漆酶与各种类型底物反应性能的微量热法研究

在厌氧条件下，用ＬＫＢ－２１０７Ｂａｔｃｈ微量热系统研究了在２９８．１５Ｋ０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲溶液（ｐＨ７．４）中漆树漆酶与５种底物的反应，测定了各反应的反应焓变△Ｈｍ米氏常数Ｋｍ，酶底复合过程的吉布斯自由能△Ｇ０复合物中电子转移速率常数ｋ２，以及漆病对各种底物的催化活性ＥＡ．讨论了相同的实验条件下，各种酶底复合物的稳定性，底物官能团及其位置对酶反应中的电子转移速率和非酶反应中自由基聚合形式     

pH值对氟铍酸三甘肽单晶生长条件的影响

本文测定了不同ｐＨ值条件下，在２０～５０℃温度范围内氟铍酸三甘肽（ＴＧＦＢ）晶体的溶解度与ｐＨ值的经验关系式为：Ｓ＝６．６×１０－８Ｔ３．７２９（１．１６－０．１１５ｐＨ）－（ｐＨ－１．４）［７．５－０．４（１／ｌｇｐＨ）２．５］．研究生长母液的酸度对亚稳区的影响，结果表明：培育ＴＧＦＢ单晶的最佳ｐＨ值范围为２．２～２．６．     

漆树漆酶的催化氧化作用：Ⅶ.稀土金属离子对漆酶催化…

以５，６－二溴－２，３－二氰基氢醌为底物，在ｐＨ４．０－６．０条件下，用分光光度法考察了稀土金属离子对漆酶催化活性的抑制作用，探讨了抑制特征，抑制位点和作用方式。结果表明，稀土金属离子对漆酶催化活性的抑制属竞争性抑制过程。稀土金属离子的抑制作用是通过它 与漆酶活性中酸性氨基酸残基中的ω－羧基阴离子的配位相互作用实现的；在这种作用下，ω－羧基阴离子于对底物酸羟基的氢键或碱化催化作用补削弱，使酚羟基中     

微柱在线预富集FI—ICP—AES测定痕量La和Gd

以ＤＣＢ－偶氮胂（全名为３－（２－胂酸基苯偶氮）－６－（２，６－二氯－４－溴）－４，５－二羟基－２，７－萘二磺酸０为衍生化试剂，使之负载于碳硅凝胶上，并以此填充微柱。在优化的实验条件下，于ｐＨ４．０的ＮＨ３．Ｈ２Ｏ／ＨＣＯＯＨ缓冲介质中实现了Ｌａ＾３＋，Ｇａ＾３＋的在线富集分离和ＩＣＰ－ＡＥＳ测定。     

Cl-、NO3-和SO42-离子对漆酶催化活性的抑制作用

以５,６－二溴－２,３－二氰基氢醌为底物,在ｐＨ值４．５０条件下,用分光光度法考察了Ｃｌ－、ＮＯ－３和ＳＯ２－４离子对漆酶催化活性的影响。发现Ｃｌ－、ＮＯ－３和ＳＯ２－４离子对漆酶的催化活性均有不同程度的抑制作用,其最大抑制率分别可达７５％、３１．４％和１７．１％。动力学研究表明,Ｃｌ－、ＮＯ－３和ＳＯ２－４离子的抑制作用是瞬时完成的,属于竞争性抑制过程,是通过与底物分子竞争漆酶分子中的Ⅱ型铜（Ⅱ）部位实现的。经测定,Ｃｌ－和ＮＯ－３离子与漆酶所形成的复合物其解离常数分别为１．１２×１０－４ｍｏｌ·ｄｍ－３和１．７８×１０－３ｍｏｌ·ｄｍ－３。     

铀试剂Ⅲ离常数的测定

用 ｐＨ测定法、溶解度法和分光光度法测定了铀试剂Ⅲ的八个离介常数,在离子强度等于０．１时它们分别为： Ｋ１＝１３±１．２; Ｋ２＝（２．４±１．１）×１０－２, Ｈ３＝（９．６±１．１）××１０－４;Ｈ４＝（３．３±０．１）× １０－５;Ｋ５＝（５．４±０．３）×１０－８;Ｋ６＝（１．０±０．２）×１０－９;Ｋ７＝（４．７±０．４）×１０－１１;Ｋ８＝（４．７±０．５）×１０－１３。并根据这些常数作出了试剂离介形式随ＰＣＨ的分布图。     

灵芝纤维素酶的纯化和性质研究

从七种食用和药用真菌中筛选出纤维素分解能力较强的灵芝菌株（Ｇａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ５００５９），比较了几种不同碳源的固体发酵培养基对灵芝５００５９产内切β－葡聚糖酶（又称羧甲基纤维素酶，ＣＭＣ酶）能力的影响，确定了最佳培养时间为５～６ｄ。通过硫酸铵沉淀、凝胶过滤和离子交换层析初步提纯了灵芝的ＣＭＣ酶，得到三个组分。其中一个组分在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳中为一条带，为单亚基分子，分子量为４．５×１０４，等电点为３．２，以ＣＭＣ－Ｎａ为底物的米氏常数（Ｋｍ）为７．２ｇ／Ｌ。该酶活力的最适温度为５０℃，半致死温度约６７℃。该ＣＭＣ酶组分在ｐＨ３．０～６．０范围内稳定，最适ｐＨ约为２．０和４．０。     

生命金属离子对漆酶催化活性的影响

以５,６二氯２,３二氰基氢醌为底物,在ｐＨ＝４．４０条件下,用分光光度法考察了１１种生命金属离子（Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ２＋、Ｃｏ２＋、Ｃｕ２＋、Ｃｒ６＋、Ｎｉ２＋、Ｚｎ２＋）存在下的漆酶催化氧化反应,发现Ｆｅ２＋离子对漆酶的催化活性显示出抑制作用,探讨了其抑制特征、抑制位点和作用方式．结果表明,Ｆｅ２＋离子对漆酶催化活性抑制属竞争性抑制过程,Ｆｅ２＋离子的抑制作用是通过还原漆酶反应产物半醌自由基阴离子来完成的．Ｆｅ２＋离子漆酶复合物的解离常数（Ｋｉ）经测定为１７．５×１０－６ｍｏｌ·Ｌ－１．     

紫外诱变原生质体选育碱性蛋白酶高产菌株的研究Ⅲ.诱变株的选育及其产酶条件的研究

以地衣芽孢杆菌（ＢａｃｉｌｕｓＬｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）５３号菌为出发菌株，在原生质形成和再生的最佳条件下制备原生质体，并对原生质体进行了多次诱变处理，从大量突变株进行筛选最终获得了高产、稳定、耐热的碱性蛋白酶产生菌株５３－Ｇ３８－６，产酶活力由１１０４Ｕ／ｍｌ提高到２２０８０Ｕ／ｍｌ．该诱变株最适产酶条件为：培养基由质量分数（ｗ／％）为胰蛋白胨１，酵母膏０．５，玉米粉５，Ｎａ２ＨＰＯ４１２Ｈ２Ｏ０．４，ＫＨ２ＰＯ４０．０３，Ｎａ２ＣＯ３０．１组成，ｐＨ自然，培养温度４２℃，培养时间４４～４８ｈ，ｗ／％为０．２的ＣａＣＯ３可提高酶的产量．酶作用的最适条件：６２℃，ｐＨ１０．０，ｐＨ在９～１０之间稳定     

从香菇发酵醪液中分离鸟苷酸技术的研究

香菇发酵醪处理液经７３２阳树脂在ｐＨ２．５￣３．０时得５＇－ＧＭＰ和５＇－ＣＭＰ混合液，再调至ｐＨ４．０￣４．５上７１７阴离子树脂柱，５＇－ＧＭＰ被吸附，用ψ＝３％ＮａＣｌ溶液解吸，即分离得５＇－ＧＭＰ。醪液经０．２μｍ胶体磨破壁后分别作了自溶，酶解（５＇－磷酸二脂酶）和自溶加酶解三种处理，结果５＇－ＧＭＰ得率分别为９４．０％，９５．１％和９５．０％，未见显著差异。     

环糊精葡萄糖基转移酶在壳聚糖上的固定化

以甲醛作为活化剂将环糊精葡萄糖基移酶（ＣＧＴａｓｅ，ＥＣ，３．２，２．１９）固定在壳聚糖上。发现ＣＧＴａｓｅ经固定化后，最适温度没有改变，最适ｐＨ从６．０移到５．０，热稳定性及ｐＨ稳定性都有所提高，在ｐＨ８．５和５０℃下，经过４次分批反应，固定化酶保留约６６％活力，柱式连续反应的半衰期大约为６天。     

新试剂6-(2-羟基-4-二乙基氨苯偶氮)-2,3-二氢-1.4-酞嗪二酮的电化学发光研究

应用自制的ＥＣＬ－１型电致化学发光仪，对新试剂６－（２－羟基－４－二乙基氨苯偶氮）－２．３－二氢－１，４－酞嗪二酮（ＨＤＥＡ）在Ｎａ２ＣＯ３－ＮａＨＣＯ３缓冲介质中的电化学发光行为作了研究．结果发现，当介质ｐＨ值为 １０．５４时，在一定的实验条件下，施加 １．７Ｖ （ＶＳ．ＳＣＥ）三角波脉冲电压，体系的发光强度与ＨＤＥＡ浓度在５．０ × １０－９～１．０×１０－６ｍｏｌ／Ｌ范围内呈线性关系，反应的检测限达１．０×１０－９ｍｏｌ／Ｌ．     

固定化细胞合成L—苯丙氨酸的酶活及稳定性

研究了固定化酶ＰＡＬ合成Ｌ－苯丙氨酸过程中的酶活力与酶稳定性情况，找出了维持酶活的最佳保存条件，考察了不同氨基供体、肉桂酸、ｐＨ值及酶的不同固定化量等因素对酶反应过程的影响，确定其适宜反应条件为肉桂酸１．５％～２．０％，醋酸铵２～４ｍｏｌＬ－１，ｐＨ８．５～１０，温度３０℃，细胞固定化量为０．１ｇ湿细胞／ｇ固定化颗粒     

在阴离子表面活性剂存在下3,5-diCl-DMPAP分光光度法测定微量锌

在阴离子表面活性剂ＳＬＳ存在下，研究了２－（３，５－二氯－２－吡啶偶氮）－５－二甲氨基酚（简称３，５－ｄｉＣｌ－ＤＭＰＡＰ）与锌反应的适宜显色条件．结果表明，在ｐＨ为６．０～１０．０范围内，锌（Ⅱ）与试剂形成１∶２的紫红色配合物．配合物的最大吸收波长位于５６５ｎｍ处，表观摩尔吸光系数为１．２×１０５Ｌ·ｍｏｌ－１·ｃｍ－１，锌浓度在０～６．０μｇ／１０ｍＬ范围内遵守比尔定律．方法已用于地质化探样品和镁合金中微量锌的测定     

铜离子选择性电极研究铁（Ⅲ）与Tiron，HOx配位化合物

用固态膜铜离子选择性电极研究Ｆｅ（Ⅲ）与１，２－二羟基苯－３，５－二磺酸钠溶液配合物的组成和表观稳定常数．离于强度Ｉ＝０．１ｍｏｌ·Ｌ－１，ｐＨ＝２．１时生成１：１型配合物，ｐＨ＝３．０８时Ｆｅ（Ⅲ）与８－羟基喹啉生成１：１和１：２型两种溶液配位化合物．     

Li—Zn系铁氧体铁磁共振研究

在纯锂铁氧体（Ｌｉ０．５Ｆｅ２．５Ｏ４）基础上，用Ｚｎ２＋离子代换其中Ｌｉ＋０．５Ｆｅ３＋０．５离子，研究了（Ｌｉ０．５Ｆｅ０．５）１－ｘＺｎｘＦｅ２Ｏ４（其中ｘ＝０．０，０．２０，０．３０，０．４０，０．５０）系铁氧体室温铁磁共振效应．结果表明，用Ｚｎ２＋离子代换Ｌｉ＋０．５Ｆｅ３＋０．５离子能有效降低内场和铁磁共振线宽，当频率高于６ＧＨｚ时，铁磁共振线宽与频率成线性关系．     

灵芝良种选育Ⅰ：影响灵芝原生质体形成的因素

对灵芝的原生质体形成条件进行了研究。结果表明,合适的在生质体形成条件为酶组成蜗牛酶４ｇ／Ｌ,溶壁酶５ｇ／Ｌ;ｐＨ７．１７的磷酸缓冲液;酶解温度３０℃;酶解时间４ｈ;菌龄７２ｈ;稳定剂０．６ｍｏｌ／Ｌ的ＫＣｌ。原生质体最高产量为５．２×１０＾６个（ｇ·Ｌ＾－１）。灵芝菌丝释放原生质有顶端的边上二种方式。     

漆树漆酶催化氧化对苯二胺反应的微量热法研究

在厌氧条件下，０．１ｍｏｌ／Ｌ的磷酸盐缓冲溶液中，用微量热法测定了２９８．１５Ｋ的漆树漆酶与对苯二胺反应的摩尔反应焓ΔｒＨｍ＝－１６３．３６±０．３６ｋＪ／ｍｏｌ米氏常数Ｋｍ＝５．５８×１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ和表现一级反应速率常数ｋ１＝８．６３×１０＾－３ｓ＾－１及此条件下用对苯二胺作底物时的漆酶活性值ＥＡ＝０．０４５ＩＵ。     

黑曲霉单宁酶的纯化及部分性质研究

黑曲霉在五倍子单宁的诱导下产生单宁酶。通过（ＮＨ４）２ＳＯ４分形沉淀,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１５０凝胶过滤,从黑曲霉的发酵液和菌丝中纯化得到凝胶电泳均一的单宁酶。酶作用的最适温度为３０℃,最适ｐＨ值为５．５,在温度１０－３０℃和ｐＨ４－６之间保持稳定,金属离子对单宁酶没有的激活作用,Ｆｅ＾２＋和Ｍｎ＾２＋则对酶有抑制作用。     

在酸性溶液中锰（Ⅱ）诱导过—硫酸盐的分解

锰（Ⅱ）诱导过—硫酸根离子（ＨＯＯＳＯ~－_３）分解速度定律是５０℃时在Ｈ_２ＳＯ_４介质中，它的速度常数分别为Ｋ_（Ｍｎ）＝（５．１±０．３）×１０~（－３）和（９．７±０．２）×１０（－３）Ｍ（－１／２）Ｓ（－１）．速度常数对阴离子的浓度和性质是敏感的．在１ＭＨ_２ＳＯ_４溶液中，△Ｈ≠和△Ｓ≠的值分别为３１±２ＫＪ·ｍｏｌ（－１）和－１９４±５Ｊ·ｍｏｌ（－１）·Ｋ（－１）．确定了锰（Ⅲ）的存在作为一个中间体和一短暂的产物．过二硫酸盐，作为一个次产物大体上从链终止用来估算链长．在所有数据计算基础上，认定这个机理与大多数金属诱导过一硫酸盐分解机理完全不同，并且对一些结果复杂情况作了祥细地推证．