青花菜组织培养再生体系的研究

采用不同培养基对青花菜（Brassica oleracea var.italica Plenk.)的子叶和下胚轴进行分化培养,结果表明：青花菜不同的外植体的组织培养效果不同,当采用MS基本培养基附加BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L和Sucrose5%的处理时下胚轴的不定芽分化频率最高,可达50%;而当培养基中添加BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L、Sucrose3%和AgNO34mg/L的子叶的不定芽分化频率最高,约为78%左右;同时在分化培养基中添加不同种类和浓度的激素、蔗糖和AgNO3均对其子叶不定芽的再生具有明显的效应。     

厚皮甜瓜黄河蜜植株再生研究

利用厚皮甜瓜黄河蜜3号子叶及下胚轴进行植株再生实验研究.结果表明:子叶不定芽分化率高于下胚轴,适合子叶不定芽分化的培养基为MS 6-BA1.5 mg/L NAA0.2 mg/L,分化率为60%,每个外植体平均分化芽数9.4个.适合下胚轴不定芽分化的培养基是MS 6-BA 1.75 mg/L NAA0.1 mg/L,分化率为9%,每个外植体平均分化芽数8.5个.对不定芽黑暗处理2天后用1/2 MS IAA0.2 mg/L诱导生根,生根率达91.12%,平均根数为12条.200 mg/L的NAA对无根苗处理20 min后移入1/2河沙 1/2蛭石基质中,1/2 MS营养液浇灌,试管外生根率为52%.     

不结球白菜"苏州青"胚轴培养及不定芽分化的研究

为确立以"苏州青"胚轴为遗传转化受体材料的转基因技术,探讨了胚轴叶龄、激素条件及抗生素处理对胚轴培养和不定芽分化的影响.结果表明:胚轴培养采用叶龄5～7d的材料可以获得高频分化效果;分化培养基以MS组成为基本培养基,同时添加细胞分裂素BA2.0mg/L和TDZ0.01mg/L,可以促进胚轴培养的出愈率及不定芽分化率;抗生素(Kan)浓度达15～20mg/L时,具有明显的筛选效果.     

南丰蜜橘组织培养及植株再生

以南丰蜜橘种子无菌苗的子叶、上胚轴、茎端、下胚轴为材料,在不同激素配比的MS基本培养基上进行外植体筛选和诱导不定芽分化、继代及生根培养,确定了诱导植株再生的最佳外植体和最适条件:(1)诱导不定芽分化最好外植体为上胚轴,不定芽分化率达90%;(2)继代培养中最适激素配比为MS+0.8 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.5 mg/LD-泛酸钙;(3)生根最适合培养基为MS/2+0.1 mg/L NAA.     

西瓜高效再生系统的研究

采用不同培养基对西瓜(Citrullus Vulgaris)的子叶、下胚轴和茎尖进行分化培养．结果表明：以MS为基本培养基，附加BA0．4mg/L处理时，3d苗龄的子叶的分化频率最高，可达95．5％，12d左右可见不定芽出现．西瓜对卡那霉素(Km)比较敏感，当培养基中添加20mg/L的Km即能完全抑制不定芽和不定根的分化．     

番茄组培苗的不同阶段对抗生素和PPT的抗性筛选试验

以番茄高效再生体系为基础,在番茄子叶和下胚轴的出愈、芽分化生长以及生根的各阶段培养基中,分别添加不同质量浓度的卡那霉素、新霉素和除草剂PPT三种选择性试剂,以确定番茄遗传转化所需的最佳筛选质量浓度.试验表明:T79和T151两个自交系对卡那霉素、新霉素、除草剂的抗性差异不大;卡那霉素与PPT在组培的各个阶段均对外植体有强烈的抑制作用,而新霉素对它们的抑制作用则不明显;在番茄组培的不同阶段、不同外植体对卡那霉素和PPT的反应存在较大差异,以下胚轴出愈对卡那霉素反应最敏感,子叶出愈和生根阶段对其反应迟钝;下胚轴出愈和芽分化对PPT的反应较敏感,子叶出愈对其反应较迟钝.因此建议在番茄遗传转化中,卡那霉素对子叶出愈和生根阶段的筛选质量浓度为100mg·L-1,对下胚轴出愈为50mg·L-1,对芽分化及其生长为70mg·L-1;而除草剂PPT对子叶出愈阶段的筛选质量浓度为1.0mg·L-1,对下胚轴出愈为0.5mg·L-1,对芽分化和生根阶段为0.75mg·L-1.     

六种甘蓝下胚轴和子叶无性系建立的研究

对6种甘蓝不同器官进行了组织培养和无性系建立的研究,成功诱导了紫甘蓝、皱叶甘蓝、羽衣甘蓝、抱子甘蓝、紫苤蓝和芥蓝的茎尖、下胚轴或子叶分化丛生不定芽.诱导6种甘蓝下胚轴和子叶分化的理想培养基是MS 6-BA(0.5~1 mg/L);诱导不定芽生根的理想培养基是MS IAA(0.2~0.5 mg/L);试管苗移栽、扦插的理想基质是炉灰渣.移栽的试管苗生长旺盛.     

番茄子叶下胚轴离体培养(简讯)

以前曾有番茄真叶培养成植株的报导,但还没有番茄子叶、下胚轴离体培养成植株并移植成活的报导。本试验以番茄子叶、下胚轴作外植体,培养在MS培养基上,附加不同浓度的细胞分裂素(KT,BA)和生长素(IAA、NAA),诱导出愈伤组织和丛生芽,进而分化形成植株,移栽盆内,生长良好,并结了果实。一、无菌苗的加速培养:1、划破种皮加速种子萌发:种子消毒后划破种皮再行接种,3—8天即可萌动。而不划破种皮的种子接种后需经8—10天才开始萌动。     

酸浆的组织培养与植株再生

以酸浆的叶片、叶柄、茎段、子叶、胚轴、胚根为外植体进行离体培养,结果表明:叶柄为酸浆不定芽分化的最佳外植体类型;IAA为诱导叶柄不定芽分化较适合的生长素类型;不定芽分化的最佳培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IAA;丛生芽增殖的最佳培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.05 mg/L IAA,增殖系数达5.0;最优的生根培养基为1/2 MS,生根率达91.7%.     

苜蓿不同品种愈伤组织诱导、分化和再生能力的比较研究

以新疆大叶、甘农1号、甘农3号和陇东4个苜蓿品种的下胚轴、子叶和子叶节为外植体,比较了不同苜蓿品种及外植体愈伤组织诱导、分化及再生能力的差异,研究了不同浓度及配比的植物生长调节物质对愈伤组织诱导和芽分化再生的影响。结果表明,4个苜蓿品种再生能力依次为新疆大叶>甘农3号>甘农1号>陇东苜蓿,下胚轴外植体在愈伤诱导培养基(MS 2mg/L2,4-D 0.2mg/LZT)上出愈率分别为94%,83%,71%和58%,胚性愈伤组织在分化培养基(MS 0.2mg/LZT 50mg/L谷氨酰胺)上分化率分别为15.8%,9.2%,7.1%和4.5%;下胚轴再生能力优于子叶节和子叶;丛生芽在生根培养基(1/2MS)上生成完整的根;各品种的再生苜蓿植株均成功移栽到土壤中,成活率100%。上述4个苜蓿品种分化再生能力的阶段性研究结果为今后通过基因工程方法改良苜蓿奠定了基础。     

唐古特白刺愈伤组织诱导及再生体系的研究

以唐古特白刺(Nitraria tangutorum Bobr.)子叶、下胚轴、根为外植体, 接种在不同浓度激素配比的培养基中, 研究愈伤组织的诱导及植株再生.结果表明: 子叶和下胚轴是诱导愈伤组织的良好外植体; 以MS补加2,4-D(0.5～1.0 mg·L-1)或6-BA(1.0～2.0 mg·L-1)+NAA(0.5～1.0 mg·L-1)可100%高频产生愈伤组织;在MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.5 mg·L-1培养基上,下胚轴可产生不定芽; 最佳增殖培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L-1+NAA(0.5～1.0 mg·L-1),增殖系数为5.75; 最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L-1,生根率达94.6 %.     

白术胚轴和胚根直接分化不定芽的再生体系

为了建立白术Atractylodes macrocephala Koidz.通过胚轴、胚根外植体直接分化不定芽的高效离体再生体系,研究了外植体类型、植物生长调节剂种类及质量浓度对不定芽直接分化的影响.研究结果表明,以白术无菌苗的胚轴、胚根为外植体,在分化培养基上可直接诱导不定芽分化,其中胚轴不定芽分化率最高可达91.18%,每个外植体产生芽的数量最高可达13个;诱导不定芽分化的最佳培养基为MS(Murashige and Skoog)+ TDZ(thidiazuron)1.5 mg/L+ NAA(naphthylacetic acid)0.2 mg/L.将分化的不定芽培养于附加IBA(indol 3-butiric acid)0.5 mg/L的1/2 MS培养基中诱导生根,生根率达66.66%以上.本研究为药用植物白术的工厂化育苗和脱病毒以及利用植物基因工程技术进行品质改良提供了有效的再生途径.     

特种工业用油料作物Lesquerella fendleri的愈伤组织诱导和植株再生

以Lesquerella fendleri下胚轴和子叶作为外植体,研究了不同的激素浓度和组合对于愈伤组织诱导和植株再生的影响．研究表明,L．fendleri下胚轴和子叶在许多激素组合的培养基上都能诱导出愈伤组织．当6-BA的浓度从0提高到1．0mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率也从35．14％提高到97．30％,进一步提高6-BA浓度会降低下胚轴的愈伤组织诱导频率;将NAA浓度从0提高到0．2mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率从70％提高到76．76％,进一步提高NAA浓度则降低下胚轴的愈伤组织诱导频率;将2,4-D的浓度从0提高到0．5mg．L^-1,下胚轴的愈伤组织诱导频率从64．29％提高到85．00％,进一步提高2,4-D浓度会降低下胚轴的愈伤组织诱导频率．当6-BA的浓度为0．5mg．L-时子叶的愈伤组织诱导频率最高,达到80．00％;提高NAA浓度可以提高子叶愈伤组织诱导频率,提高2,4-D浓度则会降低子叶的愈伤组织诱导频率．绝大多数愈伤组织在含有6-BA和NAA的MS培养基上都能够分化出许多不定芽．不定芽在MS基本培养基能够诱导生根,生根率在80％以上．     

光周期对白芥下胚轴和子叶形态发生的影响

以 15h/d的长光照和 10h/d的短光照预处理 7d的白芥幼苗下胚轴和子叶切段为材料 ,诱导愈伤组织和器官再生 .结果表明 ,外植体的切口处均有愈伤组织形成 ,但生理学下端切口处出愈率高于上端 .下胚轴生理下端有根的分化 ,芽仅出现在下胚轴的生理上端。子叶外植体中只有根的分化 ,长光照预处理与短光照相比 ,愈伤组织形成较早 ,生长较快 ,对外植体生理下端的诱导作用较明显 .长光照对器官发生的影响因外植体部位而异     

三碘苯甲酸和多效唑诱导黄瓜子叶节花分化临界时间的研究

7d龄黄瓜无菌苗完全切除全部下胚轴、1 / 2子叶和顶芽 ,取子叶节分别培养于诱芽和诱花培养基上 ,进行逐日更换培养基试验 .诱导营养芽培养基中培养 1～ 3 d,转入诱花培养基 ,成花率在 1 4%～ 40 % ;4d后再转入诱花培养基 ,成花率显著降低至 7%左右 .诱花培养基中培养 1～ 2 d后转入诱芽培养基 ,成花率仅 7%～1 4% ,培养 3 d或 3 d以上转入诱芽培养基 ,成花率显著升高至 2 7%以上 ,培养 6～ 7d后转入诱芽培养基 ,直接成花率则可达 60 % .结果表明三碘苯甲酸和多效唑诱导黄瓜子叶节花分化的临界时间是 3 d左右 .     

正交设计在欧洲菘蓝组织培养中的应用

以欧洲菘蓝下胚轴和子叶为外植体,应用正交设计方法,对愈伤组织的诱导和分化培养基进行了优化筛选.分析结果表明,6-BA和2,4-D的交互作用对下胚轴愈伤组织的诱导有显著影响,结合直观分析确定下胚轴的愈伤组织最佳诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg.L-1(后同) 2,4-D 0.5;6-BA和NAA的交互作用对子叶愈伤组织诱导有极显著影响,结合直观分析确定子叶最佳诱导培养基为MS 6-BA 0.5 NAA 0.2.在不同培养基对欧洲菘蓝愈伤组织分化能力的影响试验中,各种因子在所试浓度范围内的作用均不显著,有待进一步试验.根据直观分析我们认为MS 6-BA 2 NAA 1诱导的愈伤组织更有利于分化.不定芽在转移到MS NAA 0.5一个月后80%以上都能长出很好的根系.生根后的组培苗经过3天炼苗后移栽至花盆后80%以上可以存活.     

茎瘤芥(榨菜)子叶及带下胚轴茎段离体培养研究

以茎瘤芥永安小叶品种无菌苗子叶和带下胚轴茎段为材料,初步探索愈伤组织诱导、分化及再生植株生根培养.结果表明,子叶与叶柄的切口处极易产生愈伤组织,在MS+1.0mg·L-16-BA+0.2mg·L~(-1)NAA培养基中,愈伤组织分化率达到64%,其不定芽量最大;1/2MS+0.6mg·L~(-1)IBA培养基对不定根形成最为有利,生根率可达到96%.     

辣椒离体高效再生体系及其卡那霉素筛选体系的建立

选用辣椒(CapsicumannuumL.)4个品种的子叶以及下胚轴为外植体进行不定芽的诱导分化、生长及生根成苗试验.在组织培养的各个阶段的培养基中,附加不同种类及不同质量浓度的激素组合,观察测量外植体在各种培养基中的生长情况,从中筛选出最优的激素配比培养基,从而建立了辣椒的高效离体植株再生体系.在此基础上,将不同质量浓度梯度的卡那霉素(Kan)分别加入子叶、下胚轴愈伤组织诱导及不定芽分化阶段的培养基中,观测Kan对外植体生长的影响,以确定各阶段的最低致死质量浓度,用于辣椒的遗传转化研究.试验结果表明最佳的辣椒离体再生培养基为:芽分化阶段,MS+6-BA3.0mg·L-1+IAA0.1mg·L-1;不定芽伸长阶段,MS+GA32mg·L-1+6-BA0.5mg·L-1;诱导生根,MS+IAA1.0mg·L-1.合适的Kan质量浓度为:下胚轴出愈为80mg·L-1;子叶分化出不定芽为60mg·L-1.     

辣椒子叶和下胚轴离体培养再生

8个辣椒品种的子叶和下胚轴接种在附加不同激素的MS培养基上，经过芽诱导、芽伸长、生根、移栽入盆四个阶段，得到完整的再生植株。实验结果显示：6—8d的苗龄最佳，子叶的分化率高于下胚轴，培养基中添加AgNO3明显促进外植体的分化，GA3是芽伸长的关键因子，IBA的生根效果要好于无激素MS培养基．通过这一过程，建立起一个基于最佳激素组合的高效植株再生体系．     

香水草组织培养植株再生系统建立

香水草(Heliotropium arborescens)无菌实生苗下胚轴和子叶接种于含1.0mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)或2.0mg/L 6-苄氨酸嘌呤(BA)的MS培养基上能脱分化形成白色松散状或绿色致密状愈伤组织,但愈伤组织诱导率较低,分别为8.3%和26.5%.愈伤组织培养于含2.0mg/L NAA和0.5mg/L BA的MS培养上建立了具再生能力的愈伤组织继代培养方法.愈伤组织转移至含2.0mg/L BA和含0.1mg/L NAA的MS培养基上建立了不定芽分化再生方法.不定芽分化率最高91.3%.不定芽长大后,转移至含1.0mg/L IBA的减半MS培养基中不定芽生根率可达87.6%.