苦参膜对阴道常见菌生长影响的体外研究

目的:对阴道内主要优势乳杆菌以及阴道常见致病菌进行体外苦参总碱干预实验，观察其对细菌体外生长影响，明确苦参膜对阴道微生态恢复作用。方法:通过2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色法测定不同浓度的苦参膜主要有效成分苦参总碱对阴道常见致病菌金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏、白色念珠菌和阴道常见优势乳杆菌卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌的最低抑菌浓度(MIC);牛津杯法测定对致病菌抑菌活性；直径法测定优势菌菌落生长直径变化。结果:苦参总碱对金黄色葡萄球菌MIC为12.5 mg/mL,对大肠杆菌MIC为25 mg/mL,对白色念珠菌MIC为50 mg/mL,对卷曲乳杆菌MIC为12.5 mg/mL,对鼠李糖乳杆菌及罗伊氏乳杆菌的MIC为100 mg/mL,对加式乳杆菌的MIC为6.25 mg/mL。当苦参总碱浓度低于MIC值时，对阴道常见致病菌生长均有抑制作用，对鼠李糖乳杆菌具有促进增殖的作用，对卷曲乳杆菌、加氏乳杆菌及罗伊氏乳杆菌具有一定抑制作用。结论:临床给药剂量下，苦参膜能抑制阴道常见致病菌生长但不抑制阴道优势乳杆菌生长，可作为天然抗生素用于阴道炎治疗，并调节阴道微生态失...     

壳聚糖的抑菌作用及其稳定性研究

研究了壳聚糖对食品中常见微生物的抑制作用,结果表明:3种不同分子量的壳聚糖(50 kD,100kD,200kD)对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、短小棒状杆菌、大肠杆菌、白色念珠菌等所有被试菌都有明显的抑制作用,随分子质量增大,壳聚糖的抑菌作用逐渐减小,相应最小抑菌浓度在0.5 g/L以上.同时探讨了壳聚糖抑菌作用的稳定性,结果表明壳聚糖的热稳定性良好,环境中的金属离子对壳聚糖的抑菌性能有一定的影响.     

具抑菌活性的乳酸菌的筛选

采用筛选培养基从泡菜中筛选乳酸菌株,并对其进行生化鉴定．以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌为指示菌,采用抑菌圈法测定所筛菌株的抑菌活性．生化鉴定结果显示,筛选的3株乳酸菌分别为嗜热链球菌、植物乳杆菌及鼠李唐乳杆菌,但仅植物乳杆菌对金黄色葡萄球菌有抑菌作用,抑菌效果为发酵液〉上清液〉菌悬液．成功获得了1株对金黄色葡萄球菌有抑菌作用的植物乳杆菌,该植物乳杆菌中起抑菌作用的主要是发酵液中的胞外代谢产物．     

需氧性阴道炎的菌群分布和耐药性分析

目的 探讨需氧性阴道炎(aerobic vaginitis,AV)的菌群分布情况,了解各细菌对临床常用抗菌药物的敏感性和耐药性,为临床选取合理抗菌药物提供理论依据.方法 通过湿片镜检并结合临床特征选取AV和疑似AV患者360例,进行阴道分泌物的细菌培养和常规药物敏感试验.结果 360例标本中有98例为混合感染,阴道分泌物培养结果 除需氧菌为优势菌外,还可见合并感染的病原菌有白色念珠菌、光滑念珠菌、阴道加德纳菌.阴道分泌物培养结果 显示革兰阳性菌172株(47.78％),革兰阴性菌188株(52.22％).最多见的细菌为大肠埃希菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌、肠球菌属,最多见的真菌为白色念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌.肠杆菌科细菌对碳青霉烯类抗菌药物未见耐药株,无乳链球菌对环丙沙星、左氧氟沙星、克林霉素表现出较高的耐药性,临床上青霉素类仍为首选药物.葡萄球菌未出现利奈唑胺和万古霉素耐药株,肠球菌中粪肠球的耐药率比屎肠球高,出现了2株万古霉素耐药株.结论 临床根据药敏结果 选择用药治疗综合性AV,更有利于疾病的转归和治愈.     

乳酸杆菌产胞外多糖培养条件的优化

从自制泡菜汁中提取乳杆菌,经生化鉴定确认其细菌菌属,再从乳酸杆菌中提取EPS并用苯酚-硫酸法进行多糖含量的测定。在温度、pH值、葡萄糖含量和实验时间单因素实验的基础上,采用四因素三水平正交试验对LAB EPS产量的影响进行了研究,最终确定泡菜中乳酸杆菌获得高产胞外多糖的最佳条件和最佳组合为,温度35 ℃,葡萄糖质量分数1.5%,pH值6.5,发酵时间10 h.     

前列腺癌的生物标记物——外分泌miRNAs

miRNAs是一类非编码RNAs,可以调节基因表达。现发现miRNAs的表达与癌症发生相关,可以作为一种癌症的生物标记物。在胞外液中miRNAs以不同形式存在:miRNAs与Ago2蛋白结合后进入细胞外囊泡中,或者进入高密度脂蛋白分子中。这些miRNAs被认为是潜在的,非入侵性的疾病诊断和检查工具。在本文中,我们主要讨论胞外miRNAs的生物学功能,以及这些胞外囊泡中miRNAs作为前列腺癌生物标记物的潜在作用。     

利用PCR-DGGE技术分析微生态制剂在传代过程中的菌群变化

利用变性梯度凝胶电泳（denaturing gradient gel electrophoresis, DGGE）技术,结合传统平板培养法对实验室研制的1种由乳酸菌和芽孢杆菌组成的微生态菌剂WS-401及其在连续转接培养过程中细菌种群组成的动态变化进行分析。WS-401原液的活菌数为2×107 cfu/mL,且细胞个体形态多样。将分离自原液的3株细菌进行DGGE分析,出现2种指纹谱带,对照标准的DGGE指纹图谱库和序列分析,分别被鉴定为蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）和嗜热链球菌（Streptococcus thermophilus）。将该菌剂分别在LB和MRS两种培养基中30℃或37℃连续转接5次,DGGE分析每次转接后培养物的菌群组成,结果发现,随着转接次数的增加,微生物菌群的种类减少,在LB培养基中转接5次后优势菌群只有蜡状芽胞杆菌,而在MRS培养基中转接后优势菌群为植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）和类干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）。由此说明,微生物的营养基质和培养条件对微生态制剂在传代过程中的菌群组成和动态变化有重要影响。     

应用16SrDNA序列分析对砾石接触氧化反应器中细菌多样性

 运用分子生物学手段,对砾石接触反应器内的典型区域,包括石球表面的生物膜、石球内部污泥及反应器底部的沉淀污泥,通过DNA提取、PCR扩增、纯化与回收、TA克隆、序列测定,基因比对等方法,对反应器内的细菌多样性进行分析。结果表明,系统中主要存在好氧呼吸菌群及厌氧发酵菌群两大类,优势菌群为以呼吸代谢为主的假单胞菌属、以发酵为主要代谢方式的拟杆菌/噬纤维菌菌属和纤毛菌属。同时好氧菌群中还发育有α蛋白菌、β蛋白菌、γ蛋白菌、硝化螺菌属、土壤杆菌属、衣原体属、葡萄糖杆菌属及褐色高温单孢菌属细菌;厌氧菌群中则发育属于螺旋体属、δ蛋白菌、反硝化菌、乳杆菌属;此外,使生物量的增长减少的各种慢速生长菌群也是本系统内的一大特色菌群。生物多样性的存在,是污泥减量化研究的关键。     

生物砾间接触氧化反应器中原核生物多样性及其对剩余污泥减量化的贡献

采用分子生物学手段，通过构建16S rRNA基因文库，对新型剩余污泥减量化处理技术——生物砾间接触氧化反应器 （GCOR） 中悬浮颗粒的原核生物多样性进行了系统发育分析，并讨论了多种原核生物共存对剩余污泥减量化的贡献. 结果表明，颗粒的原核生物可分为好氧呼吸菌群与厌氧水解发酵菌群两大类. 其中，优势菌群分别是以呼吸代谢为主的假单胞菌属和以发酵为主要代谢方式的拟杆菌/噬纤维菌菌属，它们的16S rRNA序列各占文库的17%.此外，好氧菌群中还发育有α蛋白菌、β蛋白菌、γ蛋白菌、亚硝化螺菌属、土壤杆菌属、衣原体属、葡萄糖杆菌属及褐色高温单孢菌属细菌；厌氧菌群中则发育属于螺旋体属、δ蛋白菌、反硝化菌、乳杆菌属、真杆菌属的原核生物.反应系统中两大相反环境多种原核生物的共存，为在降解污水有机物的同时，达到剩余污泥减量化做出巨大贡献.     

与己醛具有群体感应协同抑制效应的精油成分组合筛选研究

为了减少精油作为抗菌剂的实际使用量,研究了对胡萝卜软腐欧氏杆菌(蔬菜腐败菌)的群体感应具有协同抑制作用的精油成分组合。基于胡萝卜软腐欧氏杆菌的最小抑菌浓度和分级抑菌浓度,从9种精油成分中筛选出与己醛具有协同抑菌作用的4个精油成分组合,利用紫色杆菌CV026和胡萝卜软腐欧氏杆菌筛选其中对二者群体感应具有协同抑制效应的精油成分组合,进一步利用能够判别两种物质是否具有协同作用的金氏公式验证,发现己醛只有与香叶醇组合才具有较好的群体感应协同抑制效果,而且有效浓度仅为己醛和香叶醇单体最小抑菌浓度的1/8和1/16。该组合对紫色杆菌CV026和胡萝卜软腐欧氏杆菌的群体感应相关指标均具有较好的抑制效果,其中群体感应指标中的产紫色菌素、游泳运动、群集运动、产胞外多糖和生物被膜形成的抑制率分别为52.91%、58.19%、51.49%、65.03%和69.84%。通过扫描电子显微镜和激光共聚焦显微镜进一步观察到己醛联合香叶醇对胡萝卜软腐欧氏杆菌生物被膜的形成具有明显的破坏作用。研究结果表明,具有协同抑制腐败菌群体感应作用的己醛与香叶醇组合,可以在降低精油成分实际使用量的同时,有效抑制腐败菌的腐败特性。     

Structural identification of a bacterial quorum-sensing signal containing boron

Cell-cell communication in bacteria is accomplished through the exchange of extracellular signalling molecules called autoinducers. This process, termed quorum sensing, allows bacterial populations to coordinate gene expression. Community cooperation probably enhances the effectiveness of processes such as bioluminescence, virulence factor expression, antibiotic production and biofilm development. Unlike other autoinducers, which are specific to a particular species of bacteria, a recently discovered autoinducer (AI-2) is produced by a large number of bacterial species. AI-2 has been proposed to serve as a 'universal' signal for inter-species communication. The chemical identity of AI-2 has, however, proved elusive. Here we present the crystal structure of an AI-2 sensor protein, LuxP, in a complex with autoinducer. The bound ligand is a furanosyl borate diester that bears no resemblance to previously characterized autoinducers. Our findings suggest that addition of naturally occurring borate to an AI-2 precursor generates active AI-2. Furthermore, they indicate a potential biological role for boron, an element required by a number of organisms but for unknown reasons.     

The major Vibrio cholerae autoinducer and its role in virulence factor production

Vibrio cholerae, the causative agent of the human disease cholera, uses cell-to-cell communication to control pathogenicity and biofilm formation. This process, known as quorum sensing, relies on the secretion and detection of signalling molecules called autoinducers. At low cell density V. cholerae activates the expression of virulence factors and forms biofilms. At high cell density the accumulation of two quorum-sensing autoinducers represses these traits. These two autoinducers, cholerae autoinducer-1 (CAI-1) and autoinducer-2 (AI-2), function synergistically to control gene regulation, although CAI-1 is the stronger of the two signals. V. cholerae AI-2 is the furanosyl borate diester (2S,4S)-2-methyl-2,3,3,4-tetrahydroxytetrahydrofuran borate. Here we describe the purification of CAI-1 and identify the molecule as (S)-3-hydroxytridecan-4-one, a new type of bacterial autoinducer. We provide a synthetic route to both the R and S isomers of CAI-1 as well as simple homologues, and we evaluate their relative activities. Synthetic (S)-3-hydroxytridecan-4-one functions as effectively as natural CAI-1 in repressing production of the canonical virulence factor TCP (toxin co-regulated pilus). These findings suggest that CAI-1 could be used as a therapy to prevent cholera infection and, furthermore, that strategies to manipulate bacterial quorum sensing hold promise in the clinical arena.     

生物膜和生物膜形成菌的研究

细菌生物膜是一个复杂的微生物群落,生物膜巾除了水和细菌以外,还含有细菌分泌的胞外聚合物、吸附的营养物质、代谢产物及DNA等细菌裂解产物.介绍细菌生物膜的形成过程,并综述了近年来医学领域以几种成膜力强的条件致病菌为研究对象,从基因水平上证实了细菌细胞表面结构鞭毛、纤毛、胞外聚合物和群体感应信号分子等细胞因子对生物膜形成的影响.     

葡萄全汁乳酸发酵菌株筛选及其风味分析

为葡萄全汁乳酸发酵饮料研制提供优良菌株资源.以"桂葡1号"葡萄果汁为原料,以耐酸性及风味评价为指标,筛选葡萄果汁乳酸发酵的优良菌株,研究优选菌的单菌及复配发酵对果汁风味物质的影响.植物乳杆菌R23及副干酪乳杆菌R37能耐受pH值3.0高酸,其发酵香与葡萄果香协调;两菌复配生长是共生型,其发酵风味比单菌更饱满丰富;乳酸发酵增加了葡萄果汁酸、酮、酯类物质的相对含量,增加了酚类和有机酸的成分数量.植物乳杆菌R23及副干酪乳杆菌R37是葡萄果汁乳酸发酵优良菌株,其复配发酵能赋予葡萄果汁更丰富的发酵风味.     

乳酸菌发酵山药果蔬饮料配方与工艺优化

以铁棍山药、葡萄、番茄、胡萝卜、苹果、蜂蜜为原料,优化出由50%山药浆、10%葡萄汁、20%番茄汁、10%胡萝卜汁和10%苹果汁组成的原浆,用植物乳杆菌CZ、植物乳杆菌CA、植物乳杆菌CB按照1∶1∶1比例制成的发酵剂,按照原浆78%、蜂蜜3%、蔗糖13%和发酵剂6%的比例配制混合,32℃发酵8h,获得功能型乳酸菌发酵山药果蔬饮料.其蛋白质、脂肪、还原性糖、钠和维生素C的质量浓度及pH值依次为0.004kg·L~(-1)、0.0121kg·L~(-1)、0.080kg·L~(-1)、0.000 182kg·L~(-1)、0.000 102kg·L~(-1)和4.0±0.2.     

肉桂酸及其衍生物的抑菌活性研究

通过琼脂渗透法和最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC/MFC)的测定发现了肉桂酸及其衍生物(p-甲氧基肉桂酸和p-羟基肉桂酸)对常见几种代表菌具有较强的抑制作用.结果表明,p-羟基肉桂酸对细菌类抑菌效果最好,对枯草杆菌的MIC为0.5 mg/mL,MBC为0.75 mg/mL.对真菌类,肉桂酸的抑菌效果最好,对白色假丝酵母菌的MIC为0.125 mg/mL,MFC为0.5 mg/mL.本文通过研究肉桂酸及其衍生物对常见几种菌的抑菌活性,阐明了它们之间的构效关系.     

基于益生菌及其代谢物的食源性致病微生物控制技术研究进展

食源性致病微生物不仅会引起食品腐败,造成经济损失,也给人类健康带来很大威胁,因此亟需开发高效、安全、不影响食品品质的食源性致病微生物控制技术。益生菌是近年微生物和食品科研领域研究热点,益生菌除具有调节和改善健康功能,其本身及代谢物对微生物较强的清除和抑制作用,使其可应用于对食源性致病微生物的控制。明悉益生菌及其代谢物类型、潜在的抑制微生物机制以及应用现状对相关控制技术的研发至关重要。分析了现有益生菌及其代谢物对食源性致病微生物的抑制机制,主要为破坏细胞结构、影响遗传物质复制、阻断能量代谢途径、干扰群体感应系统、控制生物被膜形成、竞争关键性营养物质等方面的单机制或多机制联合作用;同时基于目前益生菌及其代谢物在食品安全和品质控制中的应用研究实例,探讨了其在果蔬、肉类等食品中的应用方式、应用条件,对货架期的延长效果等;分析了益生菌及其代谢物在抗菌效能提高、活性包装、与其他食品品质控制技术联用等方面研究的发展趋势。研究结果旨在为基于益生菌及其代谢物的食品安全和品质控制技术的开发和应用提供借鉴和参考。     

铜绿假单胞菌液体发酵产生絮凝现象的研究

对铜绿假单胞菌液体发酵产生的絮凝现象进行了研究。初步确定其由铜绿假单胞菌产生的生物膜引起,测得生物膜中多糖含量约为6.3%,蛋白质含量约为7.7%。考察了添加颗粒营养物质豆饼粉对絮凝现象的影响,分析了天然群体感应抑制剂水杨酸、丁香酚、儿茶素、姜黄素和大蒜提取物对生物膜和菌浓的影响以及群体感应淬灭酶对菌浓的影响。结果显示,添加颗粒营养物质对絮凝物影响不显著;天然群体感应抑制剂不能显著提高铜绿假单胞菌液体发酵菌浓,但对生物膜的分散具有一定作用;群体感应淬灭酶对铜绿假单胞菌液体发酵浓度无显著影响。