肾综合征出血热抗原表位的鉴定、抗原物质结构与功能的关系等后续研究奠定基础。     

烟草花叶病毒单克隆抗体的制备和鉴定

经工程菌表达与纯化,得到了纯度95%以上的TMV-CP-F重组蛋白,配合提取的TMV天然病毒颗粒作为免疫原.通过杂交瘤技术获得了14株能分泌特异针对TMV外壳蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株.经鉴定14株细胞所分泌的抗体亚类为IgG1型,抗体轻链均为κ型.经ProteinA一步法亲和层析纯化所得抗体经鉴定相对分子质量在149.36～157.23 ku之间,抗体纯度在80%以上.经间接ELISA测定,14株抗体均与TMV-CP重组蛋白和TMV病毒有良好特异性反应.所制备的抗TMV抗体的特异性高,可用于与其相关的免疫检测研究和应用.     

全国11城市的O型血液抗体效价调查研究

为了研究不同地区的O型血液中国人血清中的抗体效价是否有明显的差异和不同地区的抗体效价水平,对11个城市的O型血液抗体效价水平进行了检测。用全自动微板法,对调查的440份O型血抗-A、B抗体的IgM和IgG效价进行统计,表明IgM抗体效价较低,1:16出现的频次最高;IgG抗体效价较高,1:64出现的频次最高。各省市之间的抗体水平没有明显差异。     

抗心磷脂抗体与不明原因复发性自然流产的相关性研究

目的 探讨抗心磷脂抗体在不同孕育状态下妇女人群中的表达情况,研究抗心磷脂抗体与复发性自然流产的相关性.方法 应用前瞻对照的研究方法,收集正常生育组、早初孕组、复发性自然流产组、继发不孕组、偶发流产组5组病例.采用ELISA法检测各组病例中的抗心磷脂抗体IgG、IgM、IgA.运用统计软件,以x2检验分析各组抗心磷脂抗体IgG、IgM、IgA阳性率的差别.结果 得到抗心磷脂抗体IgG、IgM、IgA的阳性率,正常生育组：0.00％、3.70％、3.70％;早初孕组：0.94％、4.72％、0.94％;复发性自然流产组：9.76％、7.32％、2.44％;继发不孕组：3.57％、1.79％、3.57％;偶发流产组：0.00％、3.70％、7.41％.RSA组与早孕组均有统计学意义,p＜0.05;余组间比较无统计学意义.结论 抗心磷脂抗体阳性率在RSA最高19.52％、早初孕组6.60％、继发不孕组8.93％、偶发流产组11.11％、正常生育组7.40％.不明原因复发性自然流产的发生和抗心磷脂抗体的产生密切相关.     

新型肾综合征出血热EIA诊断试剂盒的研制

用多肽合仪合成汉坦病毒核衣壳蛋白（NP）(aa17－66）50个氨基酸残基的核心序列,以此为抗原,建立特羿性检测抗汉坦病毒IgG和IgM的酶联免疫吸附剂测定法（ELISA）,通过实验发现这一序列具有较强的抗原性,研制出了以合成肽为抗原的新型牧场异性检测抗汉坦病毒IgG和IgM的诊断试剂盒,通过对肾综合征出血热抗体阳性血清的检测,效果良好。     

57例不规则抗体干扰ABO血型鉴定分析

通过研究干扰血型鉴定的不规则抗体的特异性及类型,为正确的进行血型鉴定提供实验参考依据。2013年7月至2014年7月对22 558例患者进行血型及不规则抗体筛查检测,对因不规则抗体干扰血型鉴定患者进行抗体鉴定,明确抗体特异性及类型,并选择与抗体对应抗原阴性的红细胞制备反定型细胞进行血型鉴定,以排除干扰明确血型。结果:发现57名患者因MNS、Rh、Lewis、Duffy、P血型系统产生的不规则抗体干扰血型鉴定,其中抗-M最多,共37例,占64.91%,其次为抗-E和抗-e相关抗体,均为5例,分别占8.77%;抗-Lea3例,占5.26%;Ig G与Ig M类混合抗体37例,单纯Ig G类抗体14例,单纯Ig M类抗体6例。研究结果表明,Ig M和Ig G类不规则抗体均可干扰血型鉴定,以Ig M类为主。     

Specific monoclonal IgM is a potent adjuvant in murine malaria vaccination

Recent experiments in the murine system have indicated that the passive acquisition by offspring of maternal anti-malarial IgG antibodies while conferring some degree of immunity against a primary infection, paradoxically prevents the generation of acquired immunity through vaccination. Therefore, in view of earlier findings concerning the competitive effects of specific IgM and IgG antibodies, we investigated whether specific monoclonal IgM antibodies could be used to potentiate the response to a blood-stage murine malaria vaccine. We now report that small amounts of purified monoclonal anti-parasite IgM can specifically potentiate both priming and memory cell generation in response to vaccination as evidenced by survival after infection, and that the magnitude of this effect is greater than that found with a more conventional nonspecific adjuvant (Bordetella pertussis). Additionally, in offspring of immune mothers, where vaccination is ineffective for up to 8 weeks due to the presence of maternal IgG, we have found that IgM when administered with the vaccine can completely overcome this inhibition by its adjuvant effect.     

甲亢患者双特异性免疫复合物的研究

采用捕捉法ELISA,检测108例亢患者的抗体／补体类双特异性免疫合（Ig-C3-TCIC）和抗体／抗体类双特异性免疫复合物（Ig/Ig-TCIC),结果发现,甲亢患者除了C3／IgA-tcic含量显著高于健康人,C3／IgM-TCIC与健康人无显著性差异外,IgM/C3-TCIC、IgG/C3-TCIC、IgA/C3-TCIC和C3／IgG－TCIC的含量均显著低于健康人;各类Ig/Ig－含量,除IgA/IgM-TCIC与健康人无显著差异外,其余均显著高于健康人,结果表明,甲亢患者排除“异己”原的能力低下,而免疫调节水平紊乱,从而出现过高的免疫应答,也证明甲亢患者存在整体的和细胞免疫紊乱。     

伸筋草提取物对AA大鼠RF及Ig影响的实验研究

研究伸筋草提取物对佐剂性关节炎（AA）大鼠血清类风湿因子（RF）及免疫球蛋白（Ig）的影响,探讨其治疗类风湿性关节炎（RA）的作用及免疫学机制.采用弗氏完全佐剂（CFA）诱导大鼠AA模型,于造模后第7 d分别灌胃给药伸筋草乙醇、正丁醇提取物,连续给药21 d.ELISA法检测RF,免疫透射比浊法检测IgG、IgM、IgA的OD值.模型组大鼠血清RF和IgA、IgM水平均高于正常对照组（P〈0.01）.各治疗组RF、IgM、IgA水平均有不同程度的降低,IgG未见有意义的改变.伸筋草乙醇、正丁醇提取物可通过免疫调节机制对佐剂性关节炎发挥治疗作用.     

悬汞电极吸附伏安免疫法测定人体免疫球蛋白IgG、IgA、IgM

本文叙述了测定人体免疫球蛋白IgG,IgA,IgM的一个新方法。灵敏度高于均相伏安免疫法,IgM的检测限可达10~(-12)M。可应用于临床分析。     

我国戊型肝炎全病毒抗原抗HEV·IgM酶联诊断盒的临床应用

我国戊型肝炎全病毒抗原抗ＨＥＶ·ＩｇＭ酶联诊断盒的临床应用廖绵初，干侣仙，黄如统，李晓萸，李德荣（厦门大学抗癌研究中心）（军事医学科学院五所）赵炳华（浙江医科大学第一附属医院）从１９８９年正式确立戊型肝炎ＨｅｐａｔｉｔｉｓＥ以来，许多国家都研制其诊断...