海洋弧菌NTi产琼胶酶的发酵条件优化

以琼胶酶活力为主要指标,采用单因素与响应面相结合的方法,对降解琼胶的海洋弧菌NTi(Vibrio natriegens NTi)发酵产琼胶酶的摇瓶发酵培养基和发酵条件进行优化。结果表明,α-乳糖对菌株产酶具有较强的抑制作用,NH+4不利于菌株生长和产酶。培养基分别以3. 3 g/L琼脂、6. 33 g/L酵母膏为唯一碳源及氮源,添加20 g/L的Na Cl,发酵海洋弧菌V. natriegens NTi产琼胶酶的效果最佳。发酵过程中的p H值、接种量、装液量、温度、发酵时间最优值分别为6. 5、2%、32 m L、27℃和24 h。优化后,该菌产琼胶酶活力达到2. 81 U/m L,比优化前增加了230%。     

不同益生菌固态发酵豆粕的工艺研究

针对传统发酵豆粕的品质与豆粕的利用率低等缺陷,用枯草芽孢杆菌、酿酒酵母菌、乳酸菌(保加利亚乳杆菌与嗜热链球菌以1∶1比例混合)为发酵菌株,进行单因素发酵豆粕的试验。以发酵温度、料水比、接种量及发酵时间为单因素,经优化试验得到,枯草芽孢杆菌发酵豆粕的最佳条件:发酵温度为37℃,料水比(m/V)为1∶1,接种量为5%,发酵时间为48 h,此时发酵豆粕粗蛋白质量分数增幅最大为62.3%,呈偏碱性的酱香味;酿酒酵母菌优化后的发酵工艺条件:发酵温度为31℃,料水比(m/V)为1∶1,接种量为5%,发酵时间为60 h,此时发酵豆粕粗蛋白质量分数为53.8%,具有浓郁的酵母香;乳酸菌发酵豆粕的最佳条件:发酵温度为37℃,料水比(m/V)为1∶1.2,接种量为7%,发酵时间为72 h,此时发酵豆粕粗蛋白质量分数为48.6%,有酸香味。     

利用高效液相色谱检测发酵液中S-腺苷蛋氨酸含量

建立了利用Waters2695高效液相色谱测定毕赤酵母发酵液中S-腺苷蛋氨酸(S-adenosylmethi-onine,SAM)含量的方法,对HPLC-UV法检测SAM含量的色谱条件进行优化,最佳色谱条件如下:All-tima C18柱,150 mm×4.6 mm,5μm,流动相为V(0.01 mmol/L甲酸铵)∶V(甲醇)=97∶3,流速0.6 mL/min,柱温30℃,检测波长260 nm.优化后的色谱分离条件可使样品中的SAM与杂质达到较佳分离,稳定性、精密度及重复性都较好,其RSD均小于1.5%.利用SAM标品制作标准曲线Y=32408606.0721 X+130181.2824,线性范围为0.012～1.2 g/L,R2达到0.9998,平均回收率为100.027%～102.533%.此方法可有效地检测发醇液中S-腺苷蛋氨酸含量.     

海洋细菌NTa发酵产琼胶酶条件的初步优化

利用选择性培养基从厦门红树林泥土样品中分离得到一株具有较高琼胶酶活力的海洋细菌NTa,通过16S rRNA分析,将该菌株归属为Stenotrophomonas sp.NTa.对该菌株发酵产琼胶酶的条件进行初步优化,结果表明:菌株NTa产琼胶酶的最佳碳源是琼脂,氮源是酵母浸膏,NaCl的质量分数为5%,在28 ℃发酵培养40 h,发酵液的酶活力达到1.98 U/mL,比优化前提高了37.35%.     

酶解龙须菜粗多糖硫酸基工艺优化

为探索重组芳香基硫酸酯酶水解龙须菜粗多糖的动态过程变化,同时为重组酶的应用提供基础数据,以p ET-28a为表达载体,在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达获得能特异性水解硫酸酯的重组芳香基硫酸酯酶.并利用重组芳香基硫酸酯酶水解海藻龙须菜中的硫酸基团,以硫酸基含量和硫酸基脱除率为指标,利用单因素试验研究各因素对龙须菜粗多糖硫酸基水解过程的影响.试验确定了脱除龙须菜粗多糖硫酸基团的工艺条件,结果表明,重组芳香基硫酸酯酶水解龙须菜粗多糖的适宜工艺条件为:水解温度40℃,p H值7.0,初始底物5 g/L,加酶量108.14 U,振荡速率120 times/min,酶解反应2 h,在此工艺条件下脱除了78.4%的硫酸基团,凝胶强度提高2.1倍,凝固温度、融化温度分别为38.4℃和91.3℃.重组芳香基硫酸酯酶在酶解过程中水解龙须菜粗多糖中硫酸酯表现出较高的活力.     

酶法替代碱法提取琼脂生产技术开发

为了减少琼脂提取过程中的碱用量,开发琼脂的绿色清洁生产工艺,以凝胶强度为考察指标,通过单因素试验对酶法替代碱法提取琼脂的工艺进行了优化。结果表明,酶法辅助琼脂提取工艺最优条件为:碱质量分数3%,处理时间2.5 h,处理温度45℃,pH值7.0,加酶量4 U/mL;复合酶法工艺最佳提取条件为:酶处理温度50℃,处理时间2 h,纤维素酶单位活力14 U/mL,琼脂硫酸酯酶单位活力26.6 U/mL,料水比(m/V)为1∶18。在此基础上,分别开展了酶法辅助和复合酶法2种工艺的小试优化结果的验证与200 L放大试验。其中,小试工艺验证结果表明,酶法辅助和复合酶法2种提取工艺下,琼脂的凝胶强度分别为831.9 g/cm~2和377.2 g/cm~2,得率分别为18.9%和18.3%;200 L中试放大试验结果显示,2种工艺琼脂的凝胶强度分别为1001.3 g/cm~2和369.6 g/cm~2。说明,2种工艺均具有良好的稳定性和重复性。     

重组褐藻胶裂解酶酶解工艺的优化及产物分析

为探索假交替单胞菌（Pseudomonas syringae）重组褐藻胶裂解酶降解褐藻胶的动态过程变化,采用DNS法和苯酚－硫酸法分别测定体系还原糖和总糖,根据二者比例,得出酶解产物随时间变化的平均聚合度,从而研究各因素对褐藻胶降解过程的影响,确定褐藻胶酶解工艺条件。结果表明,重组褐藻胶裂解酶降解褐藻胶的适宜工艺条件为:水解温度25 ℃,pH 7.5,初始底物质量浓度7 g/L,加酶量0.48 U,静置条件下酶解反应210 min。在此工艺条件下,产生的还原糖的质量浓度达0.878 g/L,平均聚合度为3。酶解终产物的质谱鉴定结果显示为单糖、二糖和四糖。     

用Fe3+选择性分离虾青素高产菌株的研究

用Fe^3＋作为筛选剂选择性分离虾青素高产菌株,实验结果表明,海洋红酵母的菌落形成率随平板培养基中Fe^3＋浓度的增加而降低,当Fe^3＋浓度为5 mmol/L时,海洋红酵母的菌落形成率降至0;海洋红酵母的虾青素体积产率和细胞产率随摇瓶培养基中Fe^3＋浓度的增加而降低;在含有5 mmol/L Fe^3＋的平板培养基中分离甲基磺酸乙酯（EMS）诱变得到的海洋红酵母,大约有31%的菌落虾青素体积产率高于出发菌株.在海洋红酵母的分离培养基中加入较高浓度的Fe^3＋可以淘汰低产突变株及野生型菌株,可以提高海洋红酵母虾青素高产菌株的筛选效率.     

外语教学定量研究中的稳健性设计方法

定量研究方法在我国外语教学和研究领域的应用日益广泛,但是,大部分外语教学研究人员还未注意到定量研究结果的不确定性可能对外语教学及学习策略产生的较大负面影响。针对这种情况,改变原有统计分析中一味追求最优结果的思路,在外语教学定量研究中引入稳健性设计方法,利用统计方法寻找最稳定的结果,通过分析各种因素的离散程度对结果的影响,从中找到影响最小的控制条件,使结果的稳定性大大提高。在外语教学定量研究中引入稳健性设计,可以有效提高研究结果的通用性和再现性,具有良好的理论价值和实践意义。     

江蓠琼脂碱法提取工艺模型的建立及应用

为探究江蓠(Gracilaria japonica)琼脂生产过程中碱处理工艺对碱消耗量及琼脂质量的影响,采用模型拟合优化琼脂提取碱处理工艺参数,以降低碱消耗量;研究不同碱处理工艺条件下制备的江蓠琼脂性质,测定出胶率、碱消耗量和江蓠中吸收碱量,建立碱处理工艺对琼脂质量和碱消耗量影响的关系模型.运用模型优化得到3个最佳碱处...