植物原生质体培养与遗传操作

一、植物原生质体培养和细胞融合的一些进展 1960年,E.C.Cocking用酶法从高等植物细胞中分离得原生质体,为高效地从高等植物中分离原生质体打开了局面。迄今已能从几乎所有的植物薄壁细胞中分离得生活的原生质体,并对种类日渐增多的植物原生质体进行培养。据不完全统计,迄今世上已能使近百种植物由原生质体培养成植株。在我国,除早年已由胡萝卜、菸草和矮牵牛等原生质体再生植株外,近年对园艺、药用、经济植物和禾谷类植物的十个科约24种植物,用原生质体培养物再生了植     

皱叶莴苣_菜心_胡萝卜及其它几种植物原生质体分离方法的初步探索

近年来,原生质体的分离和培养已获得较大的突破,如烟草、胡萝卜、马铃薯、矮牵牛、石刁柏等多种植物已能从原生质体再生成完整的植株,有些作物已从原生质体诱导出愈伤组织,如水稻、玉米等.分离的原生质体,不但能诱导再生成完整植株,还能通过原生质体的融合或摄入外源核酸或细胞器,使具有不同类型遗传特性的原生质体形成杂交细胞,进而打破有性杂交不亲和性的界限,开辟植物遗传育种的新途径.由此可见,原生质体的制备和培养研究是植物体细胞杂交工作中的首要环节.本文对华南栽种的几种作物,初步探索了其原生质体分离的适合方法.     

木本植物原生质体培养与融合研究进展

为了全面了解模板植物原生质体培养和融合的现状，找出原生质体培养的规律，概述了原生质体的分离、培养及再生植株的条件和影响因素，介绍了国内外原生质体培养和融合及无性系变异筛选及遗传转化的研究动态。     

植物原生质体获得、培养条件及方法对其再生体系构建的影响

概述了植物原生质体再生体系中原生质体获得、培养条件及培养方法等关键技术环节,并且对完善植物原生质体再生体系及今后工作方向提出了建议.     

落叶松体细胞胚胎发生的研究进展

落叶松体细胞胚胎发生属于间接体细胞胚胎发生途径，主要包括三个步骤：胚性培养物诱导、继代与增殖及其体胚成熟和萌发。供体植物的基因型及其培养基的成分等是影响落叶松体细胞胚胎发生的重要因素。体细胞胚胎发生是一种有效的大规模克隆繁殖方法，并且在许多有重要经济价值的树种中都取得了很大进展，目前已从30多种松柏类植物诱导出体细胞胚。落叶松体细胞胚胎发生的应用大多数集中于胚性培养物的超低温保存、原生质体培养、转基因等技术，并对落叶松体细胞胚胎发生的研究趋势作了展望。     

小麦叶片愈伤组织的诱导及器官形成

应用组织培养研究植物的细胞分裂和分化,在生产及理论上均有重要意义,但在禾本科作物工作较少。近年来小麦方面曾用种子、胚、根、幼苗茎、茎节、穗轴(Rachis)等进行愈伤组织的诱导及器官形成的研究,但在叶片方面尚未见有成功的报导;同时在禾本科作物叶片原生质体培养工作中,至今尚难获得原生质体的持续分裂,因此有人怀疑禾本科叶片细胞的全能性。因此搞清这个问题很有必要。     

植物细胞工程的回顾与展望

植物细胞工程是以细胞培养和细胞操作为基础,按照人们的愿望,有计划地控制、改造和利用植物的技术体系以及发展这些技术,主要包括组织及细胞培养、花药花粉培养、原生质体培养、细胞融合与基因转化等方面的内容。目前植物细胞工程领域中,组织及细胞培养技术在快繁、脱毒、远缘杂交胚挽救等方面已广为应用。生产次生物质的植物细胞大量培养,有的已发展成产业。以花药培养为基础的单倍体育种不断发展,并取得了显著的成绩,重要农作物原生质体培养取得了较大的突破。细胞融合与基因转化取得了可喜的进展。我国在植物细胞     

制备原生质体的纤维素酶的研究

近年来随着组织培养工作日益开展,原生质体的分离、培养和体细胞杂交工作逐渐被人们重视。我国自1973年开始,中国科学院遗传研究所、北京植物研究所、上海植物生理研究所等单位相继开展研究;现在全国已有不少科研单位及高等学校在进行工作,并且取得相当进展。     

烟草原生质体的制备和分析

植物原生质体作为一个良好的实验系统,广泛应用于植物分子及细胞学研究中.本研究以烟草NC89叶片为材料,采用酶解法制备烟草原生质体,经台盼蓝染色鉴定活性,结果显示,分离纯化后的原生质体产量为(12.7±1.6)×106 g-1,表明该方法能成功地制备高产率、高活力的原生质体,建立了一种烟草原生质体的简易制备方法.     

植物原生质体分离和培养中几个问题的探讨

以植物根、茎、叶、叶柄作为原生质体的分离材料，经过分离收集在一定条件下才能培养获得完整的原生质体，原生质体培养基的渗透压应与酶液的渗透压相等．     

离体培养中黄槐叶片细胞脱分化的细胞学观察

黄槐叶片外植体接种于 MS+2,4-D 1 ppm+NAA 1 ppm+6-BA 2 ppm 培养基上,外植体的维管薄壁细胞及维管束鞘细胞先脱分化启动,而后栅栏组织细胞脱分化,进而形成愈伤组织.细胞脱分化启动时有两个明显特点:一是细胞质变浓,核相对变大,核仁明显;二是细胞开始积累淀粉.细胞脱分化过程中细胞分裂方式以无丝分裂为主,有丝分裂较少.通过观察无丝分裂的主要过程,可以认为它是典型的劈裂式无丝分裂.文中还对两种细胞分裂方式在愈伤组织形成中的意义进行了讨论.     

东北红豆杉细胞悬浮培养研究

东北红豆杉（Taxus cuspidata sieb et zucc)幼茎诱导的愈伤组织经多次继代培养，选择生长旺盛，紫杉醇含量高的愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织继代培养及细胞悬浮培养的条件进行了研究，确定了适合愈伤组织生长的条件以及影响细胞悬浮培养的主要因素。     

新疆大无核白葡萄原生质体培养

从新疆大无核白葡萄基叶愈伤组织游离的原生质体,用改良MS培养基培养,得到了再生细胞的高频率分裂。经比较试验发现,先用液体浅层培养后转入琼脂糖珠包埋培养最适于新疆大无核白葡萄愈伤组织原生质体培养。     

植物内源激素对原生质体培养的影响

以烟草试管苗叶，美味猕猴桃，毛花猕猴桃子叶愈伤组织以及玉米叶片为材料，进行了内源激素水平的测定和原生质体培养的研究。结果表明，高水平内源玉米素核苷含量和高ＺＲ与吲唑乙酸质量比有利于原生质体再生细胞的分裂；高水平内源脱落酸对再生细胞分裂有抑制作用，内源ＩＡＡ，ＺＲ和ＡＢＡ含量对原生质体培养的影响在不同种之间存在差异。     

半夏疏松愈伤组织诱导的研究

获得生长快速，疏松型愈伤组织是植物细胞悬浮培养的前提．用半夏叶片作外植体，采用单因子法，在添加不同浓度的2，4-D和BA的MS固体培养基上诱导半夏愈伤组织，比较愈伤组织的诱导率、性状和长势，其中当MS 3.0mg／L2，4-D 0．5mg／LBA时，愈伤组织诱导率和长势最好，为疏松愈伤组织系．结果表明：相同激素，不同浓度配比对愈伤组织诱导率、长势和发生的性状有明显的影响．     

Rice protoplasts isolated directly from mature-embryo-derived calli

Mature-embryo-derived calli of japonica rice (Oryza sativa L) Taipei 309 were used for replicated protoplast isolation experiments. Six out of nine callus lines produced protoplasts with satisfactory yield of 5.20×10⁶–8.96×10⁶ protoplasts/g FW (fresh weight). The remaining three callus lines initiated from seeds of cryopreserved-callus-derived plants had rooty calli, resulting in low yield of protoplasts and a large number of isolated banana-shape intact cells. Viability of protoplasts ranged 87.46%–94.15%. The average size of protoplasts was 207.49–379.04 μm² in different callus lines. Comparitive experiments were also carried out using both calli and suspension culture cells for protoplast isolation. The results demonstrated that protoplast isolation of calli was a substantially simplified and reliable method for preparing rice protoplasts. Jin Deming: born in Jan. 1959, Associated Professor     

水稻悬浮细胞的固体表面培养及植株再生

报道了水稻根部悬浮细胞固体表面培养的试验结果。由水稻种子根部细胞诱导的愈伤组织,经两次继代培养后进行液体悬浮培养。除培养基成分外,愈伤组织的分裂活性及生理状态,是影响悬浮细胞迅速增殖的重要因素之一.在固体培养基表面培养悬浮细胞,对细胞团的出现和增殖有显著效果.再生小愈伤组织在再分化前进行一次固体继代培养,对再生愈伤组织的增殖和分化有明显的促进作用.     

大蕉胚性培养物及其原生质体再生植株的染色体分析

 采用看护培养法对大蕉胚性细胞悬浮系（Embryogenic cell suspensions, ECS）来源的原生质体进行培养,并研究了不同品种的看护细胞对原生质体培养的影响,以及大蕉ECS及其原生质体再生植株的染色体数目。结果发现,采用贡蕉ECS作为看护细胞时,大蕉原生质体培养15 d后细胞分裂频率达到8.5%,培养30 d后细胞团形成率为0.35%;而以大蕉ECS作为看护细胞时,全部原生质体褐化,不能正常发育。染色体检测结果表明,大蕉ECS的染色体数目不稳定,除含有正常的三倍体染色体数目的细胞（2n=3x=33）外,还出现大量染色体数目异常的细胞。其中绝大部分细胞含有多倍和非整倍的染色体数目,仅14.5%的细胞含正常三倍体染色体数目;但通过ECS原生质体培养获得的再生植株具有正常的三倍体染色体数目（2n=3x=33）。     

西红花愈伤组织的诱导与花柱愈伤组织的继代、悬浮培养

以西红花的球茎,叶片和花柱为外植体诱导愈伤组织,叶片诱导培养形成白色膨大组织,球茎培养得到松散型白色愈伤组织,诱导球茎愈伤的培养基为5mg/L 6-BA 8mg/L NAA,在球茎愈伤组织中的紫外部分没有检测到西红花甙,西红花醛和西红花苦甙,在花柱愈伤组织中检测到西红花醛,适合于继代和悬浮培养,经悬浮培养后,在培养液中可检测到西红花醛和西红花苦甙,悬浮培养有利于次和一代谢的积。     

西洋参细胞培养的研究进展

利用西洋参悬浮细胞培养技术生产人参皂甙,在理论和生产上,都具有重要意义.概述了国内外在西洋参愈伤组织培养、细胞悬浮培养和发酵培养方面的研究进展情况.