动性球菌产生胞外脂肪酶的条件

测定了动性球菌产生胞外脂肪酶的酶活力,对动性球菌产生胞外脂肪酶的条件进行了研究.结果表明,当碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨,初始pH值为6.0时脂肪酶产率最高;K2HPO4,KH2PO4,CaCl2,ZnSO4和NaCl对脂肪酶产率有促进作用;CuSO4和MgSO4对脂肪酶产率有一定影响;FeCl3,BaCl2,CoSO4和MnSO4对脂肪酶产率影响较大;非离子表面活性剂吐温和聚乙烯醇均能促进脂肪酶的生成,且吐温比聚乙烯醇效果更好.     

漆酶/脂肪酶催化制备丝裂霉素类似物及其响应面法优化

丝裂霉素及其类似物,广泛应用于各种肿瘤.为了获得优异的产率和环境友好性,采用一锅法工艺,以漆酶/脂肪酶为催化剂,催化2-甲基苯-1,4-二酚与正丁胺的多米诺反应制备丝裂霉素类似物2-丁胺-3-甲基-1,4-苯醌(c).采用响应面技术优化了反应条件:2-甲基苯-1,4-二酚与胺的物质的量比为1.16∶1、漆酶与脂肪酶的活性比为1.14∶2、反应温度为38.9 ℃,最佳产率达到87.17%.建立了产率模型,该模型考虑了2-甲基苯-1,4-二酚与胺的物质的量比、漆酶与脂肪酶活性比和反应温度对产率的影响,可以准确的预测产率(R²为0.994 1).漆酶/脂肪酶协同催化体系一锅法合成丝裂霉素类似物,显著提高了产率,可作为提高丝裂霉素类似物产率的绿色替代工艺.     

大白鼠实验性肝病变的组织化学和生物化学研究 Ⅰ.四氯化碳中毒后肝内脂肪、脂肪酶、核糖核酸和硷性磷酸酶的观察及血、肝内转氨酶活力的变化

大白鼠皮下注射一定剂量的CCl_4(2C.C./100克体重40%的CCl_4)后24及48小时出現显著的肝脂肪病变,此时血內轉氨酶活力由正常时的175.5单位上升至924与908单位,同时肝組織內轉氨酶活力則由正常时的159单位分別下降至79及59单位。因此我們认为,由CCl_4引起的这样肝病变时血內轉氨酶的上升可能系由中毒的肝組織而釆。在注射CCl_4后的动物肝組織中有某些数量的肝细胞由于肿胀而成气球细胞,此类细胞用一般組織学及組織化学方法观察,无脂肪的积聚,亦无脂肪酶、核糖核酸及硷性磷酸酶的存在;由于此类細胞的出現,致使肝血变狭窄,影响了肝細胞的血液供应,而使肝小叶中央細胞坏死。我們也观察到,在肝病变过程中,靠近中央靜脉周围单核浸澗細胞較多,此类細胞中的核糖核酸及硷性磷酸酶均呈阴性反应。在浸潤細胞间有小型肝細胞的存在,此种細胞形状較小,其細胞質的嗜伊紅性較强,其中硷性磷酸酶及核糖核酸則呈阴性反应;致使核糖核酸及硷性磷酸酶在病变后臂由正常分布形式而集中于肝門管附近的肝細胞及肝胆管周围。我們認为,硷性磷酸酶的集小于肝门管区是由于气球細胞的胀大阻塞了血,而胆毛細管的收縮又妨碍了磷酸酶由肝至胆道的去路。CCL_4注射48小时后大白鼠肝內的核糖核酸集中于肝門管区,被認为是肝細胞的再生現象。本实驗观察到,CCl_4中毒后肝脂肪的产生与肝細胞內脂肪酶的阴性反应,这可能与肝細胞內脂肪酶的减低有关,是由于CCl_4破坏了肝內脂肪酶的活性所致。     

动性球菌代谢变压器绝缘油及其代谢产物对绝缘油介损的影响

对动性球菌代谢变压器绝缘油进行了研究, 发现动性球菌能够代谢绝缘油 , 利用薄层层析、 液-质联机等技术从变压器绝缘油的动性球菌代谢物中分离得到一种脂 肪酸, 用质谱、 核磁共振对其结构表征. 同时研究了动性球菌代谢绝缘油的产物对绝缘 油介损的影响.     

pH和温度对黑斑蛙消化道脂肪酶活力的影响

采用聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法,对黑斑蛙(Rana nigromaculata)消化道不同部位脂肪酶活力进行了测定并考察了pH和温度对脂肪酶活力的影响.结果表明,黑斑蛙消化道不同部位脂肪酶活力由高到低依次是中肠、后肠、前肠、胃和食道.pH和温度对脂肪酶活力的影响较大,二者与脂肪酶活力的关系曲线均呈单峰型,胃和肠道脂肪酶的最适pH值分别为5.0和7.5,最适温度均为40℃.此外对蛙类的人工养殖提出了几点建议.     

响应面优化脂肪酶催化Baeyer-Villiger反应制备ε-己内酯

固定化T.laibaccii脂肪酶介导化学-酶Baeyer-Villiger氧化法制备ε-己内酯.运用响应面法进行了实验设计,获得了最优反应条件:环己酮初始浓度为1.22 mol/L,环己酮与过氧化氢脲的物质的量比为1∶1.3,反应温度为56.5 ℃,产率达到98.06%,浓度高达1.2 mol/L.在环己酮、乙酸乙酯反应体系中有三个反应,其中第三个反应是过氧化氢脲通过固定化脂肪酶的作用与中间产物乙酸反应,乙酸原位生成过氧乙酸.建立了二次多项式模型,其R²值为0.998 8,可以准确地预测ε-己内酯产率.该模型考虑了环己酮的初始浓度、环己酮与过氧化氢脲的物质的量比和反应温度对ε-己内酯产率的影响,环己酮与过氧化氢脲的物质的量比对ε-己内酯的产率有非常显著的影响(p<0.000 6).     

胞外聚合物(EPS)的检测及受金属离子胁迫作用 的研究进展

胞外聚合物(EPS)是细胞外由微生物分泌的一种三维空间的大分子聚合物,其在污水生物处理系统中具有重要的作用.胞外聚合物具有一定吸附性能,使其在污水净化、环境治理方面有一定优势,既能吸附有机混合物,又能吸附无机金属离子,有很好的解毒作用.生物膜中一些金属离子的存在会对胞外聚合物产生相关影响,如Cu~(2+)、 Pb~(2+)、 Ni~(2+)、Al~(3+)等.对于胞外聚合物的提取,有高速离心法、加热法、EDTA法、NaOH法、超声法、CER法等,不同提取方法会对胞外聚合物的组分产生较大的影响.文章从胞外聚合物的性能、金属离子对胞外聚合物的影响、胞外聚合物的提取方法以及变化特征等方面阐述EPS的研究进展.     

高铁酸钾溶胞联合A/O-MBR工艺污泥减量研究

结合高铁酸钾(K_2FeO_4)溶胞技术和A/O-MBR工艺在污泥减量方面的优势,在掌握K_2FeO_4溶胞对污泥性质影响基础上,将K_2FeO_4溶胞技术应用于A/O-MBR工艺,构建A/O-MBR+K_2FeO_4溶胞组合工艺.采用序批式实验研究K_2FeO_4溶胞对污泥性质影响,结果表明,溶胞后污泥固相SS和VSS降低,液相中COD、TN和TP质量浓度明显升高.平行运行对照A/O-MBR工艺和A/O-MBR+K_2FeO_4溶胞组合工艺,结果表明,A/O-MBR+K_2FeO_4溶胞组合工艺的污泥表观产率为0. 10 kg SS/kg CODremoved,明显低于对照A/O-MBR工艺(0. 22kgSS/kg CODremoved),产生显著的污泥减量效果(54.5%);同时,与对照A/O-MBR工艺相比,A/O-MBR+K_2FeO_4溶胞组合工艺的COD去除效果变化不大,TN去除率升高,TP去除率降低.     

新型脂肪酶LipB52催化生物柴油

一种来源于荧光假单胞菌的新型脂肪酶基因lipB52在大肠杆菌BL21(DE3)中获得表达,并且利用Ni-NTA亲和柱时脂肪酶LipB52进行纯化.采用固定化脂肪酶LipB52催化大豆油与甲醇的转酯反应生产生物柴油.实验考察了温度、底物摩尔比、酶用量、有机溶剂、酶的种类以及油的类型对于反应的影响,结果表明:转酯反应的最佳反应条件为:m(酶):m(油)=20:80,n(油):n(甲醇)=1:4、正庚烷作为溶剂、反应温度为30℃,在此条件下脂肪酶LipB52表现出很高的催化活性,反应40 h后甲酯的产率高达92%.     

影响燃煤还原气体生成特性的因素

利用傅里叶红外气体分析设备,在自制的固定床反应器上对能够显著影响再燃煤还原气体生成特性的因素进行了实验研究.结果表明,神木煤在N2和CO2气氛下受热生成的还原气体主要有CO、CH4和HCN4·CO2气氛有利于原料煤中的C更多地转化为CO,CH4在N2和CO2气氛下的生成特性及产率相近.O2对神木煤的CO、CH4及HCN的生成特性影响很大,氧的存在降低了CO开始形成的温度及产率,也降低了CH4的生成温度和产率.O2使得HCN开始生成的温度大幅度降低,当w(O2)为6%时HCN的产率明显增加,同时O2的存在还增加了NO的产率.无论是在N2气氛还是在CO2气氛下,快速升温时CH4的产率均高于程序升温时的值,但CO的产率均小于程序升温时的值.升温速率对HCN的影响与煤种有关,除TC煤外,快速升温时HCN的产率均比程序升温时低.     

重组脂肪酶自诱导发酵培养基优化

【目的】优化自动诱导发酵培养基,提高脂肪酶产量。【方法】通过对构建的一株转座子整合型脂肪酶重组菌株,采用自动诱导发酵表达方法,并结合CCD响应面实验设计方法,对自动诱导培养基中的碳源进行优化,获得了1个二次模型用于描述发酵培养基中碳源对产脂肪酶的影响。【结果】优化后的最适自动诱导培养基(W/V)组成为glycerol 2.596,glucose 0.035,lactose 1.289,tryptone 1.0,yeast extract 0.5,Na_2HPO_4·12H_2O 1.79,KH_2PO_4 0.68,NH_4Cl 0.267 5,Na_2SO_4 0.071,MgSO_4·7H_2O 0.05。【结论】发酵试验表明,最优碳源培养基的比活力为R_1=6.35U/mg,比初始发酵培养基提高近3倍。     

响应面法优化醋酸钙不动杆菌菌株23的脂肪酶产酶条件

采用响应面法对醋酸钙不动杆菌(Acinetobacter calcoaceticus)菌株23的发酵产脂肪酶培养基进行优化实验。实验首先考察该菌株产酶所需的最适碳源和氮源,然后用Plackett-Burman法设计实验确定影响产酶的主要影响因素,用最陡爬坡实验逼近最大响应区域,最后通过Box-Behnken方法进行二次回归分析得到最佳的产酶条件为:营养肉汤18.4%、蛋白胨9.18%、吐温800.52%、K2HPO40.2%,橄榄油1%,MgSO40.05%,CaCl20.05%,FeSO40.1%。在该优化条件下,发酵液的脂肪酶活力可以达到15.2U/ml,比优化前提高3倍。     

利用抗药性选育盐霉素高产菌株

采用紫外线诱变和紫外线复合氯化锂处理盐霉素生产菌株,利用含棕榈油的筛选平板,结合选育脂肪酶活力高的菌株,成功获得产量提高并适应棕榈油发酵的高产菌株Ae-4.棕榈油完全替代豆油摇瓶113 h发酵的产量是豆油发酵的88.7%(出发株为69.6%).进一步通过选育抗药性突变株获得了抗链霉素的高产突变株E4Lt-1(摇瓶发酵产量提高57.4%)和抗利福霉素的高产突变株Rift-1-2(摇瓶发酵产量提高44.9%).     

阿奇霉素相关物的制备

为解决国内缺少阿奇霉素杂质对照品的现状,加强阿奇霉素的质量控制,通过化学合成或半制备液相色谱分离的方法制备了红霉素A 6,9-亚胺醚,红霉素A 9,11-亚胺醚,3-去克拉定糖阿奇霉素,3’-N-去甲基阿奇霉素,3’-N-去甲基-3’-N-对-乙酰胺基苯磺酰基阿奇霉素和阿奇霉素B 6种杂质的纯品. 经过核磁共振、质谱等手段确认各化合物结构正确;并从生产工艺出发详细分析了各杂质的来源和可行的控制方法.      

米根霉产脂肪酶的条件及酶学性质

对用于全细胞生物催化剂的米根霉菌株产酶条件的优化及脂肪酶的酶学性质进行了研究。结果表明,在250 mL三角瓶液体培养中,米根霉适宜的产酶条件为：氮源为2%胰蛋白胨与0.1%NaNO3复合,碳源为0.3%的大豆油,培养基初始pH=5.5,培养温度28℃,培养时间约58 h。酶学性质研究表明,所产脂肪酶的最适pH=7.5,最适温度为35℃,该酶在pH为7~9、温度低于40℃的范围内表现稳定,Mg2+对酶活力有一定促进作用。     

Studies on optimization of nitrogen sources for astaxanthin production by Phaffia rhodozyma

Fermentation of Phaffia rhodozyma is a major method for producing astaxanthin, an important pigment with industrial and pharmaceutical application. To improve astaxanthin productivity, single factor and mixture design experiments were used to investigate the effects of nitrogen source on Phaffia rhodozyma cultivation and astaxanthin production. Results of single factor experiments showed nitrogen source could significantly affect P. rhodozyma cultivation with respect to carbon source utilization, yeast growth and astaxanthin accumulation. Further studies of mixture design experiments using (NH₄)₂SO₄, KNO₃ and beef extract as nitrogen sources indicated that the proportion of three nitrogen sources was very important to astaxanthin production. Validation experiments showed that the optimal nitrogen source was composed of 0.28 g/L (NH₄)₂SO₄, 0.49 g/L KNO₃ and 1.19 g/L beef extract. The kinetic characteristics of batch cultivation were investigated in a 5-L pH-stat fermentor. The maximum amount of biomass and highest astaxanthin yield in terms of volume and in terms of biomass were 7.71 mg/L and 1.00 mg/g, respectively.     

Methoprene对SpltNPV增殖及其LC50的影响

 通过对斜纹夜蛾核多角体病毒(SpltNPV)在其不同龄期宿主体内增殖情况的研究,探索保幼激素类似物(JHA)methoprene促进SpltNPV在其宿主体内增殖的途径,为今后广泛利用methoprene进行高效率、低成本增殖昆虫杆状病毒杀虫剂提供理论依据和方法.运用正交组合的方法筛选3种主要因子(病毒感染浓度、methoprene用量和methoprene施用时间)对提高病毒增殖产量进行最佳组合实验.实验确立了以1×10⁷PIBs/mL感染6龄刚蜕皮的斜纹夜蛾幼虫,并于感染第1天滴加10μL methoprene的最佳组合方法,病毒总产量和平均病毒产量分别可达1 856.0×10⁸PIBs和62.2×10⁸PIBs.并测定了methoprene处理对SpltNPV病毒LC₅₀的影响.经methoprene处理后,病毒的LC₅₀由1.578×10⁷PIBs/mL增加至9.151×10⁷PIBs/mL.     

新型免疫抑制剂FTY-720的合成

分别以苯为原料, 经傅克酰基化、 还原、 酰化、 缩合、 还原羰基、 还原酯基、 去乙酰化、 成盐反应和以苯乙醇为原料, 经氯化、 傅克酰基化、 缩合、 还原羰基、 还原酯基、 去乙酰化、 成盐反应合成目标分子FTY-720, 总收率分别为17%和21%. 各关键中间体及FTY-720的结构经红外光谱、 核磁共振氢谱及碳谱、 质谱等得到确证.     

The occurrence and significance of C25HBI in Cenozoic saline lacustrine source rocks from the Western Qaidam Basin,NW China

The saline lacustrine deposit of the Oligocene Lower Ganchaigou Formation is the main source rock for the Western Qaidam Basin,NW China.In this study,abundant highly branched isoprenoids with 25 carbon atoms (C25HBI) were detected in the upper section of the Lower Ganchaigou Formation.C25HBI is a biomarker for diatoms,and can provide information regarding biogeochemical processes during production and preservation of sedimentary organic matter.The carbon isotopic values of C25HBI in these source rocks were in the range of-18‰ to-20‰.The relative enrichment in 13C of C25HBI suggests that these isoprenoids were derived from diatom blooms.In this case,the diatoms used HCO3-as an additional carbon source to dissolved CO2 in water column due to their high biological productivity.Conversely,the diatom blooms indicated an abundant nutrient supply to the environment and high primary productivity.Thus,the occurrence of 13C-enriched C25HBI could be an ideal marker for good source rocks.The decreased concentration of CO2(aq) in the water column induced by diatom blooms can result in an enrichment in 13C of organic matter synthesized by primary producers.This may be a possible reason for the occurrence of 13C-enriched organic matter in the Cenozoic source rocks of the Western Qaidam Basin.Previous studies have shown that the high carbon number n-alkanes sourced from diatoms have no carbon preference.Hence,the sources of n-alkanes in regional source rocks are complex,and should be considered when discussing the sources of organic matter in future studies.