H-2基因检测方法在北京市实验动物遗传质量抽检中的应用

目的为贯彻实施新国标,通过检测小鼠H-2单倍型,确认近交系小鼠免疫遗传质量。方法依据新国标GB/T14927.2-2008中的微量细胞毒检测方法,检测北京地区主要生产厂家的BALB/c和C57BL/6小鼠共70只的H-2单倍型。结果共抽检4个单位的BALB/c和C57BL/6近交系小鼠70只,经检测BALB/c为H-2Dd和H-2Kd,C57BL/6为H-2Db和H-2Kb,符合率100%,质量符合要求。结论经抽检,北京地区主要生产厂家2个品系小鼠免疫遗传质量合格。     

用于乙肝疫苗效力检定的小鼠种群的建立

目的在进行乙肝疫苗效力检测时应用统一的动物种群。方法目前评价乙肝疫苗免疫效力的主要方法是用小鼠测定乙肝疫苗的ED50值(接种疫苗后使50%的动物抗体阳转的疫苗稀释度的倒数),而小鼠对HBsAg免疫应答的水平与H-2单倍型密切相关。因此我们通过微量细胞毒法和PCR方法检测小鼠的H-2单倍型的特点,得出乙肝疫苗与不同动物种群的相关性,解决实际工作中的问题。结果通过多方面的实验验证,NIH鼠可以对乙肝疫苗产生高应答效应。结论NIH鼠的H-2单倍型中有q型基因,同时NIH鼠保持了原封闭群动物繁殖力强生长速度快等优点,所以便于进行乙肝疫苗效力检测时应用。     

微量细胞毒法在近交系小鼠遗传检测中的应用

建立微量细胞毒实验检测技术 ,对近交系实验动物免疫遗传特性进行常规检测和质量监测。引进小鼠主要组织相容性复合体 (MHC)国际标准单克隆抗体系列 ,制取近交系小鼠脾细胞 ,加入特异的单克隆抗体 ,通过倒置显微镜观察最终反应结果 ,根据死亡细胞占总细胞的百分比来判定实验结果。死亡细胞超过细胞总数的 6 0 %即为阳性。可依照加入的单克隆抗体基因型来确定近交系小鼠的基因型 ,因此可利用微量细胞毒法识别近交系小鼠H- 2单倍型 ,区别不同的品系。此方法检测速度快、操作简单、结果准确 ,故便于在国内推广使用     

从腹泻实验兔分离的一株大肠埃希菌的生物学特性研究

目的 研究从腹泻实验兔分离到的大肠埃希菌的生物学特性。方法 对一株从因腹泻而死亡的SPF级实验兔体内分离的致病性大肠埃希菌的遗传谱系、抗生素敏感性、消毒液敏感性以及细菌携带的耐药基因和毒力基因进行较为全面的研究。结果 该大肠埃希菌属于B1型遗传谱系，携带毒力基因eaeA,属于肠致病性大肠埃希菌。对常用的5种消毒液敏感，对于青霉素、氨苄西林、头孢氨苄、头孢拉定、四环素、多西环素、米诺霉素、红霉素、麦迪霉素、万古霉素、复方新诺明等11种抗生素耐药，携带aadA1,gyrA,sul1和tetA等4个抗生素耐药基因。结论 从因腹泻而死亡的SPF级实验兔体内分离的致病性大肠埃希菌为一株B1型遗传谱系的肠致病性大肠埃希菌，具有多重耐药性，对常用的消毒剂均敏感。     

实验动物能力验证计划肽酶-3检测

目的 通过组织实施能力验证计划，评价实验室的实验动物质量检测能力，提高实验室质量控制水平。方法依据CNAS-CL03能力验证提供者认可准则组织实施能力验证计划，样品通过均匀性和稳定性检验。参加单位在规定时限内提交检测结果和相关原始记录，将实验室结果与标准结果进行对比分析。结果 共有8家实验室参加本次能力验证计划，其中6家实验室提交了满意结果，本次能力验证计划的满意率为75%。结论 实验动物质量控制实验室肽酶-3的整体检测水平较高，少数实验室存在可提升空间。