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碱性纤维素酶产生菌株的筛选及其酶学性质研究
引用本文:陈雅娟,董园,芦志龙,陈东,黄日波.碱性纤维素酶产生菌株的筛选及其酶学性质研究[J].广西科学,2014,21(1):28-33.
作者姓名:陈雅娟  董园  芦志龙  陈东  黄日波
作者单位:广西大学生命科学与技术学院;广西科学院;非粮生物质酶解国家重点实验室;国家非粮生物质能源工程技术研究中心;广西生物质产业化工程院;广西生物炼制重点实验室;
基金项目:国家973项目(2010CB736209);国家863项目(2012AA022106);国家国际合作项目(2010DFB63590,2011DFA61910);广西科学研究与技术开发计划项目(桂科合10100019-21,桂科攻1099071,桂科合1140010-15);广西自然科学基金项目(2012GXNSFAA053062);广西科学院基本科研业务费项目(11YJ24SW08);广西科技创新能力与条件建设计划项目(桂科能12237022);广西科学基金项目(13-051-08)资助
摘    要:【目的】从堆肥中筛选和鉴定产碱性纤维素酶的菌株,对菌株及其酶学特性进行研究。【方法】以刚果红平板染色法进行初筛,摇瓶发酵复筛,分离到高酶活菌株C73。通过形态观察和16SrRNA序列分析对菌株进行鉴定。采用DNS定糖法测定发酵液酶活最适pH值、pH值稳定性、最适温度、热稳定性及常见金属离子、SDS、EDTA等对酶活的影响。【结果】该菌株形态呈杆状,革兰氏阳性,不产芽孢,适宜在pH值8.0~11.0、30~37℃条件下生长。16SrRNA序列比对发现,该菌株与琼斯氏菌(Jonesiasp.)PC1序列相似度大于99%,初步鉴定为琼斯氏菌属菌株。在发酵培养基中,菌体浓度和CMCase活力分别在40h和50h达到最大值,随着发酵时间的延长发酵液pH值稳定在9.5左右。粗酶液的最适作用pH值为10.0,此时CMCase活力达2.3U/mL。在pH值8.0~11.0的范围内保持60%以上的酶活;最适作用温度为60℃,且在30~80℃的范围内保持60%以上的酶活。金属离子Mn2+、Co2+和(NH4)2SO4对酶活力有较强的抑制作用。【结论】菌株C73呈现较高的碱性CMCase酶活、较高的热稳定性和pH值稳定性,具有良好的工业应用前景。

关 键 词:纤维素酶  琼斯氏菌  酶学性质
收稿时间:2013/4/2 0:00:00
修稿时间:2013/10/12 0:00:00

Screening of Alkaline Cellulase-producing Strains and Research on Enzymatic Characteristics
CHEN Ya-juan,DONG Yuan,LU Zhi-long,CHEN Dong and HUANG Ri-bo.Screening of Alkaline Cellulase-producing Strains and Research on Enzymatic Characteristics[J].Guangxi Sciences,2014,21(1):28-33.
Authors:CHEN Ya-juan  DONG Yuan  LU Zhi-long  CHEN Dong and HUANG Ri-bo
Institution:College of Life Science & Technology of Guangxi University, Nanning, Guangxi, 530004, China,College of Life Science & Technology of Guangxi University, Nanning, Guangxi, 530004, China,Guangxi Academy of Sciences, State Key Laboratory of Non-Food Biomass and Enzyme Technology, National Engineering Research Center for Non-food Biorefinery, Guangxi Biomass Industrialization Engineering Institute, Guangxi Key Laboratory of Biorefinery, Nanning, Guangxi, 530007, China,Guangxi Academy of Sciences, State Key Laboratory of Non-Food Biomass and Enzyme Technology, National Engineering Research Center for Non-food Biorefinery, Guangxi Biomass Industrialization Engineering Institute, Guangxi Key Laboratory of Biorefinery, Nanning, Guangxi, 530007, China and College of Life Science & Technology of Guangxi University, Nanning, Guangxi, 530004, China;Guangxi Academy of Sciences, State Key Laboratory of Non-Food Biomass and Enzyme Technology, National Engineering Research Center for Non-food Biorefinery, Guangxi Biomass Industrialization Engineering Institute, Guangxi Key Laboratory of Biorefinery, Nanning, Guangxi, 530007, China
Abstract:
Keywords:cellulase  Jonesia sp    enzymatic properties
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