近红外荧光探针法测定核酸的研究

以阳离子花菁染料为荧光探针, 依近红外荧光猝灭测定核酸． 最大激发及发射波长分别为７６５ 、７９０ｎｍ ． 核酸测定的线性范围为０－０８ ～１－２μｇ／ｍ Ｌ（ＣＴＤＮＡ 及ＳＭ ＤＮＡ） , ０－１ ～１－６μｇ／ｍＬ（ｙｅａｓｔ ＲＮＡ） ．     

双羧型1,8-萘酰亚胺探针与DNA的键合行为及抗肿瘤作用

在合成一系列具有不同亚胺基侧链长度双羧基型1,8-萘酰亚胺探针的基础上,采用红外光谱、紫外可见吸收光谱、荧光光谱、圆二色谱和差热分析试验研究探针与小牛胸腺DNA(Ct-DNA)的键合行为.同时通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)染色法研究化合物对A549(人肺癌细胞)、Hela(人宫颈癌细胞)、Bel-7402(人肝癌细胞)和HL-60(白血病细胞)等细胞株的体外抗肿瘤活性,结果表明a～e探针作为DNA嵌入剂与Ct-DNA作用显示出中性粘合.此外,将a～e探针加入到小牛胸腺DNA(Ct-DNA)的溶液中后,荧光发射谱图中产生新的发射峰,这表明探针嵌入小牛胸腺DNA(Ct-DNA)中.因此,可以将其作为DNA嵌入剂且探针a对A549细胞显示良好的抑制活性,优于阳性对照顺铂.     

核酸的荧光分析进展

评述了核酸的荧光探针应用进展,并讨论了核酸荧光探针的发展趋势.     

1,2,4-三羟基蒽醌-铝体系核酸荧光探针的研究、应用

介绍了一种新的核酸荧光探针, 它与ＤＮＡ 作用产生了一种新的荧光现象, 本文对产生该现象的机理进行了深入的探讨, 并将其应用到了对核酸的分析测定中．     

核酸花菁探针中间体-2,3,3-三甲基吲哚-N-乙酸的合成与表征

花菁类近红外荧光探针量子产率高、光稳定性好,广泛应用于核酸及其他生物分子的标记和检测[1].近年来,双-嵌花菁荧光探针安全方便、高灵敏度、低背景,作为一类理想核酸探针更是发展迅速[2].然而,由于花菁染料水溶性较差,在实际应用中存在一定限制,故而必须在菁染料分子中引入亲水性基团,以提高菁染料的应用范围[3,4,].本文通过引人羧酸亲水基团,制备水溶性吲哚衍生物,为合成水溶性双嵌花菁染料准备中间体.     

荧光素—番红花红T能量转移体系的研究及其作为核酸荧…

研究了以能量转移作为核酸荧光探针的可能性，提出利用能量转移体系测定ＤＮＡ的新方法。该方法灵敏，快速，重现性好，ＤＮＡ测定的线性范围是０．０５－１０ｍｇ／Ｌ，检测限为０．０４７ｍｇ／Ｌ ＣＴ ＤＮＡ。     

藏红T与核酸作用的荧光特性研究

低离子强度和生理酸度下,藏红Ｔ（ＳＴ）与核酸的作用随ＳＴ与核酸的摩尔比（Ｒ）变化具有３种荧光特性,表现出３种结合机理．当Ｒ＞０３３,ＳＴ的荧光为核酸线性猝灭,最大激发波长发生紫移,但发射波长不变,是ＳＴ在核酸分子表面进行长距组装;Ｒ在０３３～０１３范围内,ＳＴ的荧光虽为核酸猝灭,但没有线性关系,表现为ＳＴ在核酸分子表面的组装与嵌入核酸碱基对结合处于微弱的平衡状态;当Ｒ＜０１３,ＤＮＡ体系产生新荧光,荧光激发峰红移,而发射波长仍保持不变,对应于ＳＴ嵌入核酸的双联碱基对之间,而ＲＮＡ体系却没有新的荧光产生．     

甲苯胺蓝荧光探针法测定核酸

核酸的定量测定在生物分析化学中是一个十分重要的课题[1].利用核酸对小分子荧光探针的荧光增强或猝灭作用来研究小分子探针和DNA的相互作用或进行核酸的定量分析,方法比较简单,应用较广[2].     

荧光探针10—甲基吖啶鎓碘盐与核酸的相互作用

荧光探针由于其灵敏度高,特别是对微环境结构敏感而被广泛应用于核酸结构与性能研究～([1])。现已探明核酸与外源和内源荧光探针可以发生多种物理性质的相互作用,然而近来核酸与核酸前体(碱基、核苷、核苷酸)参与的电子转移与空穴迁移作用成为新的研究     

羟游离基的荧光表征

提出了Ｆｅｎｔｏｎ － 荧光探针表征·ＯＨ 的新方法, 并以吖啶黄为荧光探针研究了此方法的光谱及动力学特征． 在最佳反应条件下, 对多种·ＯＨ 清除剂的能力进行了表征．     

四(4-溴)苯基铂卟啉荧光猝灭氧传感器的研究

研究了以PVC膜为支持体系,以四(4-溴)苯基铂卟啉为敏感物质的荧光猝灭氧传感器对分子氧的响应特性．该氧传感器敏感膜的最大激发波长为402nm,最大发射波长为664nm,分子氧可以有效地猝灭四(4-溴)苯基铂卟啉敏感膜的荧光．在100％N2和100％O2中的荧光强度之比大于40倍;在N2饱和和空气饱和的水中荧光强度之比大于14倍,有较高的灵敏度,其寿命大于3个月。     

表面等离子体激元增强荧光辐射的机理研究

荧光光谱技术在研究物质分子结构及物质相互作用动力学过程中具有重要应用,基于荧光的化学或生物传感器得到人们广泛研究,如何提高基于荧光传感器的灵敏度是一个重要研究课题,表面等离子体激元可有效增强荧光分子的发光强度,因而从物理机制上研究表面等离子体激元增强荧光的内函具有重要意义。本文在讨论荧光辐射基本原理的基础上,论述了基于金属的表面等离子体激元增强荧光的物理机制,主要有荧光共振能量转移、表面等离子体激元共振增强荧光辐射理论和RP模型等三种理论模型。     

乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法的建立

目的建立乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法,应用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。方法滴定病毒TCID50,筛选JEV敏感细胞,依据国标IFA法制备抗原片,并进行特异性、敏感性和稳定性试验。结果选取BHK21细胞作为JEV敏感细胞,病毒感染力滴度(TCID50)为10-8.9.mL-1;与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应;稳定性和敏感性试验显示,不同时间IFA检测灵敏度均为1∶2560;可检测到的病毒滴度最低为10-6.5.mL-1。结论建立的IFA法敏感性、特异性强,稳定性好,可用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。     

罗丹明B荧光光谱机理的研究

考察了罗丹明B浓度、溶剂的极性、pH值大小、表面活性剂的增敏等因素对罗丹明B的荧光光谱影响，探讨了以上各因素影响罗丹明B的荧光光谱的机理．结果表明，随着罗丹明B浓度的增加，荧光光谱波长红移，强度先增后减；溶剂极性增加，波长红移，荧光强度则由于溶剂特殊效应的影响而减小；pH=1．0～3．0时，荧光强度随pH的增加而增大，pH＞3．0时，荧光强度几乎无变化；阳离子表面活性剂对体系的荧光强度具有增敏作用，阴离子表面活性剂则相反．     

哈西奈德的荧光分析法研究

研究了哈西奈德与浓硫酸的反应条件及几种表面活性剂对水解产物荧光性质的影响.建立了一种测定哈西奈德的荧光光度分析方法.本法检测限为1.76×106molL1,荧光强度与浓度在2.20×106~1.10×105molL1范围内呈现良好的线性关系,方法的相对标准偏差为1.15%.     

便携式癌细胞荧光显微成像系统的设计与实现

根据荧光成像在癌症诊断分析中的机理,选择高效率的光学系统,配合高精度的半数字式对焦技术和智能图像采集融合技术,实现高性能便携式癌细胞荧光成像系统。系统选择多波段的LED光源;采用科学级面阵互补金属氧化物半导体(CMOS)探测器,配合散斑抑制二向色镜,降低背景干扰,提高检测灵敏度;采用半数字式对焦技术,实现显微镜高精细的自动对焦;采用FPGA+万兆网的结构,实现图像数据的高速传输。实验表明,基于该系统可制成质量为4 kg、功耗不到20 W的便携式癌细胞荧光成像设备,实现清晰的多谱段癌细胞荧光成像和快速检测。     

三足罗丹明B酰肼席夫碱化合物对Hg~(2+)的识别性质研究

设计、合成并表征了1种新型的三足罗丹明B酰肼席夫碱化合物1.通过紫外-可见分光光度滴定和荧光滴定研究了阳离子和化合物1的相互作用.结果表明在16种金属离子中,只有Hg~(2+)对化合物1的荧光发射强度有显著的影响,化合物1对Hg~(2+)表现出高选择性和高灵敏度的发光和显色传感.体系的荧光随着汞离子的加入而增强,溶液颜色由无色变成粉红色.化合物1在乙醇-DMF (V/V=4∶1)溶液中与Hg~(2+)以1∶3的比例结合,结合常数为1. 66×106,最低检测限为3×10~(-7)mol/L.     

断续流动-氢化物发生原子荧光法测定保健食品中微量硒

建立了保健食品中微量硒的断续流动-氢化物发生原子荧光测定方法,方法灵敏度高,准确度好.在选定的实验条件下,荧光强度与硒浓度在0.7~280 ng.mL-1范围内呈线性关系,相关系数0.999 6,检出限为0.2 ng.mL-1,回收率96.5%~101.0%,相对标准偏差不超过1.47%.     

Detection of hepatitis B surface antigen using time-resolved fluoroimmunoassay

Conventional fluoroimmunoassay (FIA) methods based on various fluorescence principles have not achieved the sensitivity of radioimmunoassay (RIA) mainly because of problems of background fluorescence arising, for example, from the biological specimen. We now describe an immunoassay of hepatitis B surface antigen (HBsAg) based on time-resolved (TR) fluorescence using a lanthanide as label. The assay initiates the development of a new generation of immunoassays. The fluorescence intensity is measured after a selected delay time which almost completely eliminates background fluorescence, which has a fast decay time. The excitation is performed with a flashing light source. The molecules with a long fluorescent lifetime consist of chelates of rare earth metals (Eu, Tb, Sm, Dy). They absorb strongly the excitation radiation and transfer the energy to the chelated central atom which in turn produces an emission spectrum characteristic of the lanthanide used. A long Stokes' shift (greater than 270 nm) helps to reduce the background in the emission region of the chelate and thus optimizes measurement of the relevant fluorescence. The present TR-FIA uses 2-naphthoyltrifluoroacetone as chelating agent because it creates an intense fluorescence with the rare earth metals. Synergistic agents such as trioctylphosphineoxid further enhance the fluorescence of the chelate. Depending on the instrumentation used for measuring time-resolved fluorescence and the conditions used for chelate formation, lanthanides can be detected at 10(-12)-10(-14)M concentrations.     

用于甲醛检测的比率型荧光探针合成及性能研究

本文设计合成了一种以萘酰亚胺为荧光团的比率型荧光探针,探针的设计基于萘酰亚胺苯环侧链上的醛基被取代后,荧光发射波长红移且荧光强度减弱,与甲醛反应后,发生2-aza-Cope重排反应,醛基恢复,荧光发射波长蓝移且荧光强度增强,可以此作为甲醛定性定量检测依据。通过核磁共振波谱法、高分辨质谱法和荧光光谱法对比率型荧光探针的结构、性质和检测性能进行了表征和研究,测试结果表明该探针对甲醛具有很好的检测性能,相较于传统荧光探针具有选择性好、灵敏度高、检测下限低等特点。