MCTD、SS和RA患者血清中SARS-CoV抗体阳性原因分析

为探讨严重急性呼吸综合征(SARS)冠状病毒(SARS-CoV)抗体在SARS病原学诊断中的特异性及其在干燥综合征(SS)、混合结缔组织病(MCTD)和类风湿性关节炎(RA)患者血清中的假阳性问题，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)和间接免疫荧光法(IFA)检测了111例正常对照和46例SS、MCTD和RA患者血清中SARS-CoV抗体的阳性率。结果在正常对照和SS、MCTD和RA患者中，应用ELISA测定SARS-CoV抗体的阳性率分别为3．6％(4／111)和19．6％(9／46)，经IFA检测，上述SARS-CoV抗体阳性者均为阴性。提示IFA诊断SARS的特异性为100％，ELISA诊断SARS存在一定的假阳性。     

应用实时荧光定量PCR方法检测实验用猫巴尔通体的感染

目的 建立高效特异的巴尔通体实时荧光定量PCR检测方法,并应用于实验用猫的微生物检测工作中。方法 针对NCBI公布的巴尔通体序列设计特异引物和TaqMan探针,使用分子生物学方法制备质粒标准品,建立巴尔通体实时荧光定量PCR方法;对该方法的线性、敏感性、特异性及稳定性进行测定;并使用该方法对142个猫样品进行检测。结果 成功建立巴尔通体实时荧光定量PCR方法;该方法线性范围为1.0×101 copies/μL～1.0×109 copies/μL,相关系数为0.998,检测极限达10 copies/μL;特异性结果显示所建方法具有良好的特异性,并在142份实验用猫样品中检测出阳性样品6份。结论 实时荧光定量PCR方法可用于实验用猫巴尔通体的检测工作中。     

巴尔通体HBPC蛋白原核重组表达及抗原性研究

为了寻找可用于巴尔通体(Bartonella)检测的特异性抗原,利用PCR方法从巴尔通体厦门分离株(B.tribocorum_XM)的基因组DNA中扩增出血红素结合蛋白C(HBPC)蛋白基因,并将该基因的编码区克隆到pGEX-4T-1原核表达载体中,构建带GST标签的融合蛋白重组表达载体,并转化大肠杆菌(Escherichia coli DH5α),诱导表达GST-HBPC,通过亲和层析技术纯化GST-HBPC.最后运用蛋白质斑点印迹试验(Western blot)和间接ELISA法检验GST-HBPC是否具有抗原性.结果表明,所构建的表达载体可在大肠杆菌中大量表达GST-HBPC,Western blot和间接ELISA显示GST-HBPC能够特异性地与感染动物血液样本发生免疫反应.因此,体外重组的巴尔通体抗原蛋白HBPC可作为潜在的抗原用于巴尔通体血清学免疫检测.     

乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法的建立

目的建立乙型脑炎病毒(JEV)免疫荧光(IFA)检测方法,应用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。方法滴定病毒TCID50,筛选JEV敏感细胞,依据国标IFA法制备抗原片,并进行特异性、敏感性和稳定性试验。结果选取BHK21细胞作为JEV敏感细胞,病毒感染力滴度(TCID50)为10-8.9.mL-1;与猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)均无交叉反应;稳定性和敏感性试验显示,不同时间IFA检测灵敏度均为1∶2560;可检测到的病毒滴度最低为10-6.5.mL-1。结论建立的IFA法敏感性、特异性强,稳定性好,可用于猪及猪源性生物材料JEV的检测。     

猪细小病毒血清学检测方法的建立

目的建立猪细小病毒血清学检测方法。方法用抗猪细小病毒的猪源性血清,通过IFA和IEA两种方法,首先将阳性血清吸附PK-15细胞抗原,以排除非特异反应,通过对阳性血清及3种二抗(其中IFA以FITC标记的抗猪IgG抗体,IEA分别以HRP标记的抗猪IgG抗体和SPA-HRP作为二抗)进行浓度梯度滴定,确定最佳工作浓度,并比较三种反应体系的敏感性。结果IFA最高能检测出PPV-猪组织混合感染PK-15细胞模型中1个TCID50,而其它两种反应体系均只能检测100个TCID50。结论间接免疫荧光检测方法比其它两种方法敏感性更高。     

唾液IgG抗体测定在幽门螺杆菌感染诊断中的价值

目的 :探讨唾液抗幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)IgG测定对Hp感染的诊断价值。方法 :用ELISA法测定67例Hp阳性及20例Hp阴性患者的唾液内抗HpIgG ,并与血清抗体测定结果比较。结果 :唾液抗HpIgG对Hp感染的敏感性为91 1% ,特异性为85 0% ,准确性为89 7 % ,与血清测定结果接近(分别为92 6 % ,90 0%和91 9 %)。结论 :唾液抗Hp抗体测定对Hp感染的诊断有较好的应用价值。     

鼠痘三种血清学诊断方法的初步探讨

本文报道了鼠痘的三种血清学诊断方法，并对其敏感性、特异性和实用性进行了列步探讨，结果表明：微量免疫扩散试验是一种特异性强、敏感性较高，操作简便的诊断方法，对人工感染小鼠的检出率为８６％，且可检出无症状的隐性感染人鼠及自然感染病例；对流免疫电泳是一种敏感性高的快速诊断方法；对人工感染小鼠的检出率高达９１％亦可检出隐性和自然感染病例，但其特异性强，敏感性高的血清学方法，特别适合于实验鼠群的监测及流行病学调查，检测两个实验动物饲养场的１９份和２２份小鼠血清，其中抗体阳性率分别达到４２％及６４％。     

ELISA检测姜片虫病患者抗体的研究

研究了姜片吸虫成虫冷浸抗原检测姜片吸虫病患者血清抗体的敏感性和特异性及其在流行病和临床上的应用价值．超声粉碎制备姜片吸虫成虫冷浸抗原．以评价ELISA法检测姜片虫病血清抗体的敏感性、特异性和交叉反应性．按常规ELISA方法操作,目视与酶标仪判断结果．普查2189人中姜片吸虫卵阳性者168例;168例中165例ELISA阳性,ELISA与改良加藤法的阳性符合率98．21％;健康居民血清147份,阳性6份,阳性率4．08％;与血吸虫病交叉阳性为9．38％,肺吸虫病交叉阳性为5．36％．姜片吸虫成虫冷浸抗原1：3500工作浓度包被酶标板,检测姜片虫病血清抗体具有敏感性高、特异强和交叉反应率低的特点．     

抗巨片形吸虫同型抗体在动物巨片形吸虫感染所致的抗体依赖性细胞介导的细胞毒反应( ADCC )免疫应答作用的研究

以印尼短尾羊（ITT）和美利奴细毛羊（Merino）两种品系的绵羊为实验动物，研究动物感染巨片形吸虫后所产生的抗体依赖性细胞介导的细胞毒反应的免疫应答。结果显示：对巨片形吸虫感染具有抗性的印尼短尾羊不产生特异性的IgG2，而易感品系的美利奴细毛羊感染巨片形吸虫后体内产生高滴度特异性IgG2抗体、特异性IgG2抗体在免疫应答中起着封闭抗体的作用，抑制巨噬细胞抗体依赖性细胞介导的细胞毒反应。由于印尼短尾羊不产生特异性IgG2抗体，对巨噬细胞抗体依赖性细胞介导的细胞毒反应不产生抑制作用，因此印尼短尾羊对巨片形吸虫的感染具有一定的抵抗力。使用纯化的IgG1和IgG2进行体外杀虫试验，结果IgG1有很强的促进体外杀虫效果，而自感染巨片形吸虫的美利奴细毛羊血清标本纯化的IgG2没有体外杀虫作用。体外实验还显示嗜酸性粒细胞在免疫血清、补体和IL-5的共同参与下具有较强的杀虫作用。     

ACCPA,RF及Ig对类风湿性关节炎诊断价值的探讨

目的研究抗环瓜氨酸抗体(anti-cyclic citrullinated peptide antibodies,ACCPA)、类风湿因子(RF)及免疫球蛋白(Ig)对类风湿性关节炎(Rheumatoid Arthritis,RA)的诊断价值,为临床应用提供参考。方法以RA患者作为病例组,健康体检人群为对照组,对两组血浆中ACCPA,RF及Ig水平进行检测,分析判断每种指标对于RA诊断的敏感性和特异性,对其测定结果用SPSS19.0软件进行统计学分析。结果在3种诊断指标中RF的敏感性为81.25%,特异性为77.08%;Ig敏感性为85.42%,特异性为47.92%;ACCPA敏感性为66.67%,特异性为93.75%;但是,三者联合对于RA诊断的敏感性和特异性分别为98.85%和73.9%。结论 ACCPA,RF及Ig三种指标联合用于RA诊断,不仅有较高的敏感性和特异性,而且也可以根据ACCPA来判断RA患者的严重程度,在临床应用中有良好的推广价值。     

神经网络在心肌梗塞诊断中的应用

目的：研究神经网络技术在心肌梗塞诊断中的应用。方法：使用改进的网络训练算法－ＳＰＤＳ方法,对前馈型神经网络进行训练,样本取自实际临床和一些具有权威性的刊物中,形成针对心肌梗塞诊断的神经网络系统,结果：用实际临床已确诊的１００例病例进行检验,诊断的敏感性为９０％,特异性为１００％,诊断准确性为７５％。结论：同目前实际临床的情况相比,结果良好,展现了神经网络技术用于医学诊断的良好前景。     

浅析基因诊断对运动员猝死的早期诊断和预防价值

运动员猝死是运动医学研究的重要内容。研究证明其主要由心源性及脑源性疾病所引起,但与普通人群相比具有一定的差异性和隐蔽性,常规方法不易早期诊断。基因诊断技术从基因水平进行分析,对疾病的诊断具有高特异性、灵敏性和早期诊断性,对运动员猝死的早期诊断和预防具有一定的价值。     

多层螺旋CT冠状动脉成像在冠状动脉狭窄中的诊断价值

目的：探讨多层螺旋CT（MSCT）冠状动脉成像在冠脉狭窄中的诊断价值.方法：对100例患者进行冠状动脉CT成像并对其图像进行分析.结果：有586支冠状动脉被评价,其中有钙化的血管283/586（48.29%）支;检测有意义的狭窄（≥50%的狭窄）214/586;直观显示异常起源的冠状动脉与主动脉的连接情况及其与心脏各房室的关系;可清楚地显示冠状动脉内支架的位置和形态学表现.结论：多层螺旋CT冠状动脉成像对冠状动脉狭窄的诊断具有较高的敏感度和特异度,有助于冠心病的早期诊断.     

高致病性禽流感分子鉴别诊断方法的建立

为了快速、敏感、特异地鉴别诊断高致病性禽流感,根据H 5,H 7亚型禽流感病毒HA基因序列的保守区域设计出并合成两对特异性引物,利用这两对引物对H 5,H 7亚型禽流感病毒的HA基因片断进行二联RT-PCR扩增,并对二联RT-PCR检测方法进行敏感性及特异性试验。结果表明:这两对引物能特异性地扩增出H 5,H 7亚型禽流感病毒HA基因片段,大小分别为490 bp和375 bp;该检测方法敏感性高,特异性强;初步建立起快速、敏感、特异地鉴别检测H 5,H 7亚型高致病性禽流感病毒的分子诊断方法。     

ST段改变在冠心病诊断中临床意义的评价

目的：评估心电图ST段改变在冠心病诊断中的意义。方法：以冠状动脉造影为金标准,与心电图ST段改变作比较,计算心电图的灵敏度和特异度等指标。结果：灵敏度53.85%;特异度84.21%;符合率61.97%;阳性预测值90.32%;阴性预测值40.00%。结论：心电图ST段改变在冠心病诊断中灵敏度太低,特异度尚可。     

超声内镜诊断上消化道黏膜下病变临床价值分析

目的探讨超声内镜(EUS)诊断上消化道黏膜下病变的临床价值.方法回顾分析行超声内镜(EUS)检查的258例上消化道胃黏膜下病变患者临床资料,上述患者行手术或微创手术(ESD等)切除,均有术后病理资料,以术后病理学检查为金标准,通过计算并比较EUS对不同病理类型和病变起源的上消化道黏膜下病变诊断的灵敏度与特异度,对EUS诊断上消化道黏膜下病变的临床价值进行评价分析.结果 EUS对不同病理类型诊断的灵敏度:脂肪瘤平滑肌瘤异位胰腺间质瘤,平均灵敏度为90.97%,组间比较差异无统计学意义(P0.05),特异度:脂肪瘤异位胰腺间质瘤平滑肌瘤,平均特异度96.17%,组间比较差异无统计学意义(P0.05);EUS对不同起源层次的上消化道黏膜下病变诊断灵敏度以固有肌层最高(91.18%),与固有肌层比较,黏膜下层特异度最低(79.41%),差异具有统计学意义(P0.05),平均灵敏度为85.55%,平均特异度为93.27%,各组间特异度比较差异无统计学意义(P0.05).结论 EUS对上消化道黏膜下病变有较高的诊断价值,可为临床诊治上消化道黏膜下病变提供有力证据.     

猴腺病毒Ⅰ型间接免疫荧光检测方法的建立与初步应用*

摘要: 目的建立检测血清中猴腺病毒Ⅰ型( SAdV-1) 抗体的间接免疫荧光方法( IFA) ,为检测实验猴群中SAdV-1 的感染情况提供参考依据。方法用SAdV-1 病毒感染BSC-1 细胞,待50% 细胞出现病变时,用胰蛋白酶消化以 20μL 1 × 107 个/mL 浓度的细胞液滴到24 孔镀膜玻片上,丙酮固定。利用制备的抗原片通过浓度滴定确定猴血清、 羊抗猴二抗最佳工作条件。对IFA 进行特异性、敏感性、重复性验证并初步检测猴血清样本。结果建立了SAdV- 1 抗体的间接免疫荧光检测方法。在采集的21 份猴血清样本中,检出SAdV-1 抗体阳性9 例,12 例血清检测为阴 性。结论方法具有良好的特异性和稳定性,可作为SAdV-1 检测的可靠方法。     

两种方法检测汉坦病毒滴度的比较研究

【摘要】 目的：比较双抗体夹心ELISA法与直接免疫荧光(DFA）法在检测汉坦病毒灵敏度方面的差别。方法：用汉坦病毒76-118株感染Vero-E6细胞,取不同时间点的病毒感染细胞制备细胞爬片或细胞培养物冻融上清,分别用本室制备的抗汉坦病毒单克隆抗体标记荧光素或辣根过氧化物酶（HRP）建立直接免疫荧光法和双抗体夹心ELISA法检测上述细胞中的病毒抗原,并比较两者的检测灵敏度,用空斑形成实验结果作为金标准,以评价两种方法在检测病毒抗原灵敏度方面的差异。结果: 用两种检测方法测定不同时间点的汉坦病毒培养物抗原,双抗体夹心ELISA法不仅检出的时间早,而且其病毒滴度均较IFA法高（P＜0.01）。结论：ELISA法检测汉坦病毒滴度的灵敏度较IFA法更高,并且操作简单,可重复性好,便于大批量规模化检测,因此更适用于汉坦病毒的检测。