SX1近交系小鼠遗传纯度的初步研究

目的初步鉴定山西省肿瘤研究所第22代SX1近交系小鼠遗传纯度。方法应用生化基因位点遗传质量检测法和皮肤移植测试法对山西省肿瘤研究所自行培育的第22代昆明近交系小鼠进行了遗传纯度的初步鉴定。结果所检测的6只近交系小鼠的13个生化位点均未发现杂合基因型,所检基因位点全部纯合;所检测的10只近交系小鼠异体间未发现急性排斥现象。结论初步判定山西省肿瘤研究所自行培育的第22代昆明近交系小鼠在遗传质量上符合国标有关实验动物遗传质量检测的要求。     

黑龙江省实验小鼠、大鼠遗传学质量调查

目的根据最新颁布的国家标准,对黑龙江省的实验小鼠、大鼠的遗传学质量进行调查。方法参照国家标准《实验动物近交系小鼠、大鼠生化标记检测方法》GB/T 14927.1-2008,应用乙酸纤维素板,对来自4个单位的BALB/c和C57BL/6实验小鼠及3个单位的SD和Wistar实验大鼠进行生化标记位点的检测。结果被检的BALB/c小鼠和大鼠中均存在杂合。结论大鼠符合封闭群遗传概貌,但近交系小鼠出现了遗传漂变。     

BALB/c小鼠遗传污染对单克隆抗体制备的影响

目的检测BALB/c小鼠遗传污染对单克隆抗体制备实验的影响。加强近交系小鼠的饲养管理和重视实验动物的遗传质量检测。方法使用遗传生化标记方法对购进的两批BALB/c小鼠进行了碱性磷酸酶-1(Akp-1)等13个生化位点的检测。结果注射杂交瘤细胞后不产生腹水,经生化检测发现,购买的第一批BALB/c小鼠,在过氧化氢酶-2(Ce-2)等4个生化位点发现杂合基因,第二批BALB/c小鼠在过氧化氢酶-2(Ce-2)等8个生化位点发现杂合基因。结论本实验说明在实验动物的饲养管理上存在漏洞,上述两批BALB/c小鼠未严格按照国家实验动物管理操作规程操作,必须规范实验动物饲养管理,加强实验动物遗传检测,这是保证动物试验结果准确可靠不可或缺的重要环节。     

微卫星与生化位点法对BALB/c小鼠遗传检测比较分析

目的 应用微卫星DNA标记检测BALB/c小鼠的遗传质量,并与现行国家标准生化标记法进行比较,探讨其在近交系小鼠遗传监测中的应用,为建立微卫星DNA检测方法奠定基础。方法 采用20个微卫星基因位点和毛细管电泳技术对BALB/c小鼠进行遗传质量检测,同时采用现行国家标准生化标记法进行检测比较分析。结果 各样品20个微卫星基因位点DNA片段大小相同,没有新的等位基因出现;生化标记检测结果亦显示Akp1等14个生化标记基因均为纯合,个体间生化标记表型均一致,根据国家标准符合品系特征。微卫星DNA标记检测结果与生化标记检测结果一致。结论 微卫星DNA标记可准确可靠、方便快捷地检测近交系小鼠遗传质量,本研究所选的20个微卫星基因位点可用于BALB/c小鼠遗传质量监测。     

C57BL/6J胚胎冷冻小鼠的遗传监测和分析研究

目的用生化标记和微卫星检测法观察近交系C57BL/6J小鼠胚胎冷冻后的遗传质量是否发生改变。方法采用国标(GB/T 14927.1-2008)生化标记基因检测法对4只玻璃化冷冻、解冻移植后获得的C57BL/6J F1代小鼠的13个生化位点进行预检测,再根据微卫星DNA多态性的遗传监测方法进行多态性分析。结果4只玻璃化冷冻后移植获得的C57BL/6 F1代小鼠的遗传概貌与国标(GB/T 14927.1-2008)中的14个生化位点完全一致;并与本文作者已建立"几种常用近交系小鼠微卫星DNA多态性的分析研究"的遗传监测结果完全相符。结论玻璃化冷冻法(EFS40,straw)对C57BL/6J冷冻胚胎小鼠的遗传物质并未造成影响,其遗传特性保持稳定,是可行的小鼠胚胎冷冻方法。     

自发性先天性白内障大鼠皮肤移植及生化位点的研究

摘要:目的 探讨近交系同系异体自发性先天性白内障( TSC)大鼠皮肤移植反应的影响以及生化标记基因位点的测定。 方法 选用 TSC 大鼠 10 只,6 ~ 8 周龄,体质量 170 ~ 200 g,雌雄各半,采用背-背皮肤移植法进行自体和异体皮肤移植,一周后拆除包扎,观察皮片生长情况。 取基础群 F29 代的同一窝群 TSC 大鼠 6 只,6 ~ 8 周龄,体质量200 ~ 220 g,雌雄各半。 按照中华人民共和国国家标准 GB / 14923—2010 实验动物哺乳类实验动物的遗传质量控制、GB / T 14927. 1—2008 实验动物近交系小、大鼠生化标记检测法测定。 结果 皮肤移植 TSC 大鼠连续观察 100 d皮片成活生长。 11 个生化标记基因位点基因型为:酯酶-1 为 a,酯酶-3 为 a,酯酶-4 为 b,酯酶-6 为 b,酯酶-8 为 b,酯酶-9 为 c,酯酶-10 为 a,血红蛋白 β 链为 b,过氧化氢酶-1 为 a,碱性磷酸酶-1 为 a,血清碱性磷酸酶-1 为 b,参照目前常用的近交系大鼠品系的生化遗传概貌,未发现与 TSC 大鼠的生化标记基因位点完全相同的,TSC 大鼠具有独特的遗传特征。 结论 皮肤移植无排斥,说明 TSC 大鼠的组织相容性基因是一致的;酯酶-1 等 11 个生化标记位点结果均为纯合型,符合近交系质量标准规定。     

实验动物科学的遗传学实践

对实验动物科学的遗传学实践进行了综合论述，实验动物的遗传学标准，可分为近交系动物，突变品系动物，突变品系动物，远交系（封闭群）动物、系统杂交动物和普通杂种动物五种不同类别，实验动物遗传质量监测，包括毛色基因试验，皮肤移植试验，免疫遗传标记，生化标记基因检测，下颌骨测量及染色体带型分析等方法。     

长爪沙鼠糖尿病模型近交系培育群体生物学特性的初步研究

目的 测定长爪沙鼠糖尿病模型近交系培育群体的遗传生化位点标记和生物学特性的基础数据。方法 采用Beckman全自动生化分析仪(CX5)和日本光电全自动血细胞分析仪(MEK-7222K)对17项血液生化和22项血液生理指标进行测定;醋酸纤维板电泳法检测26个生化位点标记;选择F20代种鼠,按照近交系动物生产方式进行繁育,统计分析胎间隔、初生数、离乳数,生长曲线等。结果 血液生理和生化指标之间比较ALP、HDL-C、CRE指标差异极显著(P<0.01);MCV、MCH、EOS、GLU、TG、LDH指标差异显著(P<0.05);遗传生化位点标记呈现单一性;初生体质量为2.68～3.38 g,离乳成活率为68.31%,胎间隔时间比较长。3～6周龄体质量增长较快。结论 研究结果为其品系鉴定和生物医学应用提供重要参考资料。     

微卫星DNA多态性分析在常用近交系小鼠遗传监测中的应用研究

实验动物遗传质量监测的目的是检查该品系的动物是否发生了遗传变异 ,是否混入其它品种、品系动物血缘或发生了错误的交配等 ,以确保检测群体符合该遗传群体的要求。目前国家标准推荐的遗传监测方法主要是生化标记分析法。这一方法的实质是检测同工酶或异构蛋白的变化来推测相应的基因变化 ,因而不可避免地存在着精确度不高、检测位点及反映遗传概貌有限等局限性 ,同时还存在着结果不易分析判读等不足。而微卫星技术具有丰富的可供个体识别标志的微卫星位点 (截止 1999年已知 730 0多个小鼠微卫星位点 ) ,可呈现丰富的可供分析的图带 ,产生…     

常用近交系小鼠微卫星DNA多态性的分析研究

摘要：目的用微卫星引物对常用近交系小鼠进行遗传监测和DNA多态性分析。方法通过Genome Database选 取位于小鼠不同染色体上的15个微卫星位点,应用PCR扩增技术对近交系小鼠C57BL／J、DBA／2、C3H、BALB／e、 129、FVB、SCID进行微卫星DNA多态性的分析。结果15个微卫星位点除D8Mitll3、D13Mit88无扩增条带外,其 余13个微卫星位点引物对七种近交系小鼠均有稳定扩增,同一品系不同个体之间表现为单态性;不同品系个体之 间表现为多态性。结论所用微卫星位点具有信息含量高、分布广、扩增稳定、高度多态性的特点,各位点PCR的 稳定扩增,依其DNA多态性的特点来判定各品系间的遗传差异,是一种准确客观、方便快速的遗传监测方法。     

Gene mapping of a new coat mutation in mouse

Gene mapping of a mouse coat mutation has been investigated. First, 100 10-bp random primers were used to amplify DNA, but the mutation could not be located by this method because there were no correlation between the amplified products and coat phenotypes. Second, by usingIdh1, Car2, Mup1, Pgb1, Hbb, Es10, Es1, Mod1, Gdc1, Ce2, Es3 as genetic markers, linkage test crosses (two-point test) consisting of intercrossing uncovered BALB/c mice (homozygotes) to CBA/N and C57BV6 mice with normal hair and backcrossing the heterozygotes of the F1 to the uncovered BALB/c mice were made. It was soon evident that the mutation was linked toEs3 on chromosome 11. Furthermore, three-point test was made by usingEs3 and D11Mit8 (a microsatellite DNA) as genetic markers. The result showed that the mutation was linked toEs3 with the percentage recombination of (7.89 ± 2.19)%, and linked to Dl1Mit8 with the percentage recombination of (26.30± 3.57)%. The percentage recombination betweenEs3 and D11Mit8 was (32.90±3.81)%. The mutation was named Uncovered, with the symbolUncv. According to the recombinations, the loci order was D11Mit8-26.30±3.57-Uncv- 7.89 -2.19-Es3. From the location on the chromosome, it was concluded that the mutation was a new mutation which affected the skin and hair structure of mouse. TheUncv has entered MGD (Mouse Genome Database).     

9～10周龄CB6F1与B6CF1小鼠血生化、主要脏器重量及脏器系数测定

摘要：目的 测定CB6F1与B6CF1小鼠血生化、主要脏器重量和脏器系数,并进行比较分析。方法 随机选取9～10周龄SPF级CB6F1与B6CF1小鼠各40只,雌雄各半。分别称重,麻醉后摘眼球采血后,颈椎脱臼处死,运用全自动生化分析仪测定血生化指标,并采集脏器测定脏器重量,计算脏器系数。 结果 14项血生化指标比较,CB6F1小鼠雌雄之间有11项指标（11/14）、B6CF1小鼠雌雄之间有9项指标（9/14）、CB6F1与B6CF1小鼠雌性之间有10项指标（10/14）,雄性之间11项（11/14）指标均存在显著性差异（P﹤0.05）。CB6F1与B6CF1小鼠主要脏器重量与脏器系数比较,同品系雌雄之间,同性别2个品系之间,均有部分指标存在显著性差异（P﹤0.05）。结论 以BALB/c和C57BL/6为不同父母本杂交产生的F1代小鼠CB6F1和B6CF1,其血生化指标、脏器重量和脏器系数有所不同。     

不同日龄SPF级KM小鼠血液生理生化正常指标的探讨

目的探讨不同日龄SPF级KM小鼠血液生理生化正常值,为评价封闭群动物的遗传标准提供数据基础。方法采用Beckman全自动生化测定仪和日本光电血球计数仪对20、30、40、50日龄及不同性别SPF级小鼠的血液生理生化值进行了测定。结果SPF级KM小鼠血液的WBC、MCH、MCHC、PLT在不同日龄间差异显著,RBC、HGB、HCT、Glu、ALT、CHOL、TP、Alb、Glb、A/G、BUN、PO4、Na、K、CI、Ca、AG在日龄、性别间均差异极显著。结论SPF级KM小鼠血液生理生化指标雌雄、日龄之间存在差异,研究结果可为KM小鼠建立正常检测指标提供参考。     

二乙基亚硝胺诱导小鼠肝纤维化动态模型的建立及病理机制初探

摘要:目的 为 探 究 肝 纤 维 化 的 发 生 发 展 机 制 及 病 理 病 因 的 特 点, 本 研 究 通 过 建 立 二 乙 基 亚 硝 胺( diethylnitrosamine,DEN)诱导的肝纤维化动态小鼠模型,动态监测上述小鼠模型的血清生化指标,推断肝纤维化阶段。 方法 雄性 C57BL / 6 小鼠按梯度剂量每周 2 次腹腔注射 DEN,连续 8 周。 分别在第 2、4、6 和 8 周收集小鼠的血清和肝组织,通过检测相应血清生化指标、肝组织羟脯氨酸含量以及组织病理学检查监测和评估小鼠肝纤维化的发病进程。 采用 Western blot 检测 TGF-β1、α-SMA 和 TLR4 / MyD88 / NF-κB 信号通路相关蛋白以探究肝纤维化的发病机制。 结果 从第 4 周开始,与 对 照 组 相 比, DEN 诱 导 小 鼠 的 肝 功 能 相 关 血 清 生 化 指 标 ( AST、 ALT、 ALP、T-BIL、A / G 等)出现显著变化,且体质量出现明显下降。 肝脏指数出现明显下降,组织中羟脯氨酸含量均显著升高(P<0. 01) ,组织病理学结果显示 DEN 诱导组小鼠肝组织开始出现轻微胶原沉积。 Western blot 结果表明模型组小鼠肝组织中TGF-β1 和 α-SMA 表达显著上调,TLR4、MyD88、TRAF6 及细胞核 NF-κB p65 蛋白表达水平显著升高,细胞质 p65 NF-κB 表达显著下调。 结论 研究结果表明,肝纤维化的发生机制与肝损伤后激活 TLR4 / MyD88 / NF-κB 信号通路相关,而 TLR4 炎症通路的激活又进一步促进分泌 TGF-β1 并激活肝星状细胞从而导致大量细胞外基质沉积。 本研究表明,通过 DEN 诱导的小鼠肝纤维化发病机制可能与炎症相关,且可通过结合多个血清生化指标初步判断肝纤维化阶段。     

Depletion of the predominant B-cell population in immunoglobulin mu heavy-chain transgenic mice

The transgenic mouse line M54 was generated by introducing a functionally-rearranged immunoglobulin mu heavy-chain gene into the germ line of a C57B1/6 inbred mouse. Previous examination of the antibodies produced by B-cell hybridomas derived from transgenic M54 mice showed that the presence of the mu transgene grossly altered the immunoglobulin repertoire of unimmunized animals, suggesting that these mice suffer from a serious immunoregulatory perturbation. Studies presented here introduce a new perspective on this functional defect. We show that the lymphoid tissues from these transgenic mice lack virtually all conventional bone-marrow-derived B cells, which constitute the predominant B-cell population in normal mice and which typically produce primary and secondary antibody responses to T-cell-dependent antigens. Moreover, the bone marrow from transgenic M54 mice is depleted of pre-B lymphocytes, indicating a serious defect in early B-cell lymphopoiesis. In contrast, CD5 (Ly-1) B cells, a second B-cell population displaying a characteristic set of cell surface markers which are derived from distinct precursors in the peritoneum, are represented at normal frequencies in these transgenic mice. Thus, the presence of the rearranged immunoglobulin heavy-chain transgene in M54 mice results in an unexpected selective developmental defect that impairs the development of bone-marrow-derived pre-B and B cells without affecting Ly-1 B cells.     

四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠建立肝纤维化模型

目的 比较不同剂量四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠肝纤维化模型的效果,以建立稳定的肝纤维化模型。方法 选择5周龄的C57BL/6近交系小鼠,分别腹腔注射给予高、中、低剂量的四氯化碳诱导肝纤维化,实验结束后取血及肝脏组织,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的水平及肝脏病理变化。结果 近交系C57BL/6小鼠药物诱导后,各剂量组动物均能存活到8周,高剂量组存活率仅为20%远低于中、低组;血清转氨酶含量升高程度、肝组织病理改变存在剂量时间效应关系。病理分析表明,各剂量组均可见肝细胞变性/坏死、中央静脉周围/汇管区混合细胞浸润及肝脏纤维化。结论 10%四氯化碳给药8周后能诱导近交系C57BL/6小鼠形成较稳定的肝纤维小鼠模型,为后续肝纤维化机制研究及药物筛选工作奠定了基础。     

清洁级小鼠感染嗜肺巴氏杆菌情况的初步调查

从１５只患结膜炎、肺炎的小鼠中分离出嗜肺巴氏杆菌１２株。随后对其群体中１０个品系８５只小鼠进行普查,结果感染率最高为ＣＢＡ及ＡＭＭＳ／１３小鼠,达２５％,ＡＢＬＢ／ｃ及ＡＭＭＳ／１也有检出,应引起生产者足够的重视。     

近交系大鼠DNA指纹图和微卫星DNA多态性的分析

实验动物常规生化标记监测方法主要是通过蛋白质的变化来推测相应的基因的变化 ,而在某种程度上存在着一定的局限性。而DNA指纹图和微卫星DNA是对遗传物质DNA的直接监测 ,比生化标记更准确、更可靠 ,更直观。实验中选取国内常用的SHR、SHRSP、WKY、F344、RCS、LEW等 6个近交系大鼠群体 ,采用DNA指纹图和微卫星DNA技术对 6个近交系大鼠群体进行DNA多态性分析 ,以期筛选出具有精确可靠、快速简便、灵敏性高的遗传监测方法。结果 :(1)DNA指纹图①在 4 0kb— 2 3 1kb之间各组的平均图带数在 14— 19条 ,同一群体不同个体间的相…