不同浓度不同氮源对小麦离体叶谷氨酰胺合成酶及其相关酶的影响

利用酶活测定和Northern分子杂变等技术，研究了小麦幼苗离体叶片在不同浓度的不同氮源供应下，其谷氨酰胺合成酶(Gs)、天冬酰胺合成酶(As)、硝酸还原酶(NR)以及Gs基因在转录水平GS-mRNA的变化．结果表明：NH 4处理的小麦，其叶部GS活性比N0f处理的高，NortherⅡ杂交结果说明GS-mRNA转录量与GS活性一致；NO-3可激活NR活性，对AS有较明显的诱导作用．     

固氮鱼腥藻HB686固氮_放氢与谷氨酰胺合成酶的关系

固氮鱼腥藻HB686(Anabaena azotica HB686)的固氮和放氢被氨抑制与蛋氨酸砜亚胺(MSX)解除氨抑制的作用呈平行关系.谷氨酰胺能抑制固氮和放氢,而对谷氨酰胺合成酶(GS)和吸氢酶却有激活作用.固氮血腥藻在Mg~(2+)介质中的乙炔还原活性和放氢量皆比在Mn~(2+)介质中的高,而GS的活性则相反.不同波长的光照射对固氮、放氢和GS活性有不同的影响.     

不同小麦品种叶片衰老过程中谷氨酰胺合成酶和蛋白水解酶的活性变化

五个不同的半矮秆小麦品种在叶片自然衰老过程中,蛋白水解酶活性、可溶性蛋白含量、全N含量等方面没有显著差异,而只有谷氨酰胺合成酶(GS)活性过早的提高与秸杆N的残留量和产量有明显的负相关性.     

固氮鱼腥藻_AnabaenaazoticaHB686_谷氨酰胺合成酶的生化特性

固氨鱼腥藻HB686谷氨酰胺合成酶(GS)具有Mg~(2 )-依赖的生物合成活性和Mn~(2 )-依赖的γ-谷氨酰基转移酶活性.生物合成活性对ATP、谷氨酸和氯化铵有较强的亲和力,其Km值分别为0.80mM、0.48mM和0.68mM.γ-谷氨酰基转移酶对谷氨酰胺和羟氨的Km值分别为2.0mM和0.9mM.作者研究了pH和温度对谷氨酰胺合成酶活性的影响,发现蛋氨酸亚砜、尿素、铵离子、天冬氨酸和甘氨酸对谷氨酰胺合成酶均表现出不同程度的抑制作用.某些金属离子对维持谷氨酰胺合成酶的稳定有一定的作用.     

He-Ne激光和增强UV-B辐射对小麦幼苗氮代谢的影响

为研究He-Ne激光对增强UV-B辐射后损伤的修复作用,采用5 mW.mm-2He-Ne激光辐照、10.08 kJ.m2.d1的UV-B辐射及二者组合对舜麦1718号小麦幼苗进行处理,测定各处理组小麦幼苗硝酸还原酶活性、一氧化氮合成酶含量和膜透性的变化.分析结果显示:He-Ne激光辐照可使UV-B辐射后小麦幼苗硝酸还原酶活力升高1.2倍,显著改善了增强UV-B辐射后硝酸还原酶活性降低的程度;而一氧化氮合成酶(NOS)含量B组和BL组分别高于CK组45.1%和17.8%,现促进作用.     

植物谷氨酰胺合成酶研究进展

谷氨酰胺合成酶(GS)是参与高等植物氨同化过程的关键酶．介绍了高等植物谷氨酰胺合成酶及其同工酶的种类、性质、生理作用和分子生物学等方面的研究进展及在植物抗盐性方面的作用。     

姜黄素对老年鼠脑内氧化性平衡和星形胶质细胞的影响

以SD大鼠为动物模型,采用Western blotting、酶活性测定、免疫荧光和高效液相色谱-质谱(LC-MS)方法考察姜黄素处理12周后正常衰老大鼠皮层和海马的氧化性平衡和星形胶质细胞形态功能的变化.结果显示,姜黄素降低了老年鼠脑内氧化产物MDA和8-OHdG的含量,提升了γ-谷氨酰胺半胱氨酸合成酶(GCS)的活性并且促进GSH的产生,提示姜黄素可显著改善伴随正常衰老过程的脑内氧化性平衡;同时姜黄素可以抑制胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的过度表达,提升GS活性,增加GDNF水平和D-丝氨酸含量,表明其抑制星形胶质细胞过度活化的同时也改善了星形胶质细胞的功能.     

磁化水对小麦、小白菜生长和生理效应的初步研究

不同磁场强度(500GS、1000GS、1250GS)的磁化水(magnetic water),对小白菜种子萌发、幼苗生长有促进作用。1000GS磁化水灌溉小白菜,产量提高9-17％。磁化水处理,能提高小麦根的活力和束缚水(bound water)含量;提高小白菜的呼吸速度。硝酸还原酶的活性,但浸出液的电导率均降低。 1000GS、1250GS的磁化水处理小麦,过氧化物酶同功酶增加一个酶带。500GS、1000GS磁化水处理小白菜,过氧化物酶同功酶亦增加一个酶带。     

杨树不同器官蛋白质和3种氮代谢酶的动态变化

以杨树无性系797杨(Populus deltoides×P.euramericana)1年生苗为材料,对不同器官蛋白质含量与硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶、蛋白酶等3种氮代谢关键酶的动态变化与关系进行了研究。结果表明:杨树不同器官(木质部、皮层、根部)蛋白质含量在芽萌发期间(4月中旬)最低,木质部和皮层是杨树越冬期间贮藏蛋白质的主要贮存场所,根部相对较低。叶片和根部硝酸还原酶(NR)活性分别在9月初和10月中旬达到最大,落叶前后明显下降。叶片谷氨酰胺合成酶(GS)活性在5月中旬和10月中旬有两次高峰,与蛋白质变化趋势一致,而根部在芽萌发期间达到最大,与蛋白质变化趋势相反,两部位GS活性落叶前后明显下降。根部蛋白酶在春季芽萌发期间随着贮藏蛋白质的降解其活性逐渐上升,落叶前后,亦呈上升趋势,与蛋白质含量呈显著的负相关关系。     

水分胁迫下Ca~(2+)、PEG预处理对小麦幼苗硝酸还原酶活性的影响

本文通过Ca~(2+)、PEG预处理研究水分胁迫下小麦幼苗硝酸还原酶(NR)活性的变化。结果表明,Ca~(2+)、PEG处理可明显提高水分胁迫下小麦幼苗的NR活性,增强吸水、保水的能力,对植株生长的抑制减轻。     

Overexpression of glutamine synthetases confers transgenic rice herbicide resistance

Glutamine synthetase (GS, E.C.6.3.1.2) is a key enzyme involved in the assimilation of inorganic nitrogen in higher plants and gram-negative microorganisms. GS is the targeting enzyme of a herbicide phosphinothricin (PPT) or Basta. In order to generate PPT-resistant transgenic rice via overexpression of GS, we constructed a plant expression vector p2GS harboring two different isoenzymes GS1 and GS2 cDNAs under the control of constitutive promoters of rice Act1 and maize Ubiquitin(Ubi) genes. The p2GS was introduced into rice genome by Agrobacterium-mediated transformation and confirmed by PCR and Southern blot hybridization. GS-transgene expression was first detected by Northern blot analyses. Results from Basta test indicated that GS-transgenic plants can tolerate as high as 0.3% Basta solution. In addition, our results also demonstrated that GS overexpression conferred transformed rice calli PPT resistance. Thus, GS cassette can serve as a selective marker gene instead of bar cassette for selection of PPT transformants.     

一株谷氨酰胺合成酶高产菌株的酶学分析及其基因的克隆分析

对谷氨酰胺合成酶菌球形节杆菌(Arthrobacter globiformis)突变菌株Y3进行分析.其谷氨酰胺合成酶摇瓶发酵单位是原始菌株的2.81倍;最适反应温度为40℃;最适pH为6.5.以突变菌株和原始菌株基因组为模板,通过同源克隆策略,成功地获得了球形节杆菌谷氨酰胺合成酶基因gln片段.通过序列比对,突变菌株gln基因在第409 bp处产生T→C的碱基的突变,该处突变使酪氨酸(Tyr409)被组氨酸(His409)取代,该突变解决了谷氨酰胺合成酶腺苷酰基化问题,保证了其在高浓度铵盐条件下保持酶活性.     

一株高产谷氨酰胺合成酶的LNU 0165菌的鉴定

谷氨酰胺合成酶是应用广泛的生物酶类，以LNU0165为实验出发菌株，对不同pH、温度条件下产谷氨酰胺合成酶的最佳发酵条件进行了研究，通过测定其谷氨酰胺合成酶酶活力，确定LNU0165为高产菌株.从分子水平上对该菌株进行16S rRNA序列分析及同源性比较，以及生理生化的鉴定．根据LNU0165菌株16SrRNA与GenBank数据库中Arthrobacter globiformis的16S rRNA的序列具有99％的同源性，确定LNU0165为球形节杆菌（Arthrobacter globiformis）．     

Changes of levels of glutamine synthetase isoforms in roots and leaves in response to nitrogen fertilizer application at different growth stages in irrigated rice

Nitrogen is a key element to control the growth and yield of crops. Fertilizer urea nitrogen (N) 60,45, and 30 kg/hm² was applied at three different stages, midtillering, panicle initiation, and flowering, of the growth and development of rice plants, respectively. At both midtillering and panicle initiation, the total activity of glutamine synthetase (GS) in rice roots and leaves was incrased remarkably as a result of a large amount of ammonia absorbed by roots. Native-PAGE and activity staining showed that the increase of total activity in rice roots and leaves was due to the synthesis of GSrb in roots and GS2 in leaves and that the activity of GSra in roots and GS1 in leaves remained constant. The results showed that the assimilation of external nitrogen was carried out by GSrb but not GSra in rice roots and that the activitry of GS2 was induced also by the external nitrogen, and that GSrb played main role in meeting the needs of the rapid tillering for nitrogen. At flowering, the activity of GS in rice roots and leaves did not change almost after topdressing. These rssults suggest that the change of GS activity in rice roots may use as a measure of the utilization efficiency of the fertilizer. Supported by the National Natural Science Foundation of China, Natural Science Foundation of Hubei Province, and International Rice Institute, P. O. Box 933 1099 Manila, Philippines Zhang Chufu: born in 1946, Professor, to whom Correspondence should be addressed     

加拿大一枝黄花水浸提液对禾谷类作物的影响

研究了加拿大一枝黄花水浸提液对玉米、高粱、小麦3种作物种子和幼苗的影响.实验结果表明:高浓度的水浸提液对3种作物种子萌发和幼苗生长有明显的抑制作用,而低浓度则不明显;相同浓度,地上茎叶水浸提液的抑制作用要强于地下部分.实验还表明高浓度水浸提液显著抑制3种作物种子淀粉酶活力和幼苗根系活力.     

沼泽红假单胞菌固氮酶活性的调节

本文研究了沼泽红假单胞菌谷氨酰胺合成（简称ＧＳ）对其固氮酶活性的调节。外源氨的加入迅速抑制固氮酶活性，同时ＧＳ被高度腺苷酰化，随着氨的消耗，固氮酶活性逐渐恢复，ＧＳ腺苷酰化程度也逐渐降低。ＧＳ专一的不可逆抑制剂甲硫氨酸亚砜亚胺（简称ＭＳＸ）可以解除氨和谷氨酰胺对固氮酶的抑制作用。     

高氧对新生小鼠视网膜谷氨酸释放的影响

为研究新生小鼠高氧状态下视网膜谷氨酸摩尔质量浓度的变化及其机制,探讨谷氨酸在高氧视网膜损伤中的作用,实验组将新生小鼠置于体积分数为95%的高氧环境中造成视网膜损伤,对照组将新生小鼠置于正常空气中,HE染色观察视网膜损伤情况,多功能酶标仪检测视网膜谷氨酸(Glu)摩尔质量浓度变化,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测视网膜谷氨酸转运体(GLAST)与谷氨酰胺合成酶(GS)mRNA表达情况.结果发现,与空气对照组比较,高氧处理组视网膜受损,视网膜Glu摩尔质量浓度增加,GLAST和GS mRNA表达下降（P<0.05）.高氧可导致新生小鼠视网膜的谷氨酸增高,其机制与GLAST和GS mRNA表达下降有关.谷氨酸增加可能是高氧导致视网膜损伤的原因之一.