vvIBDV诱导幼鸡免疫细胞凋亡的研究

为研究超强毒传染性法氏囊病病毒(vvIBDV)感染的致病机理，在3-6周龄SPF幼鸡法氏囊、脾脏、胸腺细胞培养体系中加入vvIBDv，以流式细胞术(FcM)、DNA琼脂糖凝胶电泳技术检测vvIBDV诱导的细胞凋亡，结果表明，在本实验的体外培养体系中，vvIBDV可直接和迅速引起幼鸡法氏囊细胞凋亡，对脾脏或胸腺细胞并无明显的作用．     

SPF鸡感染vvIBDV后免疫器官内肥大细胞及5-HT动态变化的观察

为观察肥大细胞(Mast Cell,MC)在vvIBDV感染中的作用,将60只30日龄无病原感染(Specific Pathogen Free,SPF)鸡随机分成感染组和对照组。感染组经滴鼻、点眼、肛拭感染超强毒株传染性法氏囊病病毒(very virulent Infectious Bursal Disease Virus,vvIBDV)于0,24,48和72h后,分别取法氏囊、胸腺、脾脏,用甲苯胺蓝染色法观察上述各组织中的MC数量的动态变化;用免疫组化染色法检测各组织中IBDV病毒抗原和5-HT分布量的动态变化。结果表明:与对照组相比,感染组鸡各免疫器官中,MC的数量随着病毒分布量的增加和组织损伤程度的加重而明显增多(P<0.01);MC释放的介质之一--5-HT的量也明显增多(P<0.01)。由此推断,MC和5-HT参与了IBD的发病过程,它们在IBDV感染引起的免疫器官严重损伤中可能起着重要的作用。     

双酚A对鸡胚中枢免疫器官发育影响的形态学观察

为进一步研究双酚A(BPA)的毒性作用,本试验对9日龄AA鸡胚和SPF鸡胚尿囊腔注射双酚A,待鸡胚孵化至22日龄,取鸡胚法氏囊和胸腺进行下述各项指标测定和形态学观察。结果显示,与对照组相比较,试验组鸡胚孵出率显著降低,法氏囊指数明显变小(p<0.05);染毒组法氏囊淋巴滤泡个数显著少于对照组(p<0.01),胸腺皮质、髓质厚度极显著小于对照组(p<0.01);光镜观察发现,双酚A染毒组法氏囊淋巴滤泡和胸腺髓质中的髓细胞明显多于对照组,扫描电镜下可见细胞间隙明显增大,显现针孔样结构。研究结果表明,双酚A对AA鸡胚和SPF鸡胚中枢免疫器官有毒性作用,对鸡胚法氏囊和胸腺的发育有显著的抑制作用。     

应激及地塞米松对小鼠胸腺细胞和脾脏细胞凋亡的作用

目的：研究应激对小鼠胸腺细胞及脾脏细胞凋亡的作用机理,方法：以小鼠为模型,采用碘化丙啶染色结合流式细胞仪分析,研究应激（将四肢固定用水淹至颈部）,注射地塞米松（dexamethasone,DEX)或应激同时注射DEX对胸腺细胞及脾脏细胞的凋亡的作用）。结果：胸腺细胞和脾脏细胞的凋亡百分率与腹腔注射DEX的剂量呈正相关,其中胸腺细胞更易于调亡,应激能引起胸腺细胞及脾脏细胞的凋亡（P＜0．01）,DEX能增强应激对胸腺细胞及脾脏细胞的凋亡作用（P＜0．01）,结论：应激可通过诱导免疫细胞凋亡而削弱机体的免疫力,引起疾病发生;DEX在应激诱导细胞凋亡时所起的协同作用提示两者可能通过类似的机制发挥作用。     

鸡胚胸腺、法氏囊组织免疫功能发育研究

实验选取12-19胚龄的鸡胚和1日龄雏鸡的胸腺、法氏囊,石蜡切片HE染色后,对组织结构发育进行动态连续观察.通过MTT法检测胸腺T淋巴细胞和法氏囊B细胞的增殖率,了解不同胚龄T细胞、B细胞的免疫功能发育的状态.结果表明:随着胚龄的增加,鸡的胸腺和法氏囊发育逐渐完善,免疫功能随之增强;T淋巴细胞、B淋巴细胞的增殖率不断增加.     

蓖麻毒素气源感染小鼠后炎性因子的定量分析

蓖麻毒素会引起机体内蛋白合成终止和细胞凋亡,通过测定组织器官内细胞因子的表达情况可监测机体中毒后免疫应答反应的发生与发展。本试验以气溶胶的方式将蓖麻毒素感染给小鼠,采用荧光定量聚合酶链式反应对攻毒后小鼠的肺脏、脾脏及胸腺中的6种炎性因子进行定量分析。研究结果显示:与对照组(生理盐水组)相比,试验组(蓖麻毒素组)小鼠肺脏、脾脏、胸腺中的趋化因子(CCL2、CXCL2)、白介素2(IL-2)和γ干扰素(INF-γ)的信使RNA(mRNA)表达均显著升高;而白介素1(IL-1)的信使RNA(mRNA)在肺脏、脾脏中高表达,在胸腺中为低表达;白介素4(IL-4)的信使RNA(mRNA)在肺脏、胸腺中高表达,在脾脏中为低表达。由此可知:经毒素气源感染后的小鼠,肺组织及免疫器官组织炎性因子分泌水平发生显著改变,局部及整体免疫调节机能紊乱。     

TCRαβ+CD4-CD8-细胞在胚胎胸腺器官培养中的发育特征

为研究TCRαβ + CD4 - CD8 - 双阴性(DN)胸腺细胞在胚胎胸腺中的发育特征,采用胚胎胸腺器官培养(FTOC)体系、免疫荧光标记与流式细胞仪检测技术,对FTOC体系中不同发育阶段(第9天和第18天)的TCRαβ +DN细胞的增殖、分化及凋亡特性进行了分析.结果表明,抗CD3单抗能够显著促进FTOC第18天的TCRαβ + DN细胞的增殖,对FTOC第9天的TCRαβ + DN细胞作用相对较弱.IL-7能够促进FTOC第9天的TCRαβ + DN细胞向TCRαβ + CD4 + /CD8 + SP细胞分化;对FTOC第18天的TCRαβ + DN细胞促分化作用明显减弱.胸腺基质细胞系MTEC5细胞可调节IL-7的促分化作用.同时,实验发现在FTOC体系中的TCRαβ + DN细胞是一群不易凋亡的细胞,从而对该特殊亚群胸腺细胞的发育分化特性获得了新的认识.     

实验性鸭瘟的病原动态分布及病理组织学观察

针对30只DPV攻毒试验鸭及30只同居鸭的体内DPV-DNA动态分布及病理组织学变化,采用PCR技术和常规病理学方法进行研究、结果显示：（1）DPV攻毒后6h,用PCR方法在肝、脾、法氏囊、胸腺、血液、直肠粪便可检测到DPV-DNA（2）DPV经不同途径感染成年鸭后,病毒在体内的动态分布有一定的差异．（3）在自然感染的情况下,肝、肺、血液．胸腺、直肠粪便可作为鸭瘟病原DNA早期检测的首选取材样本．（4）DPV感染后,患鸭的肝脏、肾小管上皮细胞．脾脏、法氏囊及胸腺网状细胞可见核内包涵体．（5）组织病变与病原分布的时序性相关,试验组鸭在DPV攻毒后24h,同居感染组鸭在同居后72h,心、肝、肺、肾、大脑、脾脏、法氏囊、胸腺、十二指肠等组织均表现出程度轻微的实质细胞肿胀、变性;继而发展为细胞水肿、坏死,间质严重出血（6）免疫器官胸腺、脾、法氏囊、骨髓的病原检出及组织病变皆发生在DPV感染的早期,病变器官从组织水肿、充血、出血、淋巴细胞数量减少,迅速发展为坏死．上述结果为研究DPV的致病机理、鸭瘟的早期诊断和鸭瘟的防制提供了依据．     

小鼠胸腺的结构、功能与日龄的关系

目的　探讨小鼠胸腺的结构、功能变化与日龄的关系。方法　以不同日龄的小鼠为研究对象,采用免疫组织化学方法观察胸腺细胞的凋亡情况和胸腺中T淋巴细胞的数目变化。结果　不同日龄小鼠均可见胸腺细胞凋亡,新生小鼠、第1 4、2 8d小鼠组间无明显区别(P >0 0 5 ) ,日龄4 2、5 6d小鼠相比于幼龄小鼠胸腺细胞凋亡显著增多(P <0 0 5 ;P <0 0 1 ) ,且T细胞数目明显减少(P <0 0 5 )。结论　幼龄小鼠胸腺功能已成熟,并不随小鼠的发育而增强。至日龄4 2d后,胸腺细胞凋亡明显加快,胸腺萎缩,成熟T细胞减少,功能降低。     

胸腺素α_1对鸡生长性能及免疫器官发育的影响

通过对照试验在 4日龄和 7日龄时 ,低剂量组、中剂量组和高剂量组每只鸡分别肌注 0 .0 1 5 mg·kg- 1 ,0 .0 3 mg· kg- 1 和 0 .0 6mg· kg- 1 体重剂量的胸腺素α1 ( Tα1 ) ,对照组注射等量的生理盐水。试验期为 5 6d,观察 Tα1 对鸡体重、饲料转化率、法氏囊指数、胸腺指数、和脾脏指数的影响。结果表明 :在 3 5 ,42和 5 6日龄时 ,低剂量组鸡的体重显著高于其他各组 ( P<0 .0 5 ) ,而在 1 4和 2 1日龄时各组平均体重差异不显著 ( P>0 .0 5 )。在整个试验期间 ,低剂量组的饲料报酬均高于其他三组 ;低剂量组的法氏囊指数均高于其他三组 ,并在 1 4日龄时与对照组和中剂量组差异显著 ( P <0 .0 5 ) ,而在 3 5日龄与对照组和高剂量组差异显著 ( P <0 .0 5 ) ;低剂量组的胸腺指数也高于其他三组 ,1 4日龄时与对照组差异显著 ( P <0 .0 5 ) ,而与中剂量组和高剂量组差异不显著( P>0 .0 5 ) ,但在 3 5和 5 6日龄时差异显著 ( P <0 .0 5 ) ;低剂量组的脾脏指数高于其他三组 ,且在 3 5和 5 6日龄差异显著 ( P <0 .0 5 )。     

6周递增负荷运动中大鼠胸腺和脾脏的形态结构变化特征

为进一步了解6周递增负荷运动对大鼠脾脏和胸腺免疫功能的影响,设计运动模型,SPF级SD雄性大鼠72只(8周龄)随机被分为12组:0周适应性训练组、2周训练组、4周训练组和6周训练组。每组3个取样点,安静状态、运动后即刻、运动后3h.大鼠进行匀速跑台运动,坡度为0,每天1次,每次持续30min,6d/w,休息1d,共持续6w。第1周为适应性运动训练(速度为10m/min),第2周负荷设定为20m/min,以后每周递增负荷5m/min,至第6周达到最大运动负荷40m/min。于0、2、4和6周末取胸腺、脾脏多聚甲醛中保存,HE染色。结果显示,胸腺皮质厚度与0周相比明显降低,有显著性差异(P<0.05),胸腺和脾脏内部的形态结构与0周相比明显紊乱,层次不清。这表明递增负荷这种运动刺激影响了胸腺和脾脏的免疫功能,且随负荷的增加和训练时间的延长,大鼠胸腺和脾脏的形态结构受的影响加大。     

Host cell apoptosis induced by infection with duck swollen head hemorrhagic disease virus

This study aimed to examine the host cell apoptosis in the tissues of Peking ducks infected with duck swollen head hemorrhagic disease virus (DSHDV). The dynamic changes associated with apoptosis occurring in the internal tissues were evaluated at different time points postinoculation (PI) by performing hematoxylin and eosin (HE) staining, followed by light microscopy, terminal deoxynucleotidyl transfe- rase dUTP nick-end labeling (TUNEL) assay, and transmission electron microscopy (TEM). The results showed that DSHDV infection could induce apoptosis in host cells, including those of the bursa of Fabricius (BF), thymus, spleen, liver, intestinal tract, kidney, and esophagus. The apoptotic index (AI) values increased with time from 2 h to 72 h PI, and the highest values were recorded at 72 h PI. Further, cell death due to classic necrosis was observed in the dying or deceased ducks after 72 h PI. In conclusion, host cell apoptosis can be induced by DSHDV and may play an important role in the pathogenesis of duck viral swollen head hemorrhagic disease (DVSHD).     

SPF级与普通级Hartley豚鼠主要脏器系数的比较

目的测定SPF级和普通级Hartley豚鼠的主要脏器质量,比较屏障环境和普通环境下豚鼠脏器系数的差异。方法取2月龄SPF级和普通级豚鼠雌雄各30只,剖检取心、肝、脾、肺、肾等13个脏器,称其质量并计算脏器系数。结果SPF级和普通级Hartley豚鼠雌性之间比较,体质量、心、脾、肺、肾、肾上腺、子宫质量差异极显著（P〈0．01）;SPF级和普通级Hartley豚鼠雄性之间比较,心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、睾丸、附睾等其质量差异极显著（P〈0．01）。SPF级和普通级Hartley豚鼠雌性之间比较,心、脾、肺、肾、肾上腺、子宫的脏器系数差异极显著（P〈0．01）。SPF级和普通级Hartley豚鼠雄性之间比较,心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、睾丸、附睾的脏器系数差异极显著（P〈0．01）。结论SPF级和普通级Hartley豚鼠比,除脑以外的脏器系数均有显著差异,且普通级豚鼠的脏器系数普遍高于SPF级豚鼠。     

海洛因成瘾者免疫系统超微病理变化研究

应用透射电镜对4例海洛因成瘾者脾脏、淋巴结和胸腺进行观察。探讨了海洛因成瘾者免疫系统超微病理损害。结果表明:脾脏淋巴细胞数量减少,核内假包涵体形成;淋巴结内淋巴细胞数量减少,多见细胞凋亡,胞浆内细胞器减少,核内假包涵体形成;胸腺T淋巴细胞胞浆内线粒体肿胀,胞浆成分少,核异染色质少。认为海洛因成瘾者免疫系统存在萎缩和退行性改变,机体免疫功能下降。     

14MeV快中子辐照对大鼠免疫系统的损伤

用14 MeV快中子对Wistar雄性大鼠进行5 Gy的全身照射,观察其免疫系统损伤情况及氧化应激的相关变化.大鼠分为辐射组和对照组,分别在辐射后1,7,14d 3个时间点取血液、胸腺和脾脏进行研究.结果表明,辐照后第1d,辐照组大鼠白细胞和淋巴细胞数量降至最低,照后第7、14d有所恢复,但仍不足正常组的1/2.血小板数在照后第1d开始减少,至第7d达到最低值,第14d仍与正常组有显著差异.而大鼠骨髓有核细胞总数辐照后14d明显低于正常组.另外胸腺和脾脏均出现萎缩,脏器指数明显减小.血浆、胸腺和脾脏的总抗氧化能力T-AOC、SOD酶活性及MDA值含量均有不同程度的升高趋势.说明快中子辐射影响血浆、胸腺和脾脏的抗氧化应激能力,诱导细胞凋亡或坏死,造成胸腺和脾脏的萎缩以及一系列组织形态的改变,从而严重影响大鼠的正常免疫功能.      

IRM-1小鼠生物学特性的初步研究

目的　测定和比较不同年龄和性别IRM 1小鼠主要脏器重量和系数、生殖生长数据。方法　将不同周龄小鼠断颈处死 ,取主要脏器称重 ,计算脏器系数 ,测定出IRM 1小鼠不同时期的生殖生长数据。结果和结论　 9周龄雄性小鼠心、肝、肾重量高于雌性小鼠 ,(P <0 0 5 ) ,6周龄雄性小鼠心、肝、肺、肾重量高于雌性小鼠 (P <0 0 5 ) ,9周龄和 6周龄雄性小鼠胸腺重量均低于雌性小鼠 (P <0 0 0 1)。IRM 1小鼠生殖生长特性与IRM 2小鼠相似     

淫羊藿煎剂对雌性贡鸡免疫和生殖器官的影响

目的：研究不同剂量的淫羊藿煎制剂对雌性贡鸡免疫器官和生殖器官指数的影响.方法：对3日龄雏鸡每日灌注不同剂量的淫羊藿煎制剂,于21日龄测定免疫器官和生殖器官指数.结果：法氏囊指数和胸腺指数升高不显著（P>0.05）,脾脏和雌性生殖器官指数升高显著（P<0.05）.结论：淫羊藿作为鸡饲料添加剂可以提高雌鸡抗病能力和繁殖性能.     

Tiantanbio: NIH 小鼠血液生理生化和脏器指标的测定分析

摘要: 目的测定Tiantanbio: NIH( 天坛生物: NIH) 小鼠的血液生理生化和脏器指标,并进行差异性和相关性分析。方法选取4 周龄和8 周龄Tiantanbio: NIH 小鼠各30 只,雌雄各半,麻醉后采血,测定17 项生理和13 项生化指标,解剖并测定主要脏器质量和脏器系数,分析各指标性别和周龄间的差异,并进行脏器质量与体质量的相关性分析。结果差异性分析显示,血液生理指标中,白细胞、白细胞亚群和血小板相关指标是主要差异项目; 血液生化指标多数都会受到性别和周龄的影响; 脏器质量雄性高于雌雄,并随着周龄增加而增大,脏器系数则随着周龄增加而减小。相关性分析显示,除胸腺外其他脏器质量均与体质量显著正相关( P ＜ 0. 05) ,其中雌鼠肝脏、雄性肾脏与体质量的相关性最高。结论性别和周龄都会影响血液生理生化和脏器指数的变化,不同机构保种的NIH 小鼠存在差异,需建立相应的生物学特性基础数据库。     

应激引起不同年龄、性别和种类小鼠免疫器官退化的比较研究

以警告信号加足底电击的方式(简称信号电击)对不同年龄、性别和种类小鼠进行应激,每天24min,共7d。结果发现,应激后免疫器官退化,重量减轻,而且这种变化与年龄和性别有关。胸腺退化,年龄大的鼠比年龄小的鼠更明显,而脾脏则相反,年龄小的鼠更敏感。另外,胸腺的退化雄性要高于雌性,而脾脏则没有性别上的差异。从种类上看,Swiss鼠比Balb/c鼠更敏感。对淋巴结来说,这种退化没有表现出年龄、性别和种类的差异。此外,应激使胸腺、脾脏内的淋巴细胞总数和骨髓内淋巴细胞的比例减少。这一结果说明,胸腺和脾脏的退化,不是由于组织内体液的减少,而是胸腺和脾脏内淋巴细胞绝对数减少之故。     

PM2.5暴露诱导Wistar大鼠急性脾损伤

目的 探讨大气细颗粒物PM2.5暴露对Wistar大鼠急性脾损伤的影响。方法：PM2.5冬夏混合膜由实验室保留。将大鼠随机分为实验组和对照组（n = 8）,实验组4 h /天750 g·mL-3 PM2.5口鼻暴露处理,对照组生理盐水,5 d / 周,共2周,染尘结束24 h后处死,称重收集脾脏上清和细胞,HE染色观察脾组织形态学变化。检测脾上清H2O2含量水平。cell viabitity assay和qRT-PCR仪器检测脾细胞的Bax、BcL-2水平的表达情况。结果：HE染色结果发现,PM2.5可增加脾生发中心的淋巴细胞。PM2.5染尘后实验组大鼠体重明显低于对照组,差异均有统计学意义（P < 0.05）。PM2.5染尘可增加脾上清H2O2含量水平。脾细胞活力和凋亡结果表明,PM2.5暴露可抑制脾细胞的增值能力以及上调Bax和Bcl-2基因表达。结论：PM2.5染尘可引起脾脏氧化损伤,促使氧化应激水平上升,发生炎症反应,增加脾细胞的增值能力,最终对脾产生一定的损害作用。