解淀粉芽孢杆菌BI_2的鉴定及其对黄曲霉的抑制作用

菌株BI2是从青贮玉米秸秆饲料中分离得到的一株革兰氏阳性芽孢杆菌.经16S rDNA序列分析,发现该菌株与解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens(NC_009725)的相似性达到99.6%;进一步结合Biolog及生理生化分析,将该菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌.以番茄叶霉病菌、黄瓜枯萎病菌等12种植物病原菌及部分霉菌、酵母、食品乳酸菌和人类致病细菌为指示菌进行抑菌实验.结果表明:BI2主要抑制丝状真菌,而对细菌无拮抗作用;BI2菌株生长36 h的上清液能明显抑制黄曲霉孢子萌发及其菌丝生长,抑制率分别达到67.4%和74.8%;而且该上清液经120℃高温处理20 min后对黄曲霉的抑制效果基本没有影响.     

生防菌YN201490在黄瓜植株体内的定殖能力及防病机制的初步研究

为研究枯草芽孢杆菌YN201490在黄瓜体内的定殖能力及防病机制,采用平板对峙试验的方法测试该菌株对不同病原菌的抑制作用,利用灌根的方法研究其在黄瓜体内的定殖能力,并通过抑制孢子萌发对其发酵液进行了初步分离与活性检测.研究通过平板对峙试验证明了枯草芽孢杆菌YN201490对小麦雪腐病菌、番茄枯萎病菌、烟草赤星病菌、玉米拟轮枝镰孢菌、茶轮斑病菌和水稻叶鞘腐败病菌有很好的抑菌活性.用自然转化法以GFP标记,获得了荧光标记菌株YN90-P43GFPmut3a.通过灌根法,证明该菌株能在黄瓜植株体内定殖,其数量分布为根叶茎. YN201490发酵液的正丁醇萃取物能裂解小麦雪腐病菌孢子,使胞质外流,抑制91.72%孢子萌发,对黄瓜白粉病的预防效果达66.26%,并能诱导黄瓜产生明显抗性.研究结果表明枯草芽孢杆菌YN201490对多种病原真菌具有明显的抑制作用,并能够在黄瓜体内稳定定殖,具有作为生物菌剂开发利用的潜能.     

油茶病原菌拮抗菌筛选

通过拮抗实验,研究了59个野菊内生真菌菌株对油茶炭疽病及油茶稍枯病病原菌的拮抗性.结果表明:89.8%供试真菌菌株对油茶病原菌孢子萌发或菌丝生长有抑制作用.拮抗菌株在代谢过程中能产生抑制病原菌生长发育的抑菌物质,这些物质存在于菌丝内或分泌于菌丝外.筛选得到2个油茶病原菌强拮抗菌株,大茎点霉菌Y11和Y29.     

解淀粉芽孢杆菌发酵液的抑菌活性及抗氧化作用

以尖孢镰刀菌黄瓜专化型病原菌为指示菌,利用平板对峙法、牛津杯法等方法,探究解淀粉芽孢杆菌SJ100001对尖孢镰刀菌的拮抗作用、SJ100001菌株抑菌活性成分的来源、SJ100001菌株发酵液的最佳发酵条件及其理化稳定性;通过DPPH自由基清除能力和还原力的测定,探究SJ100001菌株发酵液的抗氧化活性.结果表明,...     

不同物质对黄芪根腐病致病菌的抑制作用

采用生物测定的方法,选择苦参碱、槐啶碱、槐果碱、对羟基苯甲酸和阿魏酸5种物质,研究各物质水和丙酮溶液以及不同物质丙酮混合溶液对黄芪根腐病2种主要致病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制活性和最低抑菌质量浓度.结果表明:不同物质对2种致病菌菌丝生长和孢子萌发的影响不同,同种物质丙酮溶液的抑菌效果明显好于水溶液的抑菌效果.3种生物碱对2种致病菌菌丝生长的抑制作用比较显著,其中槐啶碱丙酮溶液的抑菌活性最强,在质量浓度为1.00 g/L时的相对抑制率分别为43.63%,27.10%,最低抑菌质量浓度均为0.062 5 g/L.2种酚酸类物质对2种致病菌孢子萌发的抑制作用明显强于对菌丝生长的抑制作用.不同物质丙酮混合溶液对2种致病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制活性与单个物质丙酮溶液无明显差异,抑制效果最好的槐啶碱和苦参碱混合液对2种致病菌抑制的EC50为31.62,10.00 g/L,最低抑菌质量浓度均为0.062 5 g/L.不同物质的水和丙酮溶液对2种致病菌活性的抑制作用存在明显的浓度效应,抑制作用随溶液浓度降低而减弱.     

贝莱斯芽孢杆菌3A3-15生防和促生机制

为揭示贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis)3A3-15生防和促生作用相关机理,采用9对特异性引物对其抑菌基因和促生长基因进行PCR检测,并分别通过Sackowski法、Schwyn和Neiland法检测其分泌吲哚乙酸(IAA)和嗜铁素能力,通过高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI-MS)分析其发酵液抑菌成分,采用平板对峙实验和孢子萌发抑制实验分析该菌株的抑菌机理.结果表明,贝莱斯芽孢杆菌3A3-15中的抑菌基因包括yndJ、srfAB、ituC、bamC和fenD,促生长基因包括ysnE和dhbC.该菌株分泌嗜铁素能力较强,A_s/A_r值达到0.238,鉴定其抑菌物质为C14～C15 surfactinA,且贝莱斯芽孢杆菌3A3-15的次生代谢物能导致病原菌(尖孢镰刀菌)菌丝扭曲、膨大、畸形,对其孢子萌发抑制作用较强,抑制率达93.2%.以上结果说明贝莱斯芽孢杆菌3A3-15具有较好的生防和促生潜力,是防治尖孢镰刀菌引起的大豆根腐病的潜在菌株.     

枯草芽孢杆菌YA-3对番茄早疫病的防治作用

从西洋参种植土壤中分离获得一株具有抗真菌活性的细菌YA-3,杯碟法测定表明,该拮抗菌对13种植物病原真菌均有不同程度的抑制作用,其中对番茄早疫病抑制率达82.2%;YA-3培养滤液可导致番茄早疫病病原菌菌丝畸变、枯萎或者断裂,阻碍菌丝生长,并能够抑制其孢子萌发,抑制率达92.3%以上;利福平抗性标记试验表明,YA-3在番茄叶片上有很强的定殖能力,第26 d仍能检测到该菌;经盆栽试验结果表明,YA-3发酵液可使番茄叶片发病率显著降低,防治效果可达到75.52%;根据其形态、生理生化特性及16S r DNA同源性分析结果,鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

川芎萃取物对植物病原真菌的抑制作用

为了研究川芎萃取物对植物病原真菌的抑制作用，以石油醚、乙酸乙酯和正丁醇为萃取溶剂，依次对川芎80%乙醇提取物的水溶液进行萃取，采用菌丝生长速率法测定各萃取物(含萃余物)对白菜黑斑病菌、番茄早疫病菌和稻瘟病菌的抑制作用，从中选取抑菌效果最好的萃取物进行菌丝生长和孢子萌发毒力测定，并进行盆栽防病试验.结果表明，川芎石油醚萃取物抑制菌丝生长作用最强，其浓度为10 mg/mL时，对白菜黑斑病菌、番茄早疫病菌和稻瘟病病菌的菌丝生长抑制率分别为63.46%、75.25%和68.19%;川芎石油醚萃取物对白菜黑斑病菌菌丝生长和孢子萌发的半抑制浓度(IC₅₀)分别为3.57 mg/mL和10.25 mg/mL;在抑制菌丝生长的IC₅₀浓度下，川芎石油醚萃取物对白菜黑斑病的盆栽防治效果可达51.7%.     

菌株JZ2-1-12的鉴定及其对马铃薯干腐病的抑制活性

对分离自青稞白酒糟醅的菌株JZ2-1-12进行鉴定,研究其发酵液乙酸乙酯及正丁醇提取物的抑菌活性。运用形态学、生理生化特征及分子生物学方法对菌株JZ2-1-12进行鉴定分析;采用牛津杯法,以马铃薯干腐病病原菌为指示菌,测定菌株JZ2-1-12发酵液提取物的抑菌活性。结果表明:(1)菌株JZ2-1-12为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis subsp.subtilis);(2)菌株发酵液乙酸乙酯提取物可使马铃薯干腐病病原菌菌丝出现畸形、分叉、断裂及粗细不均的现象,对马铃薯干腐病病原菌孢子萌发具有强烈的抑制作用。本研究可为微生物来源的马铃薯干腐病生物防治制剂的开发提供理论依据和技术支持。     

壳聚糖影响樱桃番茄上青霉菌孢子萌发和生长

文章探讨了壳聚糖对樱桃番茄上青霉菌生长繁殖以及贮藏品质的影响。在离体的条件下,进行了4种不同质量浓度的壳聚糖对青霉菌孢子萌发、菌丝生长以及菌落扩展的抑制实验。在活体条件下,对浸泡过0.2g/L壳聚糖溶液的樱桃番茄接种青霉菌孢子悬浮液,研究壳聚糖对樱桃番茄病害的控制情况。结果表明:离体条件下,壳聚糖溶液对青霉菌孢子的萌发、菌丝生长的抑制作用随着壳聚糖质量浓度的增加而增强,在壳聚糖质量浓度为0.4g/L时,几乎能完全抑制菌丝的生长和孢子的萌发。0.2g/L壳聚糖对菌落的扩展抑制最明显,但随着壳聚糖质量浓度的增加,抑制效果却逐渐减弱。在樱桃番茄上的接种实验中,进一步验证了0.2g/L壳聚糖能够对樱桃番茄上青霉菌的生长繁殖有抑制效果。在壳聚糖对樱桃番茄贮藏品质的影响实验中,检测了樱桃番茄果实的硬度、可溶性固形物、丙二醛(MDA)、还原性糖质量比等生理指标,结果均表明壳聚糖有助于延缓樱桃番茄的成熟,提高果实的贮藏品质。     

凤尾菇深层发酵液抗细菌抗真菌活性的研究

对凤尾菇(Pleurotus sajor-caju)深层发酵液的乙酸乙酯和正丁醇萃取物的抗细菌抗真菌活性进行了检测,包括对细菌、真菌菌丝生长和分生孢子的抑制作用.结果表明:凤尾菇深层发酵液的乙酸乙酯和正丁醇萃取物具有较高抑菌活性,其中乙酸乙酯萃取物对6种供试细菌有抑制效果,最低抑菌质量浓度在3.125~25.00 mg/mL;正丁醇萃取物对5种供试细菌有抑制效果,最低抑菌质量浓度在6.25~12.5 mg/mL.两种萃取物对5种供试真菌菌丝生长和孢子萌发有明显的抑制作用,但乙酸乙酯相的ρIC50普遍低于正丁醇相.因此,乙酸乙酯相抑菌丝生长和孢子萌发强于正丁醇相.     

板栗内生真菌B2菌株鉴定及其抑菌特征研究

通过比较试验对板栗内生真菌B2菌株抑制板栗干腐病病原菌D1的特征进行了研究.运用形态学及分子生物学方法对B2菌株的物种进行了鉴定.研究表明,B2菌株菌丝细胞及培养液内均含有抑菌成分,分别对板栗干腐病病原菌菌丝生长及分生孢子萌发有明显抑制作用.该菌株在PDA培养基上菌落白色,绒毛状,不产生色素,是一种担子菌,即phlebia acerina.     

防治枇杷花腐病室内药剂筛选

采用菌丝生长速率法和孢子萌发法,室内测定了12种杀菌剂对枇杷花腐病2种病原菌拟盘多毛孢(Pestalotiopsis eriobotrifolia)和灰葡萄孢(Botrytis cinerea)的抑菌效果.结果表明:30%苯醚甲·丙环唑乳油、50%异菌脲可湿性粉剂、26%嘧胺·乙霉威可湿性粉剂、50%多菌灵可湿性粉剂和70%甲基硫菌灵可湿性粉剂等5种杀菌剂对2种病原菌的菌丝生长和孢子萌发都具有强烈的抑制作用; 70%嘧霉胺水分散粒剂和50%嘧菌环胺水分散粒剂对2种病原菌也有较好的抑制作用;其余药剂抑制作用相对较差.     

硼酸、肉桂油及亚磷酸钾对采后病原菌Fusarium oxysporum生长发育的影响

为寻找针对果蔬镰刀菌枯萎病主要致病菌Fusarium oxysporum的有效防治方法,从腐烂的番茄(Solanum lycopersicum)中分离主要致病菌之一,经核糖体RNA基因内转录间隔区(rDNA-ITS)鉴定后,利用硼酸、肉桂油、亚磷酸钾处理病菌,确定最低抑菌浓度,并通过生理、生化指标以及果实接种实验,研究3种抑菌物质与病原菌发育及致病力的关系.结果表明:分离的病原菌为F.oxysporum;3种物质的抑菌效果均与浓度成正比;在最低抑菌浓度下,可以显著抑制F.oxysporum的孢子萌发,延缓芽管伸长及菌丝扩展速度,降低病原菌生物量积累,引起病原菌糖吸收障碍,并对F.oxysporum引起的番茄腐烂有明显的防治作用,其中肉桂油的防治效果尤为突出.     

茶树炭疽病拮抗内生细菌贝莱斯芽胞杆菌的筛选与鉴定

从祥云茶业基地信阳10号母本园中采摘信阳10号茶树(Camellia sinensis)健康叶片,分离纯化得到茶树内生细菌7株,平板对峙法筛选得到4株拮抗菌,均对茶树炭疽菌(Colletotrichum fructicola)具有抑制作用,其中X10-03抑菌效果最好,其代谢产物对茶树炭疽病病菌的抑菌率达到52.7%.光学显微镜观察发现,X10-03菌株代谢产物可有效抑制茶树炭疽菌分生孢子萌发和菌丝的生长.稀释3倍的发酵液对茶树炭疽菌菌丝生长的抑菌率达到70.4%;经过16SrDNA和gyrA基因序列分析,将内生拮抗细菌X10-03鉴定为贝莱斯芽胞杆菌(Bacillus velezensis).     

闽楠溃疡病(Clonostachys rosea)化学杀菌剂与抑菌植物室内筛选

闽楠溃疡病(Clonostachys rosea)是近年来出现的危害闽楠较为严重的枝干性病害,对经济造成极大的损失。为能有效地防治闽楠溃疡病,选用8种杀菌剂和12种植物抑菌物质,采用生长速率抑制法和玻片萌发法测定其对病原菌粉红粘帚霉(Clonostachys rosea)菌丝生长和孢子萌发的影响。研究结果表明,供试杀菌剂对病原菌菌丝抑制效果最好的是苯醚·甲环唑和甲基硫菌灵,其EC_(50)分别是0.290 mg/L和0.818 mg/L;对病原菌分生孢子萌发抑制效果较好的是多锰锌、氟啶胺、苯醚·甲环唑和百菌清,其EC_(50)分别是2.071 mg/L、4.335 mg/L、4.757 mg/L和5.207 mg/L,苯醚·甲环唑对粉红粘帚霉的菌丝生长和孢子萌发均有较好的抑制作用,可用于后续的野外防治试验。供试植物浸提物对病原菌菌丝生长抑制效果最显著的是知母,抑制率为80.67%,对分生孢子萌发抑制效果显著的是艾叶和苦参,抑制率超过60%,知母、艾叶和苦参对开发闽楠溃疡病新型抑菌剂具有潜在研究价值。     

短小芽孢杆菌LYMC-3菌株对拟茎点霉的拮抗作用

【目的】短小芽孢杆菌LYMC-3菌株对稻瘟病、黄瓜枯萎病及棉花黄萎病等具有显著的防治效果,测定LYMC-3菌株对8种植物病原真菌的抑菌活性,检测其抑菌谱,为其推广应用提供依据。【方法】采用平板对峙法测定LYMC-3菌株对松球壳孢菌(Sphaeropsis sapinea)、松树脂溃疡病菌(Fusarium circinatum)、金黄壳囊孢菌(Cytospora chrysosperma)、拟茎点霉(Phomopsis macrospora)、七叶树壳梭孢菌(Fusicoccum aesculi)、拟盘多毛孢(Pestalotiopsis theae)、山茶炭疽菌(Guignardia camelliae)、葡萄座腔菌(Botryosphaeria dothiorella)8种植物病原真菌的抑菌活性,筛选出抑菌活性最强的病原真菌,进行菌丝生长和孢子萌发抑制试验。【结果】LYMC-3菌株对8种供试植物病原真菌均有抑制作用,抑菌带长度及抑菌活性大小依次为:拟茎点霉>拟盘多毛孢>葡萄座腔菌>松球壳孢菌>七叶树壳梭孢菌>金黄壳囊孢菌>松树脂溃疡病菌>山茶炭疽菌。LYMC-3菌株发酵滤液对拟茎点霉菌丝生长的抑制率为70.36%,对其分生孢子24 h萌发抑制率为88.16%。【结论】短小芽孢杆菌LYMC-3菌株抑菌谱广,其发酵滤液对拟茎点霉有较强的拮抗作用。     

新疆五种特色植物提取物抑菌活性初步研究

采用生长速率法测定了阿魏等5种新疆特色植物提取物对10 种常见植物病原菌的抑菌作用.结果表明：有5种植物均表现一定程度的抑菌活性,其中阿魏提取物活性最好,且抑菌谱较广;在0.01g/mL的浓度下,对小麦纹枯病菌、番茄早疫病菌、番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、苹果干腐病菌、苹果霉心病菌等6种植物病原菌72h都有较好的抑制作用,抑制率都在90%以上;其中对番茄灰霉病菌抑菌效果最好,达100%.在0.05g/mL的浓度下,72h抑制效果都有所降低,但都在53.70%以上.     

芽孢杆菌BC98-Ⅰ拮抗蛋白性质及其对黄瓜枯萎病菌的抑菌作用

蜡质芽孢杆菌(Bacillus cereus)BC98-I分离自沤肥浸渍液中,对黄瓜枯萎病等多种蔬菜土传病害有较强烈的拮抗能力.其无细胞发酵液经55%硫酸铵盐析后得到的20mg/ml拮抗蛋白粗提液在平皿上对黄瓜枯萎菌的抑菌圈直径达19.3mm.该拮抗蛋白经100℃处理30min后仍能保持97.7%的抑菌活性;作用活性pH范围宽,在pH 1.0～11.0的条件下均有活性;对胰蛋白酶、蛋白酶K稳定;对氯仿不敏感;对紫外线部分敏感.BC98-I拮抗蛋白粗提物对黄瓜枯萎菌孢子萌发和菌丝生长有强烈的抑制作用,主要表现为孢子萌发产生的芽管较对照短,芽管膨大形成大泡囊;菌丝扭曲,形成不规则泡囊,原生质浓缩;细胞壁溶解,内含物外溢.     

蓝桉叶提取物对植物病原菌化感作用初步研究

采用菌丝生长速率法,在PDA培养基上测定了蓝桉叶片的石油醚和氯仿提取物对水稻稻瘟病、小麦纹枯病、蚕豆根腐病、梨黑星病、番茄早疫病5种植物病原菌的化感作用,研究了蓝桉叶片的石油醚和氯仿提取物与病原菌的剂-效关系和提取物对病原菌菌丝生长速率的影响.实验结果表明,蓝桉叶片的石油醚和氯仿提取物对5种植物病原菌的菌丝生长均有不同程度的抑制作用.其中,氯仿提取物的活性高于石油醚提取物.在供试的5种病原菌中,氯仿提取物对水稻稻瘟病的抑制作用最强,其EC50值为58.75μg/mL.该研究为蓝桉作为农用植物源杀菌剂开发,特别是用于稻瘟病防治的植物源杀菌剂,提供了重要依据.