中华绒螯蟹酚氧化酶原系统与颤抖病的关系

近年来,颤抖病给中华绒螯蟹养殖业造成了巨大的经济损失.酚氧化酶原系统是甲壳动物最主要的体液免疫系统,当外源微生物侵入体内时,它发挥最基本的免疫防御作用来抵抗感染.酚氧化酶原系统的变化是蟹类健康状况的重要指标.prophenoloxidase和peroxinectin是酚氧化酶原系统中两个重要的体液免疫分子.实验从分子和蛋白两个水平研究了中华绒螯蟹酚氧化酶原系统与颤抖病的关系,建立了一种新的通过测定酚氧化酶原系统活性来判断蟹体质状况的方法.在分子水平上,中华绒螯蟹体液免疫分子prophenoloxidase和peroxinectin的部分基因序列被克隆和测序,并检测出这两种分子mRNA水平的表达情况与颤抖病的感染程度呈正相关,患病组蟹mRNA的表达水平远高于正常组;在蛋白水平上,酚氧化酶的活性被测定,在正常情况下,蟹体内酚氧化酶活性处于低水平状态,当被感染颤抖病后,酚氧化酶活性有一定程度的升高.这些结果提示了酚氧化酶原系统在抗颤抖病感染时起重要作用,为进一步研究预防和治疗颤抖病的新途径提供了理论依据.     

乳链球菌SB900肽聚糖对中国对虾免疫功能的影响

利用注射法研究了乳链球菌ＳＢ９００肽聚糖对中国对讷环境的影响。研究结果表明ＬＡＢＰＧ经肌肉注射后可激活中国对虾体内的细胞防御体系，对对虾血淋巴中的抗菌、溶菌、酚氧化酶和 氧化物歧化酶几种免疫相关因子具有不同程度的诱导作用。体外实验表明ＬＡＢＰＧ对酚氧化酶原具有一定的激活作用。表明利用ＰＧ提高对虾免疫系统的功能是一条可行的途径。     

乳链球菌SB900肽聚糖对中国对虾免疫功能的影响

利用注射法研究了乳链球菌ＳＢ９００肽聚糖对中国对虾内环境的影响．研究结果表明ＬＡＢＰＧ经肌肉注射后可激活中国对虾体内的细胞防御体系，对对虾血淋巴中的抗菌、溶菌、酚氧化酶和超氧化物歧化酶几种免疫相关因子具有不同程度的诱导作用．体外实验表明ＬＡＢＰＧ对酚氧化酶原具有一定的激活作用．表明利用ＰＧ提高对虾免疫系统的功能是一条可行的途径．     

多环芳烃—屈对三疣梭子蟹免疫影响的初步研究

研究了多环芳烃类物质屈(chrysene)对三疣梭子蟹的毒性作用.测定了该有机污染物对三疣梭子蟹血细胞密度(THC)、溶菌酶活力(LZM)、酸性磷酸酶活力(ACP)、碱性磷酸酶活力(AKP)、超氧化物歧化酶活力(SOD)、酚氧化酶活力(PO)这几种免疫因子的影响;研究了其对三疣梭子蟹免疫影响的特点.屈对三疣梭子蟹各酶类的影响有随屈浓度的增加和作用时间的加长而增强的趋势.SOD对屈最为敏感,其次是溶菌酶、血细胞密度和PO,ACP和AKP受其影响最小.     

几种化学因子对三种赤眼蜂离体酚氧化酶活性的影响

为比较不同赤眼蜂酚氧化酶(PO)活性的大小,明确赤眼蜂种间免疫防御能力强弱,本研究通过研磨、离心提取松毛虫赤眼蜂Trichogramma dendrolimi、螟黄赤眼蜂T.chilonis、玉米螟赤眼蜂T.ostriniae匀浆液,首次测定了几种化学因子(Ca2+、昆布多糖、纤维素、右旋糖酐、脂多糖和丝氨酸蛋白酶抑制剂)对3种供试赤眼蜂匀浆液中酚氧化酶原激活系统(proPO-AS)的激活程度。结果表明:玉米螟赤眼蜂匀浆液PO活性最高,螟黄赤眼蜂次之,松毛虫赤眼蜂最低。Ca2+是激活供试赤眼蜂proPO的必需因子,且在0.03mol/L浓度下激活作用最强;昆布多糖和脂多糖也能有效激活proPO,0.01及0.05mg/mL昆布多糖能强烈激活PO活性;纤维素和右旋糖酐对PO活性存在显著抑制作用。结果证明了赤眼蜂种间存在明显的免疫能力差异。本研究建立了小型昆虫proPO-AS研究体系,为研究Wolbachia-小型昆虫的免疫互作体系奠定了基础。     

中国对虾血细胞酶细胞化学的初步研究

运用电镜酶细胞化学技术，对中国对虾（Penaeus chinensis)的血细胞和血清中的酚氧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶和过氧化物酶的酶活性部位进行标记。实验结果显示：酚氧化酶主要以酶原形式存在于大颗粒细胞的颗粒体中，酸性磷酸酶和碱性磷酸酶以酶原形式存在于小颗粒细胞的颗粒体中。健康虾和患病虾血细胞中酶活性的表现形式不尽相同，在病理情况下，颗粒细胞能以细胞解体的方式，排出细胞内的颗粒，转化成有活性的酶，以此提高血淋巴中这几种酶的活性。透明细胞可以吞噬排放颗粒后的颗粒细胞，透明细胞中由高尔基体合成的酸性磷酸酶等溶酶体酶主要用于透明细胞的细胞内消化作用。研究认为：3种血细胞因含有不同的免疫酶以及酶的作用方式不同而具有不同的免疫功能。     

口服免疫添加剂对养殖大黄鱼免疫机能影响的初步研究

对福建省连江县厦宫新辉村的养殖大黄鱼病害进行免疫防治试验,通过定期口服免疫添加剂后,检测大黄鱼血清中溶菌酶活力,抗菌活力和酚氧化酶活力,测定大黄鱼体长和体重,研究结果表明,大黄鱼在服用免疫添加剂后血清中溶菌酶活力平均值提高了26％,抗菌活力增加了18％,酚氧化酶活力提高幅度高达46％,与此同时,实验组大黄鱼的生长速度也比对照组要快,其中实验组平均体长比对照组高3．8％,平均体重增加13．5％。     

阿片肽的体内分布与功能作用浅谈

阿片肽是免疫系统中重要的调节因子,它几乎作用于所有的免疫活性细胞,对不同亚类的细胞作用不尽相同,它们的释放受应激的影响,而应激影响免疫反应,提示阿片肽可能是应激引起免疫调节的介质。     

甲壳动物酚氧化酶分子结构与生物化学性质的研究进展

酚氧化酶是一种含铜金属酶,是酚氧化酶原激活系统级联反应链中的关键酶,通过催化黑化反应在无脊椎动物非特异性免疫中具有重要作用。本文综述了甲壳动物酚氧化酶的分子结构及其生物化学性质。     

pH胁迫对拟穴青蟹体内几种免疫因子的影响

采用酶学分析方法研究pH(分别为4.5、6.0、7.5、9.0、10.5)胁迫下拟穴青蟹血清酚氧化酶(phenoloxidase,PO)以及血清、肌肉和肝胰腺超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),溶菌酶(lysozyme,UL)活性和抗菌力(antibacterial activity,Ua)等免疫因子的变化.结果表明,pH胁迫对拟穴青蟹血清PO和总SOD活性及Ua影响显著(p<0.05),而对UL活性影响不显著(p>0.05),对肌肉和肝胰腺总SDO活性影响显著(p<0.05);相同pH下肝胰腺总SOD活性差异显著(p<0.05),肌肉和血清总SOD活性差异不显著(p>0.05).综上所述,pH胁迫对拟穴青蟹的免疫反应影响显著,在pH 7.5～9.0范围内,其免疫力强.     

Effect of the endoparasitoidCampoletis chlorideae on phenoloxidase activity inHelicoverpa armigera hemolymph

Endoparasitoid wasps can develop inside permissive host due to their ability to overcome or to evade the host’s cellular and humoral immune response. Oviposition ofCampoletis chlorideae (Hymenoptera: Ichneumonidae) in larvae ofHelicoverpa armigera (Lepidoptera) was accompanied by inhibition of phenoloxidase (PO) activity and melanization reaction in host hemolymphin vitro. PO activity in host plasma was decreased about 83% 48 h post parasitization. A similar result was found when the host insect was injected with 0.5 wasp equivalent calyx fluid. This indicated that the calyx fluid was concerned with suppression of PO activity after parasitization. Furthermore, the prophenoloxidase (proPO) in host haemocytes could be activated by bovine trypsin in unparasitized insects, while it could not be activated in parasitized or calyx fluid-injected host. The results suggested that inhibition of PO activity by parasitization was related to the calyx fluid ofCampoletis chlorideae, and the components of calyx fluid (eg. polydnaviruses) perhaps suppressed the expression of proPO in hemolymph or accelerate the degradation of proPO.     

盆炎净颗粒的免疫调节作用研究

目的研究盆炎净颗粒的免疫调节作用。方法观察盆炎净颗粒对非特异性免疫、细胞免疫及体液免疫的影响。即对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响、对2,4-二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反应的影响以及对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠血清溶血素生成的影响。结果盆炎净颗粒有明显提高环磷酰胺所致的免疫功能低下小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的作用,对2,4-二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反应有明显抑制作用,而对环磷酰胺所致免疫功能低下小鼠血清溶血素的生成没有影响。结论盆炎净颗粒具有提高机体非特异性免疫和细胞免疫的作用。     

饲料中添加虾青素对斑节对虾生长和免疫指标的影响

 虾青素以不同质量分数(0,10,20,40,80,160 mg·kg^-1)添加到斑节对虾 Penaeus monodon 的饲料中投喂30 d,研究虾青素对斑节对虾［初始体质量（1.32±0.03 ）g］生长、存活和免疫指标的影响。结果显示：虾青素可提高斑节对虾的存活率,但无明显规律性;而增质量率和特定生长率,实验组和对照组间差异显著(P<0.05);就终末均质量而言,实验组与对照组差异显著(P<0.05),但实验组之间无显著差异(P>0.05);虾青素可提高斑节对虾酚氧化酶（PO）的活力,除10 mg·kg^-1和20 mg·kg^-1 组外,其余实验组与对照组差异显著(p<0.05),但对碱性磷酸酶(ALP)、过氧化物酶(POD)、超氧化物岐化酶(SOD)的活力无显著影响。以增重率、特定生长率和酚氧化酶（PO）活力为参考指标,虾青素适宜添加量为40～80 mg·kg^-1。     

饲料中添加铜对凡纳滨对虾血细胞中酶活的影响

通过在凡纳滨对虾的饵料中添加不同浓度的铜,研究其对血细胞中酶活的影响.试验结果表明,饵料中添加铜的含量对凡纳滨对虾酚氧化酶及超氧化物歧化酶都有一定影响,当基础饵料中添加30~45mg·kg-1铜时,二者的活力最高.当饵料铜过量时对超氧化物歧化酶活力的影响比对酚氧化酶的影响显著.     

低分子量壳聚糖对长江华溪蟹免疫功能的影响

运用浸浴法,研究了低分子量壳聚糖(LMWC)对长江华溪蟹(Sinopotamon yangtsekiense)免疫功能的影响.实验设置五个浓度(0.5、1.0、2.0、4.0和8.0 mg/L),分别在第10天、20天和30天取血清进行血细胞记数、溶菌酶(LSZ)、超氧化物歧化酶(SOD)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)和酚氧化酶(PO)活性的测定.结果显示,LMWC可提高华溪蟹LSZ、PO、SOD、AKP和ACP活性,其作用和效果具有浓度及时间效应,但是对血细胞密度无显著影响.LMWC在4 mg/L和8 mg/L浓度下作用30 d,可显著提高华溪蟹的免疫力,说明LMWC可作为非特异性免疫增强剂提高华溪蟹的免疫力.     

玉米自交系在缺磷胁迫下的5种抗氧化酶活性变化的研究

以珍珠岩作基质固体培养4种不同基因型玉米自交系材料，设置：0．25mol／LKH2PO4全磷（对照）、0mol／LKH2PO4（缺磷）2种处理，于第5，7，9，11d考察超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、过氧化氢酶（CAT）、抗坏血酸过氧化物酶（APX）、谷胱甘肽还原酶（GR）活性的变化．缺磷时不同自交系相同抗氧化酶活性的变化趋势不一致．相同自交系的不同抗氧化酶在缺磷胁迫下的变化趋势也有差异．结论：不能仅用1种膜保护酶在胁迫时活性的高低来判断材料是耐缺磷胁迫型还是缺磷敏感型．应综合考虑这5种保护酶活性．     

苓泽合剂免疫调节作用的研究

目的研究苓泽合剂的免疫调节作用。方法观察苓泽合剂对非特异性免疫、细胞免疫及体液免疫的影响。即对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响、对2,4-二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反应的影响以及对小鼠血清溶血素生成的影响。结果苓泽合剂能降低小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力,对2,4-二硝基氯苯所致小鼠迟发型超敏反应有明显抑制作用,能降低小鼠血清溶血素的生成。结论苓泽合剂具有调节机体非特异性免疫、细胞免疫及体液免疫的作用。     

吉林人参低聚肽的免疫调节作用

 为研究吉林人参低聚肽(GOP)对小鼠的免疫调节作用, 选取280 只SPF 级雌性BALB/c 小鼠, 随机分为7 组:空白对照组、乳清蛋白组(150 mg/kg)及5 个GOP 组(37.5、75、150、300、600 mg/kg)。连续灌胃30 d 后, 进行免疫7 项实验测定, 观察GOP 对小鼠免疫器官相对重量、细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能和NK 细胞活性的影响。结果表明:GOP 显著提高了ConA 诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖能力、迟发型变态反应能力、抗体生成细胞数、小鼠碳廓清指数、巨噬细胞吞噬率和吞噬指数、NK 细胞活性(P<0.05), 且效果优于乳清蛋白。由此可知, GOP 可以通过增强细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞吞噬能力和NK 细胞活性, 起到增强免疫力的作用。     

凡纳对虾体内ACP、AKP酶的细胞化学定位

运用电镜酶细胞化学技术对凡纳对虾体内肝脏(L)、肌肉(M)、心脏(H)和复眼(E)等四种组织的酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)进行了细胞化学定位,并与感染病毒的凡纳对虾四种组织中ACP、AKP的细胞化学定位进行比较.结果显示,在健康的对虾体内,ACP依次出现在各组织中的溶酶体、细胞核、细胞内膜、线粒体、内质网以及肝脏组织中的部分脂滴周围及微绒毛中AKP依次出现在各组织中的细胞膜、细胞核、溶酶体、内质网以及肝脏组织中的脂滴周围及微绒毛中.感染病毒后,对虾体内组织细胞出现了明显的病理变化,各组织细胞内均出现大量的髓样小体;各组织中ACP,AKP的超微细胞化学定位也发生了明显的规律性变化,表现为相应细胞器内ACP,AKP酶活性均减弱或消失,并在多数组织的细胞质中检测到ACP,AKP酶活性的高电子密度颗粒,且大量出现的髓样小体均呈阳性反应.     

异黑成熟颗粒对免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用

 为研究异黑成熟颗粒对环磷酰胺诱导免疫抑制小鼠的非特异性免疫功能、体液免疫功能、细胞免疫功能的影响,将84只小鼠随机分为6组：正常对照组,环磷酰胺模型组,阳性对照组,异黑成熟颗粒低、中、高剂量组,每组14只。除正常对照组外,其他组小鼠均用75mg/kg环磷酰胺腹腔注射诱导免疫抑制小鼠模型,阳性对照组和异黑成熟颗粒组连续灌胃给药14d,1次/d。测定小鼠单核巨噬细胞吞噬功能、外周血T细胞亚群、NK细胞活性、白介素-1（IL-1）活性、白介素-2（IL-2）活性、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）活性、血清溶血素抗体生成（CH50）、迟发型变态反应等。结果表明,异黑成熟颗粒3个剂量组对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的单核巨噬细胞吞噬功能、外周血T细胞亚群数量、对2,4-二硝基氯苯（DNCB）诱导的迟发性变态反应、免疫器官重量和IgM、IgG值等均具有明显增强作用（P<0.05）;异黑成熟颗粒中、高剂量组明显增强小鼠NK细胞和TNF-α活性（P<0.05）;异黑成熟颗粒能提高小鼠IL-1和IL-2的活性（P<0.05）。异黑成熟颗粒对免疫抑制小鼠的免疫功能具有改善作用。