人芽囊原虫在RPMI1640及LES培养中的比较

寻求一种在人芽囊原虫培养方面比传统的洛克氏液 鸡蛋 血清培养基(Locke′s egg serummedium ,LES)更优越的培养基 ,建立人芽囊原虫的纯培养系 ,为进一步研究人芽囊原虫的各种特性奠定基础 .将从临床获得的腹泻病人粪便标本分别接种于RPMI164 0及LES两种培养基中进行人芽囊原虫的培养 ,观察人芽囊原虫在两种培养基内的生长趋势和形态结构 ,比较两种培养基的优缺点 .结果表明 ,RPMI164 0培养管中的虫体密度比较高 ;RPMI164 0培养基中的虫体存活时间比较长 ;RPMI164 0培养基内可见空泡型、颗粒型、复分裂型和似包囊型 .结论表明 ,RPMI164 0培养基比LES培养基在人芽囊原虫的培养方面更优越 .     

Elf-1基因在急性髓细胞性白血病中的表达情况

目的:建立实时定量PCR检测Elf-1基因表达水平的方法,了解急性髓细胞性白血病(AML)患者外周血Elf-1基因表达水平.方法:采用SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR和相对定量分析法检测33例AML患者:M2型17例、M3型6例、M5型10例和20例健康人外周血的单核细胞的Elf-1表达情况,以β2微球蛋白基因(β2M)作为内参,采用公式2~(-△Ct)×100%计算Elf-1基因表达水平.结果:AML组Elf-1表达水平(13.518±19.197)%明显高于健康对照组(2.044±1.321)%(P<0.01),不同AML亚型之间Elf-1的表达水平没有显著性差异(P=0.52),但各亚型AML的Elf-1的表达水平均与健康对照组比较均有显著性差异(P<0.01).结论:建立SYBR Green Ⅰ荧光实时定量PCR分析外周血Elf-1表达水平的方法,检测急性髓细胞性白血病Elf-1基因高表达情况.     

猪源产ESBLs大肠杆菌三种耐药基因检测及分析

了解福建省闽西地区猪源产ESBLs大肠杆菌耐药现状。从龙岩市10个规模猪场分离的大肠杆菌中,按CLSI推荐的纸片扩散法筛选产ESBLs菌,对其分别用CTX-M、TEM和SHV等3种引物进行PCR扩增及测序分析。结果表明,105株大肠杆菌的产ESBLs检出率为28.6%(30/105);其ESBLs基因亚型以CTX-M型和TEM型为主,检出率分别为56.7%(17/30)和36.7%(11/30),SHV型检出率13.3%(4/30)较低;5株菌同时携带CTX-M和TEM基因,2株菌同时携带CTX-M和SHV基因;测序结果表明,共检测出3种基因型:CTX-M-15、TEM-2和SHV-12。     

云南传统发酵豆豉中细菌的分离与分子鉴定

目的:为了明确云南传统发酵豆豉中细菌的种类,对云南传统发酵的豆豉进行研究。方法:采用平板稀释法进行菌种分离,利用分子生物学方法对分离到的菌株进行鉴定。结果:随机选择的130株细菌菌株属于3个属5个种,分别是芽胞杆菌属(Bacillus)3个种、葡萄球菌属(Staphylococcus)1个种和肠杆菌属(Enterobacter)1个种。其中枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)占所分离菌株的79.23%,是云南传统发酵豆豉的优势菌。结论:分离出的枯草芽胞杆菌有望作为实现云南传统发酵豆豉纯种发酵的主要菌种。     

白银地区丙型肝炎基因分型的变化及临床意义

研究白银地区2013～2019年丙型肝炎基因型的分布情况,并与2011～2012年分型情况进行对比,为临床根据变化趋势制定合理的抗病毒治疗方法提供参考。收集白银地区ELISA抗体阳性丙肝患者217例,采用PCR反向斑点杂交法检测基因型。204例HCV-RNA阳性标本中,1b亚型122例(66.7%),1a亚型2例(3.4%),2a亚型49例(24.1%);3a亚型12例(5.8%)。白银地区丙型肝炎病毒感染以1b型为主,其次是2a型,没有检出在我国常见的1b/2a混合感染的患者。但在白银地区发现了中国其它地区少有发现的2c、3a型的感染。区域特异性HCV-RNA基因分型结果为制定白银地区丙型肝炎的治疗和预防个体化方案提供强有力的依据。     

H5N1亚型禽流感毒株A/Duck/HuBei/3/2005的分子特征及致病性研究

采用分子生物学方法,对1株2005年从湖北省某县分离获得的禽流感病毒株(A/Duck/HuBei/3/2005)进行全基因组序列测定.序列分析显示,该分离株为H5N1亚型.HA蛋白在HA1和HA2连接处,含有连续多碱性氨基酸模体(-RRKKR-).根据进化分析结果,分离株A/Duck/HuBei/3/2005的7个基因来源于2004～2005年湖南地区流行株(CK/HN/999/05,DK/HN303/04),但是PA基因片段发生了重排,来源于野禽.动物实验显示DK/HB/3/05对鸡和鸭均具有高致病性;对小鼠有较低致病性.     

中华人民共和国国家标准批准发布公告

20 0 1年第 10号 (总第 34号 )国家质量技术监督局批准以下 15 7项国家标准 ,现予以公布序号标准号标准名称代替标准号批准日期修订日期实施日期1ＧＢ Ｔ　 184 48 1- 2 0 0 1实验动物　体外寄生虫检测方法ＧＢ Ｔ　 14 92 6 33- 1994 1994 - 1- 112 0 0 1- 8- 2 92 0 0 2 - 5- 12ＧＢ Ｔ　 184 48 2 - 2 0 0 1实验动物　弓形虫检测方法ＧＢ Ｔ　 14 92 6 34 - 1994 1994 - 1- 112 0 0 1- 8- 2 92 0 0 2 - 5- 13ＧＢ Ｔ　 184 48 3- 2 0 0 1实验动物　兔脑原虫检测方法ＧＢ　　 14 92 6 35- 1994 1994 - 1- 112 0 0 1- 8- 2 92 0 0 2 - 5…     

白银地区女性生殖道感染HPV基因型调查分析

调查白银地区女性生殖道感染HPV基因型分布状况,了解不同亚型HPV在女性中的感染情况及流行病学意义。对甘肃省中医院白银分院健康体检、门诊和住院的患者共640例,采集阴道分泌物标本,采用PCR-反向斑点杂交法检测21个HPV基因型。640例样本中检出HPV阳性者65例,检出率为10.2%。共查出15种亚型。HPV阳性者中低危型占4.6%,高危型占78.5%,两型和两型以上混合感染占16.9%;640例样本中感染率最高的为高危HPV39型(2.2%)和HPV16(2.2%),其它分别为HPV58(1.9%),HPV52(1.3%),HPV66(0.7%),HPV6(0.6%),HPV51(0.6%),HPV56(0.6%),HPV18(0.5%),HPV53%(0.5%),HPV31(0.3%),HPV68(0.3%),HPV33(0.3%),HPV42(0.3%),HPV,81(CP8304)(0.2%)。白银地区女性生殖道感染HPV基因分布有区域特点,HPV检测具有重要的流行病学意义。     

BALB/c小鼠遗传污染对单克隆抗体制备的影响

目的检测BALB/c小鼠遗传污染对单克隆抗体制备实验的影响。加强近交系小鼠的饲养管理和重视实验动物的遗传质量检测。方法使用遗传生化标记方法对购进的两批BALB/c小鼠进行了碱性磷酸酶-1(Akp-1)等13个生化位点的检测。结果注射杂交瘤细胞后不产生腹水,经生化检测发现,购买的第一批BALB/c小鼠,在过氧化氢酶-2(Ce-2)等4个生化位点发现杂合基因,第二批BALB/c小鼠在过氧化氢酶-2(Ce-2)等8个生化位点发现杂合基因。结论本实验说明在实验动物的饲养管理上存在漏洞,上述两批BALB/c小鼠未严格按照国家实验动物管理操作规程操作,必须规范实验动物饲养管理,加强实验动物遗传检测,这是保证动物试验结果准确可靠不可或缺的重要环节。     

云南阿昌族、景颇族、傈僳族育龄妇女叶酸代谢相关基因遗传多态的比较研究

本研究以云南省阿昌族、景颇族和傈僳族3个特有少数民族的育龄妇女(每个民族各200例,共600例)作为研究对象,采用SNap Shot技术对MTHFR(C677T、A1298C)、MTRR(A66G)、MTHFD(A1958G、C401T)、MTR(A2756G)和RFC1(A80G)5个与叶酸代谢相关的基因中的7个多态位点进行突变检测分析,以期揭示叶酸代谢相关基因的SNP频率在云南上述3个少数民族育龄妇女中的分布差异,并将本研究的数据与中国已报道地区数据相比较,为评估不同民族的叶酸代谢障碍风险提供参考数据.研究结果显示:MTHFR基因的C677T和A1298C,MTRR基因的A66G及RFC1基因的A80G位点的基因型频率在3个不同民族的育龄妇女群体中的差异存在统计学意义(χ2=21.98,16.92,30.32,57.97;P0.05);MTHFR C677T,MTHFR A1298C,MTRR A66G及RFC1 A80G位点的等位基因频率在统计学上存在差异(χ2=12.73,11.84,6.87,41.32;P0.05).特别对于纯合突变,傈僳族MTHFR的677TT和1298CC,MTHFD的1958GG和401TT及RFC1的80GG纯合突变基因型频率(依次为11.6%、5.6%、79.9%、11.7%、63.0%)均比阿昌族(依次为4.0%、4.8%、75%、11.3%、36.9%)和景颇族(依次为4.0%、4.1%、69.8%、11.4%、26.5%)高;而景颇族(20.3%)则表现出较阿昌族(9.2%)和傈僳族(3.6%)高的MTRR 66GG纯合突变基因型频率.云南特有少数民族育龄妇女MTHFR C677T、A1298C,MTRR A66G 3个位点的基因型频率和等位基因频率与我国其他22个地区女性相比,存在一定的差异.上述结果初步揭示云南特有的阿昌、景颇和傈僳3个少数民族在上述5个与叶酸代谢相关的基因中的SNP多态具有一定的群体特异性和地域特异性.     

病毒样颗粒为阳性对照的H5N1实时荧光定量PCR检测方法的建立

合适的标准品对实时荧光定量PCR(qPCR)检测高致病性H5N1禽流感病毒(avain influenza virus,AIV)十分重要.本研究将H5N1AIV HA基因的部分序列插入到能够表达MS2噬菌体病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)DNA序列的表达载体上,诱导表达后得到了包裹有H5N1AIV HA基因RNA片段的VLP.该VLP能够耐受核酶的消化,形态与MS2噬菌体病毒颗粒形态相同.利用表达的VLP作为阳性标准品及设计的特异性荧光探针、淬灭链,使用优化的qPCR反应体系,得到qPCR检测H5N1亚型AIV的阳性对照标准曲线.研究结果为高致病性H5N1亚型AIV的准确定量检测提供了基础.     

MOLECULAR PHYLOGENCY OF FIVE BLUETONGUE VIRUSES

对蓝舌病毒(BTV)血清型2、11和13的双链RNA中L3基因的全序列进行了测定,该基因编码这种病毒的重要内壳蛋白质(VP3),应用前人测定的血清型10和17的BTV的L3基因序列,共5种美国存在的BTV的L3基因.该病毒的每种L3基因片断都有2772个核苷酸,包含一个开放读框(ORF).这个开放读框(ORF)编码由901个氨基酸组成的蛋白质,VP3(分子量103kD),其等电点为6.0.用这5种蓝舌病毒血清型的核苷酸和氨基酸序列进行分子系统学分析发现,BTV-2血清型与BTV-10、11、13和17的距离较远,美国的五种血清型BTV可分为两个不同的类群.     

人乳头瘤病毒基因分型检测在宫颈癌早期筛查中的应用

目的探讨女性生殖道感染人乳头瘤病毒（HPV）基因检测与颈癌前病变的关系。方法采用HPV分型基因检测系统对妇科门诊就诊的妇女进行宫颈细胞HPV DNA检测（同时检测5种低危型和18种高危型HPV亚型）。结果827例标本中共检出HPV阳性210例（25．4％）,共检出20种HPV亚型,其中单纯低危型HPV亚型感染45例（5．4％）,单纯高危型HPV亚型感染142例（17．2％）,高危、低危亚型共同感染13例（1．6％）;检出感染单一HPV亚型187例（22．6％）,感染两种亚型以上23例（2．8％）。低危型主要为HPV11,其次为HPV43、6;高危型主要为HPV16、其次为58、31、33、18等亚型。结论女性生殖道HPV感染者较易发生颈癌前病变,提示早期发现及防治HPV感染对预防子宫颈癌的发生具有重要意义。     

Gene analysis of 400 cases of thalassemia

目的:应用基因诊断技术对400例病人进行地中海贫血(简称地贫)基因检测,了解其基因突变的类型,旨在为临床预防地贫重症患儿的出生提供指导.方法:400个样本分别检测α-地贫及β-地贫基因型,α-地贫采用gap - PCR技术检测东南亚型缺失(--SEA)、右侧缺失(-a3.7)和左侧缺失(-a4.2),β-地贫采用聚合酶链反应(PCR) -膜反向点杂交技术(RDB)检测β-珠蛋白基因上的17个位点突变.结果:在进行地贫基因检查的400例病人中,检出α-珠蛋白基因缺失的有118例,检出β-珠蛋白基因突变者共78例,均为杂合子,检出αβ复合型地贫者6例,检出Barts水肿胎儿1例.结论:基因诊断技术能确诊地贫缺失或突变,检测绒毛、羊水或脐带血时须避免母体血污染.     

翘嘴鳜淀粉酶基因SNPs和微卫星位点多态性的检测

本研究主要检测翘嘴鳜淀粉酶(amylase,AMY)基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)和微卫星位点多态性.实验采用PCR产物直接测序法(PCR-direct sequencing,PCR-DS)检测翘嘴鳜AMY基因组序列的SNPs和微卫星位点,并使用创造限制酶切位点PCR法(created restriction sites PCR,CRS-PCR)和PCR-DS法对SNPs进行分型,应用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测AMY基因微卫星位点的多态性.实验结果发现AMY基因第1内含子有一个SNP位点A1,第5内含子有3个SNPs位点(A2、A3和A4);此外,第5内含子中还存在一个微卫星位点B1,共检测到4个等位基因,有9种单倍型.在翘嘴鳜群体中,4个SNP位点呈中度遗传多样性,而微卫星位点表现出高度遗传多样性.     

nm23转移抑制基因表达在结直肠癌淋巴结转移中的意义

人类肿瘤转移抑制基因nm23定位于17号染色体,有H_1和H_2两个亚型,编码17KD蛋白质,氨基酸排列顺序与二磷酸核苷激酶(NDPK)高度同源。已发现nm23基因的等位基因缺失,突变和低表达与多种人类肿瘤转移相关。nm23基因产物的表达与结直肠癌转移的关系及意义尚无一致意见。本文以结直肠癌根治性手术后全数淋巴结检查为基础(平均每例46.25个),应用S—P技术检测20例结直肠癌nm23基因产物的表达情况。结果表明,nm23基因产物的表达与淋巴结转移个数之间呈明显负相关(r=-16.58,P<0.01);而在有无淋巴结转移之间,差异无显著性(P>0.05)。我们认为:结直肠癌有淋巴结转移时,nm23基因产物的表达情况有助于判断转移的程度,而对估计有否淋巴结转移多方面的意义不大。     

双价抗菌肽B、D基因l转化辣椒的研究

以"雪峰"椒为材料,建立了以子叶为外殖体,直接分化成苗的离体再生体系,其主要培养基配方分别为1)芽分化培养基Ms+BA3-5 mg/L+IAA1-2 mg/L;2)芽伸长培养基Ms+BA1-2 mg/L;3)生根培养基1/2MS+IAA0.5-1 mg/L.利用农杆菌介导法将双价抗菌肽Cecropin B、Cecropin D基因导入辣椒,获得了再生植株,经PCR和Southem杂交检测,表明目的基因已整合到辣椒基因组中,获得了转基因植株.     

北京地区实验大鼠金黄色葡萄球菌的 检测结果及 MLST 分型分析

目的 了解北京地区实验大鼠金黄色葡萄球菌的携带情况及分子特征,为实验大鼠金黄色葡萄球菌的防控 提供基础信息。 方法 按照 GB / T 14926. 14—2001 实验动物金黄色葡萄球菌检测方法,对 2008—2017 年北京地区 实验大鼠进行检测,并按年份和季节对检出情况进行分析;然后,对其中主要菌株进行 MLST 分型及分析。 结果 2008—2017 年在北京地区实验大鼠中检测到金黄色葡萄球菌 165 株,阳性率为 8. 44% ;2013 年达到金葡菌阳性峰 值(39 株,18. 48% ) ,而阳性率在季节间的差异不明显。 MLST 分型将 148 株金黄色葡萄球菌分为 7 个型别( ST8、 ST3、ST1、ST6、ST2871、ST88 及 ST641) ,其中 ST1 占比最大( 51. 35% ) ,其次是 ST2871( 30. 41% ) ,其余 ST 型别占比 都低于 10% ;进一步分析发现其具有显著的时空分布特点,并存在进化相关性。 结论 本研究为实验大鼠金黄色 葡萄球菌的防控提供了基础信息。     

云南产玫瑰花化学成分研究

从云南产玫瑰花干花瓣经甲醇提取,硅胶柱层析,高效液相色谱分离提纯得到6个化合物,通过波谱方法分别鉴定为山奈酚-7-O-β-D-半孔糖皮蒽(1),山奈酚(2),槲皮黄酮(3),黄杉素-4'-甲基醚(4),(-)-表儿茶素(5),二氢染料木素(6).其中化合物(2)、(3)、(5)、(6)为首次从该植物中分离得到.     

苦楝树春季物候期特征及其与农业界限温度关系

根据广西 12个市县气象站对苦楝物候观测资料 (其中 2 4°N以北 4个点 ,2 4°N和以南 8个点 ,资料年限14年～ 19年 ) ,发现 ,各站苦楝春季平均芽开放期 (y芽开放 )、展叶平均始期 (y展叶始 )、开花平均始期 (y开花始 )与当地经度、纬度、冬季平均气温呈正相关关系 (r芽开放 =0 .85 * * ,r展叶始 =0 .86 * * ,r开花始 =0 .99* * * )。在广西 2 4°N及以南地区 ,用各站逐年 1月平均气温 (X1 1 )、≥ 10℃始日 (X1 2 )和头年≥ 15℃终日 (X1 3 )建立的苦楝物候期预测模型 :y1 芽开放 =87.995 - 0 .2 6 3X1 1 + 0 .16 3X1 2 - 0 .12 3X1 3(r =0 .5 5 * * * ,n =130 ) ;y1 展叶始 =74.95 3 - 0 .35 8X1 1+ 0 .2 15 X1 2 + 0 .111X1 3 (r =0 .70 * * *,n =130 ) ;y1 开花始 =46 .0 6 3 - 0 .2 6 7X1 1 + 0 .2 5 0 X1 2 + 0 .0 6 5 X1 3(r =0 .71* * * ,n =130 )。在广西 2 4°N以北地区 ,用各站逐年≥ 5℃初日 (X2 1 )、1月平均气温 (X2 2 )和头年≥ 10℃终日 (X2 3)建立的苦楝物候期预测模型 :y2芽开放 =87.2 0 4+ 0 .12 3X2 1 - 0 .2 16 X2 2 - 0 .0 5 X2 3(r=0 .5 0 * * ,n =6 9) ;y2展叶始 =80 .5 72 + 0 .12 6 X2 1 - 0 .334X2 2 - 0 .142 X2 3(r =0 .6 4* * *,n =6 9) ;y2开花始 =89.