木质素降解复合菌的选育及其对芦苇浆卡伯值的影响

筛选木质素降解菌株并从中挑出产漆酶(Lac)和锰过氧化物酶(MnP)能力较强的4株菌株,复合培养得到4种复合菌ABC,ACD,ABD和BCD.复合培养后Lac和MnP产酶高峰较单一培养均有所提前,ABC,ACD的Lac和MnP酶活力活在60～72 h达到最大.BCD的Lac和MnP酶活力均高于其他3种,而且其MnP有两个产酶高峰.芦苇浆经4种复合菌处理后,卡伯值均有所下降,经BCD处理后卡伯值降幅最大,达到(5.3±0.12).     

白腐真菌产木质素降解酶及固定化载体研究

从四种白腐真菌中优选出最适产酶菌株黄孢原毛平革菌（〖WTBX〗Phanerochaete chrysosporium〖WTBZ〗）,并对其在不同载体的附着及产酶情况进行了相关研究.试验结果表明,白腐真菌〖WTBX〗Phanerochaete chrysosporium〖WTBZ〗的锰过氧化物酶（MnP）及木质素过氧化物酶（LiP）活性最高分别可达225.67 U/L、110.35 U/L,较其它三种菌株要高;〖WTBX〗Phanerochaete chrysosporium〖WTBZ〗对尼龙纤维、厨用金刚砂尼龙、纤维海绵、玉米芯及海绵有较好的附着能力,但以厨用金刚砂尼龙、纤维海绵和玉米芯为最佳,而以玉米芯为载体所产生的MnP和LiP活性为最高,分别可达244.94 U/L和263.71 U/L,较未加载体的酶活有所提高且持续时间较长.实验优选出白腐真菌〖WTBX〗Phanerochaete chrysosporium〖WTBZ〗,且其以玉米芯为载体时所产MnP及LiP活性为最高.     

高产芽孢杆菌MS12木聚糖酶发酵条件优化及酶学性质研究

从昆明某磷矿土壤中筛选出一株产木聚糖酶能力较强的菌株——MS12,通过单因素试验初步优化了该菌株的产酶条件.试验结果显示,该菌株最佳产酶培养基为玉米芯粉50 g/L、麸皮40 g/L、NH_4Cl 10 g/L、CaCl_2 5 g/L、NaHPO_42 g/L,pH自然;最佳产酶发酵条件为30℃,180 r/min,装样量30 mL/250 mL三角瓶,震荡培养96 h.经测定,菌株MS12所产木聚糖酶的最适反应温度为65℃,最适反应pH值为7.0,具有较好的pH稳定性. 1 mmol/L Na~+、Ba~(2+)和10 mmol/L Ca~(2+)、Mg~(2+)对酶活有促进作用,Ag~+对酶活有明显的抑制作用.     

一株来源于酒曲的纤溶酶产生菌的鉴定及其酶学性质

从酒曲中分离到一株纤溶酶产生菌,经形态及ITS序列分析鉴定为菊芋小孢根霉(Rhizopus microsporus var.tuberosus).酶学性质研究表明,该纤溶酶的最适作用温度为37,℃,最适作用pH为7.0.在37,℃保温4,h酶活力仍保存95%,57,℃下保温4,h后仍有一定酶活.该酶具有广泛的酸碱适应性,在pH<3.4时仍残留部分活性;最稳定的pH范围是6～8.Zn2+、Cu2+对酶活有抑制作用,Na+、Ca2+、Mn2+对酶活具有明显的促进作用.该酶在人工肠液中具有较好的稳定性,37℃保温4 h后残余酶活仍然保持在80%以上,有望制成注射剂应用于临床.     

多孔菌漆酶性质研究

研究了多孔菌漆酶的产酶曲线及酶作用最适条件;结果表明在该培养条件下,多孔菌第9天达产酶高峰,峰值酶活为412u/ml,酶作用的最适pH值为4.2,最适酶解温度为25℃,Mg2 、Mn2 对漆酶有激活作用,而Ag 、Fe3 和Cl-则能明显抑止漆酶活性.     

秀珍菇废渣中木质素降解酶系的研究

【目的】重点研究秀珍菇废渣中的木质素降解酶系。【方法】对秀珍菇废渣中可能存在的3种木质素降解酶:锰过氧化物酶(Manganese peroxidase,MnP)、木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase,LiP)及漆酶(Laccase,Lac)进行活力测定,并对漆酶的最适pH值和最适温度进行考察。【结果】在秀珍菇废渣中未检测到锰过氧化物酶活力,检测到漆酶和木质素过氧化物酶活力。漆酶的最适pH值为6.2,最适温度为30℃。【结论】较一般食用菌不同,秀珍菇废渣中同时具有木质素过氧化物酶和漆酶活力,并且木质素过氧化物酶活力还较高。     

植酸酶液体发酵条件及酶学性质的研究

植酸酶产生菌黑曲霉 90 3(Aspergillusniger)的最适产酶条件 :初始pH5 .0～ 6 .5 ,温度2 9± 1℃ ,培养时间 4d ,2 5 0ml三角瓶发酵液的装量为 5 0ml,一定量的Fe2 +和Mn2 +对产酶有促进作用 ;酶的最适作用pH为 5 .5～ 6 .0 ,最适作用温度为 37℃ ,该酶在 pH3.0～ 7.0 ,温度 30～ 5 0℃时稳定性较好。     

齿毛菌漆酶的基因克隆、异源表达及脱色研究

通过简并PCR、TAIL-PCR、Site Finding PCR等方法从实验室前期筛选得到的一株齿毛菌中获得漆酶Lac基因(包括启动子)序列,将其c DNA转入Pichia pastoris X33中表达,以ABTS(2,2-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid))为底物测定温度和p H对酶活及其稳定性的影响,并探究重组漆酶的脱色效果.结果表明,Lac DNA长3 129 bp,含有10个内含子,编码的Lac蛋白共有542个氨基酸,与已知漆酶氨基酸序列的相似性最高为60%,在5’端950 bp序列内发现多个可能的启动子元件;成功分泌表达重组漆酶r Lac,在含1 mmol·L-1铜离子的YP培养基中28℃发酵15 d达到酶活最高峰2.89 U·m L-1;酶学性质研究发现,r Lac的最适作用温度和p H值分别为55℃和3.0,且在p H 4~10及20~40℃有较好的稳定性;r Lac对靛类、偶氮类、三苯甲烷类等多种染料都有脱色效果.     

鼠李糖脂对两株木质素降解菌产酶能力的影响

研究了生物表面活性剂鼠李糖脂对黄孢原毛平革菌、简青霉产木质素降解酶能力的影响．结果表明,鼠李糖脂对酶活性的影响与鼠李糖脂的浓度、投加形式、菌种及酶的种类有关．0．0065％的鼠李糖脂不同程度地促进了黄孢原毛平革菌产LiP,MnP,简青霉产LiP,漆酶,0．013％的鼠李糖脂可以促进黄孢产LiP,简青霉产漆酶,但却明显抑制了另外两种酶的活性;鼠李糖脂可以使简青霉产MnP的高峰期提前,但不能提高酶活性．通过影响产酶能力,鼠李糖脂使两株菌对木质素的降解率均高于对照样．此外,接种鼠李糖脂产生菌——铜绿假单胞菌的效果达到甚至超过添加鼠李糖脂的促进效果．     

碱性纤维素酶产生菌株的筛选及其酶学性质研究

【目的】从堆肥中筛选和鉴定产碱性纤维素酶的菌株,对菌株及其酶学特性进行研究。【方法】以刚果红平板染色法进行初筛,摇瓶发酵复筛,分离到高酶活菌株C73。通过形态观察和16SrRNA序列分析对菌株进行鉴定。采用DNS定糖法测定发酵液酶活最适pH值、pH值稳定性、最适温度、热稳定性及常见金属离子、SDS、EDTA等对酶活的影响。【结果】该菌株形态呈杆状,革兰氏阳性,不产芽孢,适宜在pH值8.0~11.0、30~37℃条件下生长。16SrRNA序列比对发现,该菌株与琼斯氏菌(Jonesiasp.)PC1序列相似度大于99%,初步鉴定为琼斯氏菌属菌株。在发酵培养基中,菌体浓度和CMCase活力分别在40h和50h达到最大值,随着发酵时间的延长发酵液pH值稳定在9.5左右。粗酶液的最适作用pH值为10.0,此时CMCase活力达2.3U/mL。在pH值8.0~11.0的范围内保持60%以上的酶活;最适作用温度为60℃,且在30~80℃的范围内保持60%以上的酶活。金属离子Mn2+、Co2+和(NH4)2SO4对酶活力有较强的抑制作用。【结论】菌株C73呈现较高的碱性CMCase酶活、较高的热稳定性和pH值稳定性,具有良好的工业应用前景。     

Cloning and sequencing of a cDNA for a ligninase from Phanerochaete chrysosporium

Lignin is a complex polymer of phenylpropanoid subunits. It is an essential component of woody tissue, to which it imparts structural rigidity. Lignin is remarkably resistant to degradation by most microbes; nevertheless, a few species of white-rot fungi are able to catalyse its oxidation to CO2. Its biodegradation is of great ecological significance because, next to cellulose, lignin is the most abundant renewable polymer on Earth. The first step in lignin degradation is depolymerization, catalysed by the lignin peroxidase isozymes (ligninases). These isozymes are secreted, along with hydrogen peroxide (H2O2) by the fungus Phanerochaete chrysosporium Burds, under conditions of nutrient (nitrogen) limitation. Ligninases are not only important in lignin biodegradation, but are also potentially valuable in chemical waste disposal because of their ability to degrade environmental pollutants. We have undertaken the cloning of the ligninase genes to understand further their regulation and enzymology. We report here the isolation and characterization of a ligninase complementary DNA clone with a full-length insert. The cDNA sequence shows that the sequence of the mature ligninase is preceded by a 28-residue leader, and the mature protein is predicted to have a relative molecular mass of 37,000 (Mr 37K). Consistent with the classification of ligninase as a peroxidase certain residues thought to be essential for peroxidase activity can be identified and near these residues the ligninase shows homology with other known peroxidases. Our cDNA clone has also allowed us to show that expression of ligninase is regulated at the messenger RNA level.     

碳源对多孔菌Polyporus sp.生长和木质素酶活性的影响

研究了多孔菌在不同碳源培养基中生长时对菌丝体生长及木质素酶(漆酶、多酚氧化酶、愈创木酚氧化酶、过氧化物酶)分泌的影响;结果表明,不同碳源对菌丝体生长影响较大,对四种酶类的分泌也有不同的影响,麦草粉和麸皮为碳源时能促进酶类的分泌。     

锰对低碳白口铸铁组织与性能的影响

选用模数为５ｍｍ、７．５ｍｍ、１０ｍｍ的试样．研究０．７－１３％锰合金化对低碳白口铸铁组织与性能的影响．结果表明，在砂型冷却条件下，试样获得马氏体的适宜锰量为５－７％；三种试样的硬度随锰量增加的变化都存在峰值，但出现峰值的锰量不同；冲击韧性、相对韧性、抗弯强度随锰量的变化与硬度有很好的对应关系；抗磨性基本上随硬度增大而提高；抗多冲碎裂性能随锰量增加呈下降趋势；消除铸造应力使低锰试样抗多冲碎裂性能进一步提高．     

CO2跨临界双级压缩循环性能研究及理论分析

为了探索CO2跨临界双级循环系统性能提高的方法,基于热力学循环分析方法,对CO2跨临界双级压缩循环建立了数学模型,并进行了理论分析．结果表明：在分析的几种循环中,2个气体冷却器双级循环最优高压最高,带中间冷却器和膨胀机双级循环最优高压最低;低压缩机效率对整个循环性能的影响要比高压缩机效率更为显著;带中间冷却器的循环存在最佳质量分配比;随蒸发温度增加,带中间冷却器的循环要比2个气体冷却器的循环最优中间压力变化要小;气体冷却器出口温度对循环性能的影响,要比蒸发温度的影响大;相同条件下,2个气体冷却器带膨胀机双级循环和带中间冷却器和膨胀机双级循环性能最优,2个气体冷却器双级循环性能最差,膨胀机循环性能要普遍优于节流阀循环性能．     

海滨锦葵茎尖组织培养再生体系的优化

以茎尖为外植体,对海滨锦葵（Kosteletzkya virginica）再生体系的优化进行了研究,结果表明：茎尖萌发的最适培养基为MS＋IAA0．3mg·L^-1＋ZT0．3mg·L^-1,萌发率为91．11％;继代增殖最适培养基为MS＋IAA0．1mg·L^-1＋KT0．5mg·L^-1,增殖系数为4．67;生根培养基为MS（蔗糖3％、琼脂0．6％、pH值5．8）,生根率为90％。炼苗移栽后,成活率可达60％。     

金属离子在煤生物转化过程中的激活作用研究

研究了5种外源性金属离子对液相和固相培养的煤生物转化率的影响。在5种金属离子对酶活性的影响上,真菌和细菌表现出了不同的金属离子敏感性,大多数金属离子对真菌有激活作用,其中Mn2+在本实验条件中下,对真菌A有最好的激活作用,生物转化率提高了120%;Zn2+将真菌B的生物转化率从8%提高到29%,提高了263%;Fe3+对细菌的溶煤作用有较好的促进效果,生物转化率提高了184%.研究结果表明,细菌转化液总的蛋白含量与金属离子对煤转化率的影响趋势是正相关的。     

激素和添加物对蝴蝶兰组培快繁的影响

以蝴蝶兰人工授粉的果荚种胚和组培苗的叶片、茎尖为外植体,进行组织培养快速繁殖研究.结果表明,果荚种胚是最好的外植体材料,1个果荚可培育出上万个原球茎.种胚诱导原球茎最佳激素组合为:6-BA 0.3mg/L+NAA 0.2 mg/L;原球茎增殖最佳激素组合为:6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;2%蔗糖和10%香蕉泥可以显著促进原球茎增殖;原球茎分化最佳激素组合为:6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;诱导生根IBA 0.5mg/L最佳;炼苗后移栽苗成活率达95%以上.优化后的蝴蝶兰组织培养条件,可为蝴蝶兰快速繁殖工厂化生产提供参考.     

利用工业废盐酸与低品位菱锰矿生产氯化锰的试验研究

介绍了以工业废盐酸和低品位菱锰矿为原料制取氯化锰的工艺研究.通过对酸浸过程的理论与试验研究,讨论了各种因素对锰浸出率及产品质量的影响,得出最佳工艺条件.试验结果表明,在反应温度为80℃、液固比2.5:1、酸的过量系数1.3、时间60min条件下锰浸出率为90%左右,氯化锰产品质量符合HG/T 3816-2006标准要求.     

微生物产酶的不确定性因素确定化的一种方法

微生物产酶是一个具有不确定性的复杂过程．将数学上的关联分析思想应用于白腐菌的产酶过程,计算影响该菌产酶的四种因素的关联度．结果表明,其中含水率与白腐菌分泌木素过氧化物酶、锰过氧化物酶的关联度最大,分别达0．8310和0．7479,说明含水率是影响该菌产酶的最主要因素．此外,提出可建立GM（1,1）模型用于日产酶量的预测,为今后探索微生物产酶条件提供了方法参考．     

纤维素酶产生菌的筛选及酶学性质研究

从城市生活垃圾中分离到一株分解纤维素能力最强,并产生胞外酶的菌株,初步确定为芽孢杆菌,并对该菌所产的纤维素酶的酶学性质进行了初步研究.该纤维素酶反应最佳温度为50℃;最适 pH7.0;酶在40～50℃热稳定性较好; CMCase活力在 pH 6.0～7.0处可保持70%以上, FPA酶活在pH 6.0～7.0处可保持79%以上; Ca2＋和Mg2＋对酶反应表现为明显的促进作用,而Fe3＋和Mn2＋对酶反应有抑制作用, Na＋、Zn2＋和K＋对酶的影响很小.