苯酚降解菌的富集、分离与鉴定

 用苯酚作为唯一碳源富集培养化工厂、废水处理厂、造纸废水样品,从中分离得到4株具有苯酚降解能力的菌株.用编码苯酚羟化酶大亚基基因的保守序列设计特异引物进行检测,共有3株菌扩增出相应的产物.对其中降解能力最强的1株菌的16SrDNA序列进行系统发育分析,确定其为假单胞菌.与以前方法相比,本方法可检测到目前几乎所有的苯酚羟化酶基因,从而实现快速、准确、方便地从苯酚污染的环境中检测苯酚降解菌.     

两株苯酚降解菌的降解特性及对比分析

采用驯化的方法从活性污泥中筛选分离得到两株高效苯酚降解菌XTT-1,XTT-3,均能在含苯酚的培养基中生长,初步鉴定均为假单胞菌属(Pseudomonassp.).研究了两株菌降解苯酚的最适条件;XTT-3菌经48 h培养可完全降解500 mg.L-1苯酚,而XTT-1菌需要64 h;两株菌的苯酚耐受能力均不超过1000 mg.L-1苯酚;NaCl含量2.0%以上对两株菌的苯酚降解率有不同程度的抑制作用.     

2株石油污染降解菌的分离与鉴定

分别从大庆油田和新疆油田油井旁土壤中分离筛选得到2株石油污染降解主体菌株,并对他们从形态结构、16SrDNA序列分析及生理生化特征进行了初步的菌种分类鉴定.结果表明菌株DQ-1属于假单胞菌属、T6190属于迪茨氏菌属.菌株T6190可以降解脂肪族烃类,3d降解率达到40.7%;而DQ-1可以降解芳香族烃类,3d降解率达到83.07%.     

污染环境中假单胞菌产鼠李糖脂的初步研究

从受重油和焦化废水污染的水及土壤中分离出产鼠李糖脂的假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）１２株,发现其菌群分布、糖脂产量与特定污染环境有一定相关性,产糖脂量较高的假单胞菌群是该污染环境中的优势降解菌．     

一株苯胺降解菌的筛选及其特性研究

通过驯化培养,从废水中分离出一株高效苯胺降解菌6#菌株.经鉴定,该菌为假单胞菌属(Pseudomonas),可在苯胺浓度低于5000×10-3g/mL的基础培养基上生长.6#菌株利用苯胺的最适温度为30℃,最适pH为7.0,该菌株还可以利用对氨基苯甲酸,但不能利用其他取代类苯胺化合物,该菌株在模拟工业废水中亦有较强的降解作用.     

降解苯酚细菌的分离及其生理特性研究

从工业废水中分离到两株可以降解苯酚的细菌，初步确定为假单胞菌属(Pseudomonas)和芽孢杆菌属(Bacillus),分别命名为C1和C2，菌株C1和C2都能在以苯酚为唯一碳源的无机盐培养基中生长，并且确立了它们的最适培养条件。在苯酚浓度适宜的条件下，不同氮源对于苯酚的降解效率有一定的影响．     

对硝基苯酚降解菌Pseudomonas sp．HY1的分离与活性分析

通过驯化富集,从受污染的土壤中分离出一株降解对硝基苯酚（p-nitrophenol,PNP）的细菌．16SrDNA序列分析鉴定该菌为恶臭假单胞菌Pseudomonas sp．HY1．在有氧,pH7和30℃条件下,该菌能利用PNP为碳源和能源生长并将中等浓度（100mg／L）的PNP快速彻底的降解,高浓度（300mg／L）PNP条件下未检测到菌的生长和降解活性．该菌在15～40℃和pH值5～10的条件下具有降解PNP活性,其中碱性条件（pH8～10）和30℃时活性最高．     

高效藻毒素降解菌的筛选及其降解藻毒素的效能研究

从藻毒素污染的水库底泥中富集分离出7株高效藻毒素降解菌,结合7株菌的生长曲线研究,确定出菌株M-5、M-6和M-7三株菌为高效菌,并对它们的生理生化特性和降解藻毒素效能进行了研究.结果表明,M-5和M-6为假单胞菌、M-7为气单胞菌.各单一菌株24 h降解藻毒素效能为63%~84%,延长作用时间至4 d,可以将藻毒素降解率提高到90%以上,将3株菌混合作为混合菌协同作用藻毒素,可缩短作用时间,3 d将藻毒素基本降解完全.     

苯酚降解菌株GXY-1分离鉴定、降解及其粗酶特性研究

从处理石化废水的活性污泥样品中分离得到一株能以苯酚为唯一碳源生长的菌株GXY-1.通过形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析,初步鉴定菌株GXY-1属于布鲁氏杆菌属(Brucella sp.).实验结果表明,菌株GXY-1对土霉素和四环素不敏感,其降解苯酚的最佳条件为温度30℃,pH7.0.在最佳条件下,GXY-1对600mg/L苯酚的降解率在60h时达99%以上.同时GXY-1还可以利用苯胺、萘、氯苯等芳香化合物为唯一碳源生长.测定了降解途径中相关酶的活性,表明菌株GXY-1是通过邻苯二酚1,2双加氧酶催化开环来降解苯酚.该菌株粗酶的最适反应pH为7.8,最适反应温度为40℃.     

苯酚降解菌特性的初步研究

对太原杨家堡污水处理厂的污泥进行富集，驯化筛选到一株能高效降解苯酚的紫色非硫光合细菌沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）L3，该菌株可耐受500mg／L左右的苯酚浓度，通过实验得出了该菌降解苯酚的最适条件为pH7．0、温度30℃，适量投加C02可以加快该菌对苯酚的降解。     

酚降解菌的筛选及含酚废水处理研究

从土壤中分离得到可在含酚培养基上生长的细菌。通过菌种驯化,筛选出耐高浓度酚的菌株,在实验室条件下,进行对含酚废水的处理,其中部分菌株可分别在12～24小时内将1000毫克/升的苯酚完全去除。基质不同对酶活力大小有影响,在以苯酚为唯一碳源的基质中,多酚氧化酶活力最高。     

Cupriavidus metallidurans CH34中2个苯酚降解基因簇的筛选与功能鉴定

Cupriavidus metallidurans(C.metallidurans)CH34是一种重金属耐受性细菌,能在以苯酚、甲苯酚、苯甲酸、苯胺等芳香族化合物为唯一碳源和能源的培养基中生长,其基因组中含有2个苯酚降解基因簇.以载体pIndigo-BAC 5构建C.metallidurans CH34的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库,获得约3万个克隆,平均插入片段大小为30 kb,插入频率为98%,推测该文库覆盖CH34基因组约1 240倍.用PCR筛选文库中的3 000个单克隆,共获得9个阳性克隆,其中5个克隆含有长基因簇,4个含有短基因簇,并从中得到含有全长苯酚降解基因簇的克隆.利用以苯酚为唯一碳源的无机盐培养基,研究2个基因簇在大肠杆菌中的表达情况.结果显示,两个基因簇均表现出了苯酚降解能力,短簇的降酚能力要优于长簇.     

SS6菌对菲的降解和发光菌对菲及其降解产物毒性的反应

研究了海洋微生物SS6在无机盐培养基中对多环芳烃菲的降解和解毒作用和发光细菌对菲及其降解产物毒性的反应．结果表明：SS6菌能利用菲作为唯一的碳源和能源生长；培养液中有酸性代谢产物产生，并且形成积累；发光细菌毒性测试技术可以有效地检测菲及其微生物降解中间产物的相对毒性；母体菲的毒性远大于其水杨酸代谢途径的中间产物水杨酸和儿茶酚及邻苯二甲酸代谢途径的中间产物邻苯二甲酸毒性，并且邻苯二甲酸代谢途径的解毒效果优于水杨酸代谢途径；菲降解过程中培养液萃取物的毒性逐渐降低，但上清液的毒性先出现下降后又呈增大趋势；含菲培养液的毒性变化是培养液中存在的中间产物和其它组成成分及pH值变化的综合结果．     

海洋细菌11211的生长条件及其几丁质酶研究

从南海海水中分离到产几丁质酶的弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｓｐ．）,研究了菌株１１２１１的生长条件和产酶条件。１１２１１菌生长需要Ｎａ＾＋,海水的其他成分对菌生长也有影响。胶体几丁质可诱导几丁质酶产生。在几丁质培养基中１１２１１菌的产酶高峰为生长的第７天。经硫酸铵沉淀,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００、ＤＥＡＥ－纤维素及几丁质柱层析,酶被纯化了１８倍。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析,酶的相对分子质量约为３００００。该     

产微球茎菌琼胶酶基因的克隆及生物信息学分析

以琼脂为唯一碳源的培养基分离出一株产琼胶酶的海洋菌株AG1,16S rRNA基因序列分析显示,该菌株为产微球茎菌（Microbulbifer sp.）。以菌株AG1的基因组为模板,使用琼胶酶特异性引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆至pMD18-T载体后进行测序。结果显示,克隆基因的大小为1302 bp,预测编码含有433个氨基酸残基的蛋白质。对该蛋白质进行生物信息学分析,结果表明,该蛋白质序列与来自耐热微泡菌（Microbulbifer thermotolerans）的琼胶酶氨基酸序列相似性为100%,预测本研究克隆的基因编码琼胶酶。该琼胶酶的理论分子质量大小为48.2 ku,理论等电点为5.42。采用同源建模法建立Microbulbifer sp.AG1琼胶酶的三维结构,富含β-折叠。     

一株堆肥高效解磷菌的筛选、鉴定及其溶磷特性

磷是植物必需的营养元素之一,但大多数耕地土壤中磷素易与Fe、Ca和Al等结合成无效态磷,植物难以直接吸收利用。解磷微生物可活化难溶性磷,将其接种于堆肥,有助于提高堆肥产品磷素植物可利用程度。从鸡粪好氧堆肥中筛选获得高效解磷细菌,为生物强化富磷堆肥的制备提供菌种。利用NBRIY培养基初筛获得解磷菌,利用PVK培养基复筛获得高效解磷菌株,对其进行16S rDNA分子生物学鉴定,并研究不同碳源、氮源、初始pH、难溶性磷种类、难溶性磷添加量、可溶性磷浓度对菌株溶磷能力的影响。初筛获得7株解磷细菌,分别命名为PSB1~PSB7;复筛后,PSB6的溶磷量最大(126.37 mg/L);其余菌株的溶磷量在50.12~109.56 mg/L之间。PSB6经16S rDNA初步鉴定为Bacillus sp.(MW513386)。PSB6最适碳源为葡萄糖、最适N源为硫酸铵、最适生长初始pH为7.0,不同难溶性磷中,PSB6对磷酸三钙溶解效果最好,溶磷量为126.37 mg/L。当磷酸三钙添加量为2.5 g/L时,具有最大溶磷量170.5 mg/L。当培养液初始可溶性磷浓度为1 mmol/L,PSB6的溶磷量达到200.2 mg/L;培养液初始可溶性磷浓度超过10 mmol/L时,菌株不发挥解磷效果。解磷菌PSB6对磷酸三钙具有良好的溶磷能力,可应用于生物强化富磷堆肥的制备。     

Plasmid-related anaerobic autotrophy of the novel archaebacterium Sulfolobus ambivalens

Three different species of the genus Sulfolobus, S. acidocaldarius, S. solfataricus (= Caldariella) and S. brierleyi, have been distinguished by the conditions required for optimal growth, by the component patterns of their DNA-dependent RNA polymerases and by DNA sequence data. Many isolates of these species are able to grow chemolithoautotrophically using CO2 as the sole carbon source and the oxidation of S(0) with O2 yielding sulphuric acid, as the energy source, though a few others grow only heterotrophically. We show here that a strain of a novel Sulfolobus species, S. ambivalens, is alternatively able to live by an anaerobic mode of chemolithoautotrophy, also using CO2 as the sole carbon source, but using reduction of S(0) with H2, yielding H2S as the energy source. This mode of growth is correlated with the amplification of a plasmid, pSL10.