Na^＋、Ca^2＋、H2O2诱导黄瓜叶片细胞凋亡研究

用组织培养技术获得黄瓜叶片的愈伤组织,进而培养其悬浮细胞,然后用Na^＋、Ca^2＋、H2O2分别诱导黄瓜叶片悬浮细胞凋亡,并用显微镜观察和琼脂糖凝胶电泳检测其DNA。Na^＋（1．4mol／L）,Ca^2＋（500mmol／L）,H2O2（10％）作用于黄瓜叶片悬浮细胞后,用显微镜观察到凋亡小体;DNA琼脂糖凝胶电泳检测出凋亡时形成的DNA ladder。结果表明：Na^2＋（1．4mol／L）,Ca^2＋（500rmnol／L）,H2O2（10％）都能诱导黄瓜叶片悬浮细胞凋亡。     

交替氧化酶对AlCl_3胁迫下烟草BY-2悬浮细胞死亡发生的影响

以烟草悬浮细胞BY-2为材料,探讨了在Al Cl3胁迫下交替氧化酶对烟草悬浮细胞死亡发生的影响.结果表明,随着Al Cl3的增加(30、50、80、100μmol/L),烟草悬浮细胞的细胞死亡水平逐渐上升,交替呼吸途径的容量水平随之增大.在Al Cl3胁迫下细胞中H2O2的浓度也有所增加.较之在Al Cl3处理下的细胞,将交替氧化酶抑制剂水杨基氧肟酸预处理后的细胞再置于Al Cl3的胁迫下,则导致了细胞死亡水平和H2O2含量的进一步上升;H2O2可以以剂量依赖的方式导致细胞死亡水平的上升,H2O2的清除剂可以降低Al Cl3胁迫及H2O2处理下细胞死亡的水平.在Al Cl3胁迫下植物细胞能够提升交替呼吸途径的容量,从而在一定程度上限制了细胞H2O2的积累,并由此缓解了细胞死亡的发生.     

NADPH氧化酶NtrbohD参与烟草悬浮细胞ABA诱导的H2O2快速产生过程

研究了烟草BY-2悬浮细胞在脱落酸（ABA）诱导下产生过氧化氢（H2O2）的机制,发现ABA能够显著诱导H2O2快速产生,且H2O2主要是由超氧化物歧化酶催化超氧阴离子产生的．ABA处理可导致烟草悬浮细胞质膜NADPH氧化酶活性以时间依赖的方式快速增加,其增加的幅度和时间与ABA诱导H2O2积累一致,而且,这些增加的效应能够被NADPH氧化酶抑制剂碘二苯和咪唑显著抑制,说明质膜NADPH氧化酶参与烟草悬浮细胞H2O2快速积累过程．另外,用RT-PCR和蛋白印迹技术分析了烟草质膜NADPH氧化酶基因NtrbohD的表达水平,发现该基因在mRNA和蛋白水平的表达受ABA上调,表明NtrbohD参与烟草悬浮细胞ABA诱导H2O2快速产生过程．结果说明,ABA能够诱导悬浮细胞通过NADPH氧化酶快速产生活性氧,提示NAD-PH氧化酶和H2O2可能是植物细胞中ABA信号转导途径的重要成分。     

ZnCl_2胁迫下抗氰呼吸对烟草细胞活力和过氧化氢水平的影响

以烟草悬浮细胞BY-2为材料,探讨了ZnCl2胁迫下抗氰呼吸对细胞活性和过氧化氢产生的影响。结果表明,随着ZnCl2胁迫程度的增加,BY-2烟草悬浮细胞活力逐渐降低,抗氰呼吸的水平却显著上升。较高水平ZnCl2(150mmol/L)的胁迫导致细胞活力的显著性下降及过氧化氢水平的显著性上升;外源过氧化氢的处理也能够导致细胞活力的下降;而H2O2的清除剂则缓解了ZnCl2胁迫处理下细胞活力的下降,表明ZnCl2胁迫处理下细胞活力的下降和过氧化氢水平的上升有关。进一步研究了在ZnCl2胁迫下抗氰呼吸对细胞活力及过氧化氢水平的影响。结果显示,在较高水平ZnCl2(150mmol/L)胁迫下加入抗氰呼吸的抑制剂导致细胞活力的进一步下降和过氧化氢的进一步上升。上述结果表明,抗氰呼吸可以缓解ZnCl2胁迫下细胞的氧化压力和细胞活力的下降,在其细胞抵抗高水平ZnCl2胁迫中扮演了一定的角色。     

DMSO诱导烟草BY-2悬浮细胞的凋亡

烟草BY-2悬浮细胞经不同浓度的DMSO处理后发现,2％DMSO处理可导致细胞核染色质凝集或核结构解体,琼脂糖凝胶电泳显示基因组DNA降解成明显的梯状条带,从而表现出典型的细胞凋亡特征．对微丝骨架的进一步观察发现,2％DMSO处理引起细胞内微丝骨架分布异常,造成微丝骨架不同程度地断裂．这些结果为进一步研究微丝骨架在植物细胞凋亡中的功能奠定了基础．     

H_2O_2处理对采后樱桃番茄和芒果抗冷性的影响

为了探讨解决冷敏型樱桃番茄(Lycopersicum esculentum Mill.Var.cerasiforme)、芒果(Mangifera indica L.)冷藏中的冷害问题,用0.001 mmol/L、0.010 mmol/L、0.100 mmol/L过氧化氢(H2O2)和冷激、热激对樱桃番茄和芒果处理后,在2℃冷藏中观测了冷害发生情况、色度及果实中H2O2和丙二醛(MDA)含量.结果表明,樱桃番茄H2O2 0.100mmol/L处理、芒果H2O2 0.001 mmol/L处理比对照蒸馏水处理具有较低的冷害发生率、冷害指数、H2O2和MDA含量,樱桃番茄的色度值也高于对照处理.对樱桃番茄减轻冷害的效果与冷激和热激处理效果相当,对芒果的效果与冷激处理效果相当.冷藏前用H2O2溶液处理可以提高樱桃番茄和芒果冷藏中的抗冷性,减轻冷害.     

过氧化氢介导烟草叶片光合功能衰退的研究

研究了不同浓度H2O2处理下烟草（Nicotiana tabacum L．cv NC89＆JYH）光合功能的衰退．结果表明，0．1mmol／L、1mmol／LH202对烟草离体叶片基本无影响，10mmol／L、100mmol／LH202对烟草离体和连体叶片的光合作用均有不同程度的抑制作用．H2O2处理连体叶片时类囊体光系统Ⅰ（PSI）、光系统Ⅱ（PSⅡ）、全电子传递活性表现出相应的下降，H2O2处理离体叶片后，叶绿素含量的下降与内源H2O2水平上升显著相关．NC89和JYH对H2O2处理的敏感期均在叶片光合功能开始出现衰退时．     

雌激素对H_2O_2诱导PC12细胞氧化应激的保护作用研究

为了探讨雌激素对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的影响及其可能机制.用H2O2处理PC12细胞建立氧化应激模型,并加入雌激素预处理作为保护.MTT法检测细胞活力,利用荧光探针对细胞内ROS进行荧光染色检测荧光强度,Hoechst/PI荧光染色,分析细胞凋亡情况,Western blotting检测MAPK(Mitogen-Activated Protein Kinase)的磷酸化水平.结果显示:H2O2作用于PC12细胞后显著降低细胞活力,10-8～10-6mol/L的雌激素预处理后均能部分阻断H2O2对细胞活力的影响.H2O2能显著增强PC12细胞的ROS荧光强度,雌激素可明显减少H2O2处理后PC12细胞内的ROS含量.H2O2激活MAPK,而雌激素抑制了p38的磷酸化,增加了ERK的磷酸化.以上结果表明,雌激素可以拮抗H2O2诱导的氧化应激,抑制p38的磷酸化,增强ERK的磷酸化可能是其发挥保护作用的机制之一.     

H_2O_2诱导小麦叶片光合功能衰退的研究

采用不同浓度的H2O2处理小麦,研究H2O2对小麦叶片光合功能的影响.结果表明:1 mmol.L-1H2O2对小麦叶片光合作用基本无影响,10、100、200 mmol.L-1H2O2对小麦离体和连体叶片的光合作用均有不同程度的抑制作用,表现为光合速率、叶绿素含量下降.叶绿体超微结构显示10 mmol.L-1H2O2对其有影响,200 mmol.L-1H2O2处理后基粒明显破坏,类囊体膜无序.核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶加氧酶(Rubisco)大小亚基和羧化活性在20 mmol.L-1H2O2逆境下变化小,100 mmol.L-1H2O2处理,Rubisco大小亚基降解明显,羧化活性微弱.说明H2O2诱导小麦叶片光合功能衰退.     

ABA和H2 O2在NaCl诱导的气孔关闭中的作用

以拟南芥野生型（wt）和ABA合成缺失突变体（aba3）为材料，采用表皮生物分析法研究了NaCl胁迫条件下，ABA和H2O2在气孔关闭中的作用。结果表明：100mmol/L的NaCl可有效诱导wt气孔关闭，而对aba3的气孔运动无明显影响；10^-2mmol/L的H2O2处理或100mmol/L的NaCl与10^-2mmol/L ABA共处理可有效诱导wt与aba3的气孔关闭，且幅度类似；H2O2的性清除剂CAT可部分逆转NaCl处理及NaCl与ABA共处理引起的气孔关闭，因此推测，NaCl胁迫条件下，植物保卫细胞内ABA浓度升高，诱导H2O2的产生，进而诱导了气孔关闭。     

Fenton氧化法去除造纸法再造烟叶废水COD的研究

采用Fenton 氧化法深度处理经过生化处理后的造纸法再造烟叶废水,研究了H2O2用量、Fe2+用量、反应时间以及初始pH因素对CODCr去除率的影响,确定了最佳试验条件.结果表明,n(H2O2)∶n(Fe2+)为6∶1,H2O2用量36.75 mmol/L,Fe2+用量6.125 mmol/L,搅拌反应时间30 min,初始pH 为3时,CODCr去除率达最大值为72.26%,再添加PAM进行絮凝沉降处理,最终出水水质CODCr为60 mg/L.     

川芎嗪抑制蟾蜍离体嗜铬细胞分泌的实验研究

目的　研究川芎嗪 (TMP)对由乙酰胆碱 (ACh)或高K+ 引起的离体蟾蜍肾上腺髓质嗜铬细胞儿茶酚胺分泌的抑制作用。方法　用胶原酶 ( 0 5mg/mL)消化蟾蜍肾上腺 ,再用牛血清白蛋白 ( 5mg/mL)终止消化 ,获得离体的蟾蜍肾上腺髓质嗜铬细胞。用乙酰胆碱 ( 2 0 0 μmol L)、高K+ ( 6 5mmol L)、川芎嗪 ( 0 5× 10 - 6 ～ 2× 10 - 6 mmol L)或它们的混合液分别作用于离体嗜铬细胞 ,测定其儿茶酚胺 (CA)的分泌量。结果　川芎嗪对乙酰胆碱或高K+ 引起的分泌活性均有明显的抑制作用。结论　离体蟾蜍肾上腺髓质嗜铬细胞可作为刺激_分泌耦联的模型 ;川芎嗪可能是一种钙离子拮抗剂     

杯芳烃衍生物与镝(III)配合物在重水中的荧光特性

水溶性杯[4]芳烃(L4)可以与Dy3+、Tb3+等稀土离子形成能量传递配合物,在水溶液中L4·Dy3+配合物的荧光易被O-H高能振动猝灭,在D2O溶液中L4·Dy3+配合物的荧光显著增强,ID/IH=8.8;水分子的O-H高能振动对L4·Tb3+配合物的荧光强度影响很小,ID/IH=1.1。选择较强激发光,可以用L4检测Dy3+,Dy3+浓度在5×10-8～10-6molL-1范围内与荧光强度有良好线性关系。     

Nicotinamide-Induced Apoptosis Can Be Enhanced by Melatonin in Mouse Myeloma Cells

Introduction Apoptosis is a genetically controlled cell death process which is indispensable to embryogenesis, organ devel- opment, homeostasis, and pathological processes in the life cycle of living things. Apoptosis is characterized by a series of typic…     

H2O2诱导玉米根尖细胞凋亡的形态,生化及分子生物学证据

植物细胞程序性死亡是近年来植物细胞生物学的研究热点之一。已有证据表明Ｈ２Ｏ２能诱导拟南芥、豌豆,烟草等植物体外培养细胞的凋亡。以玉米根尖为材料,从原位即细胞和染色体水平（染色体ＤＮＡ断裂）以及分子水平（ＤＮＡ）对Ｈ２Ｏ２诱导的细胞死亡作了检测。结果表明Ｈ２Ｏ２能诱导玉米根尖细胞凋亡,并具有动物细胞凋亡的典型形态和生化特征如染色质凝缩,核降解以及出现ＤＮＡ Ｌａｄｄｅｒ等。可见Ｈ２Ｏ２诱导的细胞凋亡     

H2O2对铁负载膨润土吸附铀(VI)影响的试验研究

系统研究了过氧化氢(H2O2)影响铁负载膨润土吸附铀(Ⅵ)的效果与机理.通过改变pH、H2O2浓度、初始U(Ⅵ)浓度,探讨了加入H2O2的条件下铁负载膨润土对U(Ⅵ)的吸附过程,并采用扫描电镜(SEM)、红外光谱(FT-IR)等对吸附U(Ⅵ)前后的铁负载膨润土进行了表征.试验结果表明,溶液初始pH为3～6时,H2O2能使铁负载膨润土对U(Ⅵ)的吸附率达到98%以上;H2O2浓度对反应平衡时的吸附性能影响不大;随着U(Ⅵ)浓度的增大,H2O2对铁负载膨润土吸附U(Ⅵ)的促进作用也随之增强,U(Ⅵ)浓度为0.64 mmol/L时,吸附量从1.74 mmol/g(铁负载膨润土)增至3.13 mmol/g(H2O2和铁负载膨润土的复合体系).     

GPX3参与了H2O2对保卫细胞质膜钾通道的调控

通过表皮条生物分析、失水率测定及膜片钳实验研究谷氨酸过氧化物酶3(GPX3)能够调节保卫细胞质膜钾通道活性,并因此来介导H2O2诱导的拟南芥气孔关闭过程.与野生型Col-0相比,gpx3缺失突变在气孔开度和细胞失水方面均有较大差异.全细胞膜片钳模式下,1mmol/L的H2O2处理使野生型保卫细胞质膜钾离子通道外向电流从50pA左右激增到240pA左右,而gpx3的电流则变化不大.单通道电流的进一步分析表明gpx3不能像野生型一样对1mmol/L的H2O2处理产生明显反应,野生型与突变体的单通道电流差距高达10倍以上.据此推断GPX3是通过特异地调节外向钾通道来介导H2O2的信号传递.     

高渗诱导的LYCD对H2O2和紫外线氧化损伤酵母细胞的保护作用

探讨了H2O2和紫外线诱导下，活性酵母细胞衍生物（LYCD）对酵母细胞氧化损伤的保护作用。在H2O2（10mmol／L）和紫外线（20W紫外灯下30cm处照射60s）氧化损伤酵母细胞模型中添加LYCD后，细胞存活率显著上升，且有剂量依赖性。LYCD提高了紫外线氧化损伤细胞上清液中谷胱甘肽（GSH）含量、超氧化物歧化酶（SOD）比活力和过氧化氢酶（CAT）比活力，降低了丙二醛（MDA）水平。     

红豆杉细胞植板方法的研究

在红豆杉细胞植板中,适宜的培养基是优化的ＭＳ培养基,其中ＮＡＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ,６ＢＡ浓度为０．５ｍｇ／Ｌ;培养细胞生长周期约４０ｄ;培养基中最优碳源浓度是：蔗糖３０ｇ／Ｌ、葡萄糖１０ｇ／Ｌ．无机盐最佳浓度是：ＮＨ＋４１０ｍｍｏｌ／Ｌ,ＮＯ－３４０ｍｍｏｌ／Ｌ,ＰＯ３－４１．２５ｍｍｏｌ／Ｌ．研究表明,培养基的ｐＨ值与植板率密切相关．氨基酸及维生素等有机成分能明显促进细胞生长．来自细胞悬浮培养物的条件培养基能显著地促进红豆杉培养细胞的单细胞在低密度植板时的克隆形成     

Involvement of NADPH oxidase NtrbohD in the rapid production of H2O2 induced by ABA in cultured tobacco cell line BY-2

The mechanisms for the production of hydrogen peroxide （H2O2） induced by abscisic acid （ABA） were investigated in suspension culture cells of tobacco BY-2 cells. The results showed that the immediate generation of H2O2, which was mainly derived from super-oxide dismutase-catalyzed dismutation of superoxide radical, was significantly induced by ABA. Furthermore, treatment of the cultured tobacco cells with ABA resulted in a time-dependent quick increase in plasma membrane （PM） NADPH oxidase activity, which coin- cided on time and magnitude with the elevation in ABA-induced accumulation of H2O2. Moreover, these enhanced effects were pro- nouncedly inhibited by two NADPH oxidase inhibitors, diphenylene iodonium and imidazole, suggesting that PM NADPH oxidase is involved in the rapid accumulation of H2O2 in cultured tobacco cells. In addition, analysis of the expression level of NtrbohD, a PM NADPH oxidase gene in tobacco, by RT-PCR and protein gel blot revealed that the gene at both mRNA and protein levels was upregulated by ABA, indicating that NtrbohD participates in the ABA-stimulated rapid production of H2O2 in tobacco culture cells. Taken together, these findings suggest that ABA induces the rapid accumulation of reactive oxygen species via NADPH oxidase in sus-pension culture cells of tobacco, and that NADPH oxidase and H2O2 appear to be important components in ABA signal transduction pathway in plants.