水貂源大肠杆菌对9种抗菌药物敏感性试验

为了解水貂源大肠杆菌对抗菌药物的敏感性,指导兽医临床有效防治大肠杆菌病.采集山东省某水貂养殖场水貂粪便;采用常规的分离、鉴定方法获得8株大肠杆菌菌株;采用K-B纸片扩散法检测菌株对9种抗菌药物的药物敏感性.结果表明,菌株对9种药物呈不同水平的耐药性(耐药率范围25.0~100.0%),对妥布霉素、阿米卡星100%耐药;对粘杆菌素、氟喹诺酮类呈较低耐药率;62.5%的菌株对所检测的8种药物耐药.以上结果说明了本次检测的水貂源大肠杆菌耐药性非常严重,临床上应根据药敏试验结果,合理和谨慎地使用抗菌药物以控制水貂大肠杆菌病.     

肺炎克雷伯菌的临床分布及耐药性特点

了解肺炎克雷伯菌的临床分布及对常用抗菌药物的敏感性和耐药性。收集酒泉市第二人民医院2017-2019年的临床分离菌株,采用自动化仪器法或纸片扩散法(K-B法)进行细菌药物敏感性试验,按照美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)2017年版标准判断结果,使用WHONET5.6软件进行数据统计分析。共分离细菌1103株,主要来自痰标本,1103株肺炎克雷伯菌对氨苄西林/舒巴坦、头孢唑林、头孢呋辛、复方新诺明的耐药率稍高,在11.6%-16.1%。对其余抗菌药物的耐药率均较低在10%以下,未发现亚胺培南、美罗培南耐药菌株。肺炎克雷伯菌的耐药性普遍较低,应加强抗菌药物合理应用及院内感染防控措施。     

中华鳖水泡病病原病理学研究

１９９３年８月信阳师院生物系特种动物养殖研究所的试验鳖场孵化出一批小鳖。同年１０月有一只鳖得了一种新的疾病，病鳖颈根部和右下肢基部各有一大水泡，暂名“水泡病”。本文对其分离菌进行了研究，鉴定为嗜水气单胞菌。中华鳖水泡病的致病机理，可能与病原菌的毒力与传染途径有关，而鳖的抗病能力是能否引起该病的关键，外界环境因素是引起该病的诱因。     

中华鳖抗嗜水气单胞菌亚单位疫苗的制备与应用

水体条件致病菌嗜水气单胞菌对中华鳖养殖业的危害巨大.为预防嗜水气单胞菌的感染,提高中华鳖免疫抵抗力,研究开发嗜水气单胞菌疫苗是一种有效的方法.利用PCR手段克隆获得嗜水气单胞菌DnaK和DnaJ两个基因,并将两基因重组到大肠杆菌表达载体上,转化至大肠杆菌表达菌株,纯化获得了重组蛋白rDnaKAh和rDnaJAh.将两个重组蛋白分别与弗氏佐剂充分混合制备成疫苗,腹腔注射中华鳖幼鳖,加强免疫一次后,用已分离获得的致病菌株感染中华鳖幼鳖,实验结果表明rDnaK具有81.8％的免疫保护效应,而rDnaJ仅具有31.8％的免疫保护效应.     

中华鳖穿孔病的血液病理研究

中华鳖穿孔病由细菌感染引起,其主要症状是体壁溃烂穿孔。试验分别测定了患穿孔病中华鳖和健康中华鳖血液的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、球蛋白、白蛋白、肌酣、尿素氮、葡萄糖、钠、氯、钙等10项指标。测试结果表明,病鳖血液谷草转氨酶、葡萄糖、钙的含量都非常显著高于健康鳖,而尿素氮、钠、氯都显著低于健康鳖。这些血液特性变化表明,病鳖的肝、肾、心等发生了严重的病变,揭示了中华鳖穿孔病的血液病理变化规律。     

免疫防治在鳖养殖中的应用

从病鳖分离得到四株致病菌菌株,经鉴定为嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）,豚鼠气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｃａｖｉａｅ）,温和气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｓｏｂｒｉｏ）．药敏试验结果：氟嗪酸、环丙沙星、新霉素对四菌株有较强抑菌作用。制备四联菌苗对鳖进行免疫接种,可产生较好的防治结果,卵黄抗体治疗病鳖,治愈率为３７．１％。     

3株宠物犬大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

为分析宠物犬源大肠杆菌对常用抗菌药物的敏感性,从洛阳市宠物医院采集宠物犬肛门拭子样品,获得了3株犬大肠杆菌。通过麦康凯琼脂培养基和伊红美蓝琼脂选择性培养基,对菌株进行了分离培养。采用煮沸法提取大肠杆菌DNA,采用PCR方法扩增大肠杆菌16S r DNA。用琼脂糖凝胶电泳检测了PCR产物大小,并对扩增产物进行了测序,用BLAST软件进行同源性对比分析,最终鉴定为大肠杆菌。选择20种抗菌药物,采用纸片扩散法进行药敏试验。试验结果表明:宠物犬源大肠杆菌对氨苄西林、庆大霉素、阿莫西林、环丙氟哌酸等16种抗菌药物出现不同程度的耐药性,且耐药谱广,出现了多重耐药。     

网箱养殖大黄鱼弧菌病研究

1999年夏季,福建省宁德北斗都网箱养殖大黄鱼发生大面积死亡,从病鱼体内分离出两株细菌：ND-01和ND-02,人工感染试验证实这两株菌皆为大黄鱼的病原菌,经鉴定,菌株ND-01为溶藻弧菌,菌株ND-02为副溶血弧菌,51种药物的药敏试验表明;青霉素G、万古霉素等19种药物对ND-01没有抗菌作用,青霉素G、头孢拉定等10种药物对ND-02没有抗菌作用;ND-01对氯霉素、氟派酸等9种药物敏感,而ND-02则对氟派酸、氟嗪酸等10种药物敏感。     

皮肤感染患者病原菌种类和耐药性特点分析

目的探讨皮肤科患者感染病原菌种类和耐药性特点.方法从收治的皮肤感染患者伤口引流液或脓性分泌物标本中分离出病原菌165株,采用全自动微生物鉴定及药敏分析仪将菌株鉴定到种;采用CLSI推荐的KB法琼脂扩散法检测菌株的耐药性.结果检出革兰氏阳性菌84株,占50.91%;革兰氏阴性杆菌70株,占42.42%;真菌11株,占6.67%;检出率前三位的菌株为金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌.革兰氏阳性球菌对替考拉宁、万古霉素不存在耐药性;A群链球菌对皮肤科常用抗菌药物的敏感性较高.革兰氏阳性球菌对糖肽类抗菌药不存在耐药性;A群链球菌对皮肤科常用抗菌药物的敏感性较高.分离出耐甲基西林金黄色葡萄球菌51株,占30.91%;分离出耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌48株,占29.09%.结论近5 a本院皮肤科患者感染病原菌种类以革兰氏阳性球菌为主,耐亚胺培南铜绿假单胞菌上升趋势较为明显,特殊病原菌亦有较高的检出率.皮肤科应重视感染性标本的病原学检查,为合理使用抗菌药物提供参考.     

鳖用四价细菌灭活疫苗免疫防治应用研究

将分离自中华鳖主要细菌性疾病如肠道出血性败血症、鳖穿孔病（疖疮病）、红脖子红底板病、鳖腐皮病的4株不同血清型的温和气单胞菌,用3.5%福尔马林溶液处理24 h灭活并添加蜂胶作为佐剂,制成总含菌量为6×109CFU/mL的四价菌苗。同时制备了针对中华鳖IgM的单克隆抗体3H3,并建立了由单抗3H3介导的三抗体夹心ELISA（TAS-ELISA）方法对四价菌苗的免疫效果进行评价。将研制的四价菌苗小批量免疫健康中华鳖,分别于免疫前及免疫后的100 d内,随机采集3只免疫组和1只对照组的中华鳖血清,利用所建立的TAS-ELISA测定血清中抗体ELISA效价。将免疫50 d的中华鳖分成4组,分别用4株病原菌以5LD5（09×106CFU/mL）进行攻毒,并用上述制备的四价疫苗进行免疫预防试验。结果显示：当中华鳖免疫后40 d,血清中抗体ELISA效价最高,为1：（1.28×104）;中华鳖免疫后50 d,其免疫保护率均达到100%,同时对照组死亡率为100%。结果表明：以蜂胶为佐剂的鳖用四价细菌灭活疫苗所开展的免疫预防试验取得了良好的免疫效果,能有效地预防养殖鳖类主要病害的发生。     

鳖"腹水病"的致病菌研究

自１９９５年以来,河南一些养殖场的幼、成鳖患发一种“腹水病”。从濒死病鳖分别获得两株细菌感下实．二者均为致病菌。根据细菌的形态结构、培养特性、营养要求和Ｇ＝ＣＭｏｌ％,笔者认为,二者分别为嗜水气包菌和温和气单胞菌。药敏试验表明：两株病原菌均对丁胺卡那霉素、头孢哌酮、头孢二嗪和庆大霉素等四种药物敏感,用它们与腹水配伍治疗患鳖效果良好。     

尘肺结核患者Mycobacterium tuberculosis耐药基因突变研究

研究尘肺结核患者结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)耐药基因突变与耐药性的关系。在97例尘肺结核患者痰中检出MTB菌株28株,采用PCR-SSCP法检测katG、rpoB和rpsL基因突变,并与采用常规药敏试验(AST)法检测的耐药结果进行对比分析。采用PCR-SSCP法检测katG、rpoB和rpsL基因,突变率分别为42.86%(12/28)、42.86%(12/28)和32.14%(9/28),采用AST法检测INH、RFP和SM,耐药率分别为64.23%(18/28)、60.71%(17/28)和53.57%(15/28),两者之间差异均无显著性(P>0.05)。其中多耐药株20例(71.43%),包括耐三种药物12例(42.86%),耐两种药8例(28.57%),单耐药株6例(21.43%),敏感株2例,耐药率92.86%。PCR-SSCP法检出3个基因联合突变8株,与AST法符合率为66.67%(8/12);2个基因突变5株,符合率为62.50%(5/8);单基因突变2株,符合率为33.33%(2/6)。结果表明:PCR-SSCP技术适用于MTB katG、rpoB和rpsL耐药基因突变的筛选,对指导尘肺结核患者临床用药上具有重要意义。     

用Blue一Sepharose·CL·6B亲和层析法分离纯化甲鱼和北京鸭LDH＿1、LDH＿5A亚基

用ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ·ＣＬ．６Ｂ亲和层析方法分离纯化的甲鱼ＬＤＨ＿５、甲鱼ＬＤＨ＿１和北京鸭ＬＤＨ＿５，进行比较研究。从分子量、等电点、氨基酸组成、平均摩尔差异百分比及在ＢｌｕｅＳｅｐｈａｒｏｓｅ·ＣＬ·６Ｂ层析柱上洗脱特性几方面进行比较，结果表明，两个不同纲的动物（甲鱼和北京鸭）的ＬＤＨ＿５的Ａ亚基之间的差异大于同一种动物的ＬＤＨ＿５的Ａ亚基和Ｂ亚基之间的差异，并说明不同纲的动物ＬＤＨ＿５之间具有同源性。     

鳖煎剂对小鼠白细胞数量的影响

鳖煎剂对正常动物的白细胞数量有提高作用,对注射环磷酰胺所致白细胞数目减少有一定对抗作用,并可促进因注射环磷酰胺所致白细胞数量低下小鼠增生白细胞。     

体质量对中华鳖(Pelodiscus sinensis)生化组成和质量能的影响

分别测定了在实验室条件下养殖的23只稚鳖(终末体质量为15.7～46.4 g)和38只幼鳖(终末体质量为57.5～283.7 g)鳖体的生化组成和质量能.结果表明:随着稚鳖、幼鳖体质量的增加,稚鳖和幼鳖鳖体的蛋白质、脂肪的质量分数和质量能均升高,而水分则随之降低(P＜0.01).稚鳖鳖体的灰分质量分数与体质量相关关系不明显(P＞0.05),而幼鳖的灰分质量分数随体质量增加而降低(P＜0.05).实验证实,以体质量为自变量来预测中华鳖稚鳖和幼鳖的蛋白质、脂肪的质量分数和质量能的方法是简单、可行的.     

嗜水气单胞菌毒力与毒力基因分布的相关性

采用PCR扩增的方法对9株鱼源嗜水气单胞菌AEROM ONAS HYDROPHILA中的气溶素基因(AERA)、溶血素基因(HLYA)和丝氨酸蛋白酶基因(AHPA)进行了扩增。结果表明,6/9的A.HYDROPHILA中存在AERA基因,8/9的A.HYDROPHILA中存在HLYA基因,而在7/9的A.HYDROPHILA中检测到AHPA基因。通过比较基因检测的结果与嗜水气单胞菌对鲫鱼的致病性,发现AHPA阴性菌株是无毒株,强毒株都呈AERA HLYA AHPA 基因型。AERA HLYA AHPA 基因型是致病性嗜水气单胞菌主要的基因型。本研究首次发现AHPA阳性的嗜水气单胞菌皆为毒力菌株,并且发现AERA和AHPA基因存在相关性,探讨了嗜水气单胞菌致病性与毒力基因分布的关系。     

西藏拉萨地区198株结核分枝杆菌耐药性分析

目的：了解拉萨地区结核分枝杆菌对抗结核药物的耐药情况,为临床合理用药提供参考依据。方法：采用WHO推荐的比例法对分离自西藏拉萨地区肺结核患者的198株结核分枝杆菌进行4种抗结核药物（RFP、INH、SM、LVX）的药物敏感性试验。结果：198株结核分枝杆菌中耐药菌株有125株,总耐药率为63.1%（125/198）,总耐多药率为29.8%（59/198）,初治耐药率为55.1%（64/116）,复治耐药率为75.4%（40/53）,初治耐多药率为20.7%（24/116）,复治耐多药率为56.7%（30/53）。对RFP、INH、SM、LVX的耐药率分别为36.3%（72/198）、41.9%（83/198）、41.4%（82/198）和7.0%（14/198）。结论：西藏拉萨地区临床结核分枝杆菌耐药情况较为严重,应加强临床结核分枝杆菌耐药性监测,指导临床用药以防控耐药菌的产生。     

鳖饲料中维生素E的配伍研究

对鳖饲料中复合维生素和维生素E的科学配伍,进行了研究,结果表明在鳖饲料中VE最适量稚、幼鳖不小于150ppm,亲鳖大于500ppm;试验饲料的生物学综合评定结果提高了36.2%,饵料效率提高了10.9%.     

鳖鳃腺炎的组织病理学研究

用光镜和电镜技术研究鳖鳃腺炎的组织病理变化．观察表明：病变脏器普遍充血、淤血或出血，血细胞变性；肠上皮崩解脱落，微绒毛及胞器减少，AKP活性下降；肝细胞及肾近曲小管上皮细胞肿胀、颗粒变性或透明变性，局部细胞溶解，出现坏死病灶；肝糖原减少甚至消失；肾小球膨大，远曲小管和集合小管腔内充满嗜酸性物质；脾红髓扩大，多数细胞及核异形，严重者细胞破裂、解体；骨骼肌细胞肿胀、核固缩；多数病变细胞内的内质网和线粒体扩张变性．还讨论了该病的病变特征及性质等问题．     

MS-222对中华鳖的麻醉效果研究

在水温为30±1℃条件下研究了MS-222麻醉剂对不同规格的中华鳖（Pelodiscus sinensis）稚鳖的麻醉效果．研究发现：两种规格的中华鳖稚鳖分别达到不同程度的麻醉状态,其麻醉行为是一个渐变的过程．对于3．50g-5．20g和28．50g～33．50g两种规格的中华鳖,中度麻醉所需MS-222的剂量分别为1000mg／L～1500mg／L和2000mg／L～3000mg／L;需要的药物处理时间分别为215s一300s和260s～325s;从麻醉中苏醒需要的时间分别为1005s～1470s和600s～985s;苏醒后的中华鳖状态良好,形体和行为没有异常现象发生．结果表明：MS-222的麻醉处理适合于对中华鳖进行短时间的称重、测量和研究操作等．