I—65增强柔红霉素抗癌活性的研究

采用全外细胞培养技术，观察了钙离子阻断剂３、６－「＝甲氨基」－苯骈碘杂六环枸橼酸盐（Ｉ－６５）单独和与柔红霉素（ＤＮＲ）合用对Ｌ１２１０细胞增殖的影响。结果：单独应用Ｉ－６５时对细胞的增殖和集落形成抑制作用极小；与ＤＮＲ合用，可显著增强ＤＮＡ对细胞增殖的抑制作用，其ＩＤ５０为单用ＮＤＡ的１／１１。联合用药时细胞集落形成的率较单用ＮＡ（０．１５μｇ／ｍｌ）下降１４倍，证实了Ｉ－６５能显著增强ＤＮＲ的     

钙拮抗剂异博定增强博来霉素A_5对人肝癌BEL-7402细胞的毒性作用

应用肿瘤细胞增殖抑制、克隆形成、流式细胞术,研究了钙拮抗剂异博定(Ver)与博来霉素A_5(BLM A_5)对人肝癌BEL-7402细胞的影响.结果表明:无细胞毒性作用的Ver(20μmol)增强BLM A_5对人肝癌BEL-7402细胞增殖抑制作用达4倍;100μmol Ver增强BLM A_5毒性达11倍;与BLM A_5单独作用比较,Ver使G_2M期细胞进一步增多.另外,提高胞外钙浓度能增加BLM A_2对人肝癌BEL-7402细胞的增殖抑制作用.     

茜草蒽醌对肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

目的探讨茜草提取物蒽醌单体对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用.方法采用MTT法、形态学、集落形成法,检测蒽醌对人肝癌细胞增殖的抑制结果.结果MTT法显示各个浓度的蒽醌对肝癌SMMC-7721细胞的增殖均有抑制作用,呈现出与药物浓度、作用时间的依赖性;生长曲线由＂S＂型逐渐变得低平;倒置显微镜下可见药物组细胞数减少,间隙增大,细胞间出现＂接触性抑制＂;集落形成率降低（P〈0.01）,集落中细胞数减少.结论茜草蒽醌对人肝癌SMMC-7721细胞生长具有抑制作用;蒽醌有可能成为抗肝癌新药,为抗癌新药的开发提供理论与实验依据.     

白背叶黄酮化合物QB3对人肿瘤细胞增殖的抑制作用

为研究白背叶黄酮化合物QB3(芹菜素-7-O-β-D-(6″-反式-对-香豆酰基)-葡萄糖苷)对人肿瘤细胞增殖的抑制作用,采用四氮唑盐还原法(MTT)评价QB3体外对卵巢癌Skov3、Cne—2 z细胞增殖的影响。结果QB3在浓度为25、50μg/mL时对卵巢癌Skov3细胞有明显的抑制作用(P<0.05),其IC50为167.79μg/mL;QB3在浓度为50μg/mL时对Cne—2 z细胞有明显的抑制作用(P<0.05),其IC50为126.63μg/mL。说明QB3对Skov3、Cne—2 z细胞增殖有明显抑制作用。     

阿维A对HaCaT细胞增殖的影响

目的:探讨阿维A对角质形成细胞(HaCaT)增殖的影响及其发挥作用的适宜浓度.方法:分别以浓度为1×10-7mol/L、1×10-6mol/L、5×10-6mol/L阿维A作用于HaCaT细胞,用四氮唑盐类化合物(MTS)比色法检测每组12、24、48和72 h HaCaT细胞的增殖情况.结果:与空白对照组相比,大于或等于1×10-6mol/L阿维A可以抑制HaCaT细胞增殖,并且在作用24 h后随着阿维A浓度的增加,其对HaCaT细胞增殖的抑制作用增强.结论:阿维A抑制HaCaT细胞增殖适宜浓度为5×10-6mol/L.     

PEI介导PKC-α反义核酸对肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用

目的:研究聚乙烯亚胺(PEI)-PKC-α反义脱氧核寡酸(ASODN)对人肝癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用.方法:RT-PCR检测肝癌SMMC-7721细胞、HepG2细胞PKC-α mRNA表达的差异,细胞增殖抑制实验检测PEI和ASODN混合的最佳质量比,WST法和克隆形成抑制实验检测细胞增殖抑制作用,免疫荧光检测PKC-α的表达水平.结果:SSMC-7721细胞PKC-α mRNA表达相对较高,PEI和ASODN的质量比为0.75/1时是PEI转染反义核酸的合适比例,对SMMC-7721细胞具有明显的增殖克隆抑制作用,且呈剂量-效应关系;ASODN和PEI-ASODN对SMMC-7721的IC50分别为16.6 μmol/L和0.58 μmol/L;PEI-ASODN能够有效抑制PKC-α蛋白的生物合成.结论:PEI-ASODN能显著抑制SMMC-7721细胞增殖和克隆形成,下调PKC-α蛋白的表达.     

干扰长链非编码RNA Z38表达对鼻咽癌细胞增殖的影响

新型的长链非编码RNA Z38已证实高表达于肿瘤组织,低表达于癌旁组织,属于癌基因,但其功能和作用机制尚需深入分析。研究目的在于探讨稳定干扰长非编码RNA Z38对鼻咽癌细胞HNE1、5-8F功能和机制的影响。采用慢病毒包埋Z38-shRNA转染进人鼻咽癌细胞HNE1与5-8F,用嘌呤霉素筛选出稳定的干扰细胞系,利用相对实时荧光定量的方法检测干扰效率;使用MTT、和平板克隆集落形成实验验证其对HNE1、5-8F细胞增殖的抑制作用;Transwell检测细胞迁移的能力;采用Western Blot检测干扰Z38表达对抑癌因子P~(53)、P~(21)表达水平的影响。结果表明,慢病毒干扰鼻咽癌细胞显著降低了Z38基因表达水平,并且干扰Z38基因表达后使细胞增殖能力、细胞集落形成能力降低,穿过Transwell小室的细胞数降低,抑癌因子P~(53)、P~(21)表达量上调。由此推测,Z38基因可能为鼻咽癌细胞的癌基因之一。     

ICBP90介导PI3K/AKT通路阻断剂LY294002抑制Jurkat T细胞增殖

目的:探讨磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路特异性抑制剂LY294002在JurkatT细胞增殖中的作用.方法:以急性T细胞白血病胞(Jurkat T 细胞)为模型,PD98059和阿霉素为阳性对照,在倒置显微镜下观察LY294002对Jurkat T细胞的集落形成的影响,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测LY294002处理后Jurkat T细胞的增殖,流式细胞术检测LY294002处理后Jurkat T细胞周期的变化,Western blotting方法检测Jurkat T细胞中ICBP90蛋白的表达以确定其与LY294002抑制Jurkat T细胞增殖的关系.结果:LY294002能够显著抑制Jurkat T细胞的集落形成和增殖,使Jurkat T细胞停滞于G2/M 期,导致Jurkat T细胞ICBP90蛋白的表达显著降低,LY294002与阿霉素联合用药可产生一定的协同效应. 结论:LY294002通过下调Jur-katT细胞ICBP90蛋白的表达,抑制Jurkat T细胞增殖.     

三氧化二砷联合Trolox对人早幼粒白血病细胞HL-60增殖和凋亡的影响

利用MTT法、台盼蓝排染法、Hoechst33258荧光染色法、瑞氏-姬姆萨染色法以及单细胞凝胶电泳法检测了三氧化二砷(As2O3)单独作用及联合Trolox后对人早幼粒白血病细胞HL-60的增殖抑制、凋亡诱导作用及其DNA损伤作用.结果表明,1μmol.L-1As2O3作用即可抑制HL-60细胞的增殖,联合100μmol.L-1Trolox对HL-60细胞增殖抑制作用较As2O3单独作用时明显增强.高浓度的As2O3(4μmol.L-1)作用24h可引起HL-60细胞的凋亡,与Trolox联合作用,在低浓度(1μmol.L-1)下即可引起细胞凋亡.联合100μmol.L-1Trolox可以显著增强As2O3引起的HL-60细胞的DNA损伤.这种损伤可能导致细胞周期阻滞,从而在生长曲线中体现出对HL-60细胞的增殖抑制作用.     

白花蛇舌草提取物体外抗肿瘤作用及机制研究

目的　研究中药白花蛇舌草提取物对Bel 7402细胞抗肿瘤作用及其作用机制.方法　采用MTT法和集落形成实验检测白花蛇舌草提取物对Bel 7402细胞生长的抑制作用;采用淋巴细胞转化实验检测白花蛇舌草提取物对小鼠脾脏T淋巴细胞增殖的刺激作用,并筛选出药物的安全剂量范围;采用透射电镜初步观察药物作用后Bel 7402细胞的形态变化.结果　1)MTT比色实验、集落形成实验的结果表明,白花蛇舌草提取物对Bel 7402细胞的生长具有明显的抑制作用,且这种作用是剂量依赖关系,IC50为1.6g/L;2)透射电镜观察表明,药物作用后的Bel 7402肿瘤细胞的体积变小,核分裂像显著减少,没有明显的凋亡现象;细胞核固缩,异染色质块状聚集浓染,线粒体变大变圆,基质变淡,线粒体嵴变短变少甚至消失,在极度肿胀时,线粒体转化为小空泡状结构,并有细胞膜破损现象.结论　1)白花蛇舌草提取物可能通过直接影响肿瘤细胞能量代谢,对Bel 7402细胞生长具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖关系;2)白花蛇舌草提取物具有促进小鼠脾淋巴细胞增殖的作用.     

Recombinant human PDCD5 protein enhances chemo-sensitivities of hematologic malignancies

PDCD5 is a novel apoptosis-related gene. Overexpression of PDCD5 facilitates apoptosis in various tumor cells. Here, we investigated the roles of recombinant human PDCD5 （rhPDCD5） protein in chemosensitivities of hematologic malignancies. The rhPDCD5 increased the in vitro cytotoxicity of daunorubicin （DNR）, adriamycin （ADM） and As203 in three hematologic tumor cell lines. In vivo studies showed that DNR combined with rhPDCD5 significantly suppressed tumor growth of U937 xenograft nude mice compared with DNR alone. In conclusion, rhPDCD5 combined with the chemotherapeutic drug has greater efficacy than chemotherapy alone, and rhPDCD5 is a very promising chemosensitizer.     

ERK_(1,2)抑制剂联合5-FU对B16细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察ERK_(1,2)抑制剂联合5-Fu对B16细胞增殖和凋亡的影响,并探讨作用机制.方法:用MTT法观察ERK_(1,2)抑制剂、5-FU和联合用药对细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪检测细胞凋亡率,用RT-PCR观察ERK_(1,2)抑制剂、5-Fu和联合用药对bcl-2和caspase-9的表达的影响.结果:ERK_(1,2)抑制剂联合5-Fu组在抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,均较对照组、单独用药组作用增强,并且下调bcl-2和上调easpase-9的表达.结论:ERK_(1,2)抑制剂联合5-Fu有协同抑制B16细胞增殖,促进凋亡的作用,其机制可能与诱导细胞凋亡,下调bcl-2和上调caspase-9的表达有关.     

海洋木栖真菌抗肿瘤活性及其营养条件的影响

对从厦门海沧及漳州浮宫的红树林生态区分离到的177株海洋木栖真菌用MTT法进行抗肿瘤活性的测定，获得具有抗肿瘤活性的菌株共44株，占总受试菌株的24．9％，其中对KB瘸株有抑制作用的有12株．对Raji瘤株有抑制作用的菌株有43株，对这两种肿瘤细胞均有抑制作用的菌株有11株．并且考察了其中6株海洋木栖真菌在纤维素、羧甲基纤维素钠、淀粉和蔗糖为碳源的生物量和抗肿瘤活性。结果表明海洋木栖真菌在不同营养条件下的菌体生物量及代谢产物的抗肿瘤活性均存在差异，部分菌株在纤维素为碳源时，有最高的生物量和抗肿瘤活性，PDB培养基不宜作为抗肿瘤活性测定或生产发酵的基质．     

长白山2种橐吾属植物乙醇提取物抗肿瘤作用研究

目的探讨复序橐吾和狭苞橐吾乙醇提取物体外抗肿瘤作用,为抗肿瘤药物研发以及多途径开发、利用长白山橐吾属植物资源提供参考依据.方法采用MTT法检测复序橐吾和狭苞橐吾乙醇提取物(FXEt OH、XBEt OH)在体外对2种肿瘤细胞(Hela,A549)增殖的抑制作用;应用流式细胞术检测细胞凋亡;以Vc做对照,采用邻二氮菲法、邻苯三酚自氧化法测定2种橐吾乙醇提取物对羟自由基()、超氧阴离子自由基(O-2·)的清除率.结果用不同质量浓度的2种橐吾乙醇提取物处理A549,Hela细胞48 h后,对Hela,A549细胞的抑制率均随样品浓度增加而增大;对的清除,FXEt OH,XBEt OH,Vc的IC50值分别为73.34,335.30,79.31μg/m L;对O-2·的清除,FXEt OH,XBEt OH,Vc IC50值分别为64.81,131.89,191.62μg/m L.结论复序橐吾和狭苞橐吾乙醇提物在体外均具有一定的抗肿瘤活性和较好的综合抗氧化能力,抗氧化可能是其抗肿瘤作用的机制之一.     

异博定与平阳霉素联合处理HEP—2细胞

本文研究了经异博定和平阳霉素单独或联合处理对体外培养HEP-2细胞增殖的影响,发现平阳霉素单独应用能抑制HEP-2细胞增殖,无毒剂量的异博定能增强平阳霉素对细胞增殖的抑制作用,使平阳霉素IG_(50)值下降。结果提示异博定能增强平阳霉素的抗癌活性。     

气味沙雷氏菌蛋白组分分离及其体外抗癌活性

用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ对经超声波处理的气味沙雷氏菌全菌体进行分离，切胶分别洗脱，经丙酮沉淀、脱盐处理后得到九个蛋白组分，将九个组分分别用Ｌ９２９，ＱＧＹ肿瘤细胞为靶细胞进行细胞毒性试验（ＭＴＴ），经初步鉴定从此且分具有抗癌细胞活性，组分Ｆ６相对分子质量范围为２８０００－３３０００，其抑制５０％细胞生长的蛋白浓度（ＩＣ５０）；对Ｌ９２９细胞为０．０４６ｍｇ／ｍｌ对ＱＧＹ细胞为０．０１２５０ｍｇ／ｍｌ，活     

海藻多糖的实验研究——Ⅱ.鼠尾藻和铜藻多糖对EC109细胞株的抑制和对cAMP-PDE的影响

比较了七种海藻多糖在体外抑制人食管癌细胞株(EC109)的生物活性.结果表明,浓度为100毫克/毫升的不同多糖作用48小时后均出现明显抑制,细胞大部分脱落.抑制率在75～95％之间;当浓度为50毫克/毫升作用后抑制率维持在30％以上;25毫克/毫升以下浓度的鼠尾藻多糖仍表现出显著的抑制效果. 各种多糖对组织环化腺苷酸磷酸二酯酶(cAMP-PDE)的体外抑制表明,唯有褐藻淀粉硫酸酯对兔脑cAMP-PDE活性有明显作用,抑制率达74.5％.     

SIOC-AA-005的抗肿瘤作用机制研究

探讨SIOC-AA-005抗肿瘤的作用机制.采用测定HT-29 细胞线粒体膜流动性、线粒体ATP含量、线粒体ATP酶活性及NADH-CoQ氧化还原酶活性、细胞质膜NADH氧化酶活性的方法,对其作用机制进行了深入探讨;SIOC-AA-005在10 nmol/L剂量下可明显降低线粒体膜的流动性,并使线粒体膜电位显著升高;在此浓度下,SIOC-AA-005还可使HT-29细胞内的ATP耗竭,ATP酶活性受到抑制,线粒体中能量产生过程受阻.在胞外反应体系中,SIOC-AA-005对NADH-CoQ氧化还原酶有强烈的抑制作用,对细胞质膜NADH氧化酶也具有较强的抑制作用.SIOC-AA-005可能是通过抑制线粒体NADH-CoQ氧化还原酶、抑制细胞质膜NADH氧化酶以及线粒体ATP酶活性,从而使线粒体膜流动性下降,膜电位升高,细胞内ATP耗竭,最终使肿瘤细胞死亡。     

Induction of cytotoxic T-cell responses in vivo in the absence of CD4 helper cells

Cytotoxic T lymphocytes (CTL) seem to provide the major line of defence against many viruses. CTL effector functions are mediated primarily by cells carrying the CD8 (Ly-2) antigen (CD8+ cells) and are triggered by interactions of the T-cell receptor with an antigenic complex, often termed 'self plus X', composed of viral determinants in association with class I molecules of the major histocompatibility complex (MHC). The mechanism(s) of induction of virus-specific CTL in vivo is poorly understood, but data from in vitro experiments suggest that their generation is strictly dependent on functions provided by CD4+ helper T cells (also referred to as L3T4+; or TH) that respond to antigens in the context of class II (Ia) MHC determinants. The prevailing opinion that induction of most functions of CD8+ cells requires help provided by CD4+ cells has recently been challenged by the observation that CD8+ cells alone can mediate a variety of responses to alloantigens in vitro and in vivo; however, the possibility that CTL to self plus X could be generated in vivo in the absence of TH cells has not been evaluated. We report here that C57BL/6J (B6) and AKR/J mice, when functionally depleted of CD4+ cells by in vivo treatment with the CD4+-specific rat monoclonal antibody GK1.5 (refs 8-14) responded to ectromelia virus infection by developing an optimal in vivo virus-specific CTL response, and subsequently recovered from the disease (mousepox) that was lethal for similarly infected nude mice (CD4-, CD8-).     

龚氏生物反应堆_创建与应用

龚氏重组成的生物反应堆(以下简称为GRB)是用转交法将克隆成的供体DNA转入受体创建而成的.基因表达表明这一生物反应堆能耐高剂量盐(NaCl3.2M)、抗生素(四环素Te100μg/ml和三甲氧苄二氨嘧啶Trim 50μg/ml)以及毒素(铃兰氨酸Azet 100μg/ml).这一生物反应堆的后代对盐、抗生素和毒素保持同样高的耐力.这表明这一生物反应堆的耐力能代代相传.在波士顿、旧金山.深圳和青岛的海水加Te(100μg/ml)的条件下,它能生长;在深圳或青岛海水加Te(200μg/ml),矿物质和碳源的条件下,也能迅速增殖(干物质1.6mg/ml/24hrs);蛋白质产量为0.59mg/ml,胞外多糖为0.26mg/ml.