HEp-2细胞MPM-2磷蛋白的蛋白质组学分析

MPM-2磷蛋白家族成员在有丝分裂进程中起着重要作用．为了从MPM-2磷蛋白家族层面入手研究细胞周期调控中磷蛋白的重要作用，以人上皮样喉癌细胞株HEp-2为细胞模型，运用双向电泳、免疫印迹以及质谱技术等蛋白质组学的方法对其细胞抽提物中的部分MPM-2磷蛋白进行了分析鉴定，初步确定了乙二醛酶(GlyoxalaseⅠ)、真核翻译起始因子(eIF4B)以及核质蛋白NPM等MPM-2特异识别的细胞磷蛋白，这将有助于进一步研究MPM2磷蛋白家族成员在细胞周期调控中的重要作用．     

抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体的研制和特性分析

以HCG为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠Sp2/0—Ag14骨髓瘤细胞融合,经反复筛选和再克隆化,获得8株能稳定分泌抗HCG特异单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中6个高效价单抗进行了特异性和抗原决定簇检测,选出两个抗相距较远不同决定簇的单抗(2D_4,4F_4)作进一步特性分析。结果显示:免疫球蛋白亚类鉴定,2D_4为IgGl亚类,4F_4为IgG2a亚类;亲和力常数(K_(affi)),2D_4为5.41±0.94×10~(-10)mol/L,4F_4为1.37±0.33×10~(-9)mol/L。证实该两种单克隆抗体可用于研制有关临床诊断试剂盒。     

抗Tac单克隆抗体对刀豆蛋白A诱导实验性小鼠肝损伤的影响

本实验利用刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ）诱导建立实验性小鼠肝损伤模型,并研究该模型血浆肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）含量的变化,发现小鼠血浆ＴＮＦ－α含量与正常对照组比较明显升高,其差异有极显著意义（Ｐ＜００１）。预先注射抗Ｔａｃ单克隆抗体可减少ＣｏｎＡ注射后小鼠ＴＮＦ－α的产生,与模型组比较,二者血浆ＴＮＦ－α的差异有极显著意义（Ｐ＜００１）。注射抗Ｔａｃ单克隆抗体组无肝损伤发生。上述结果表明,ＣｏｎＡ诱导的肝损伤与ＴＮＦ－α等细胞因子的介导有关,抗Ｔａｃ单克隆抗体对ＣｏｎＡ诱导的肝损伤有保护作用     

红细胞生成素单克隆抗体制备及初步鉴定

为获取高效价的红细胞生成素（ＥＰ）单抗,以建立重组人红细胞生成素（ｈＥＰＯ）测定方法。用基因重组ｈＥＰＯ与小鼠血清白蛋白经Ｎ－羟基琥珀酰亚胺基－３（２－吡啶基二硫）丙酸酯胞;用间接ＥＬＩＳＡ和免疫印迹技术将ｈＥＰＯＭｃＡｂ与白色念珠菌胞质抗原的ＭｃＡｂ,嗜肺性军团病杆菌ＭｃＡｂ,ＨＣＶ核心肽ＭｃＡｂ,人μ链ＭｃＡｂ,ＩＦＮ－γＭｃＡｂ的间接ＥＬＩＳＡ同时进行特异性鉴定。经融合后检测获取一株分泌ｈＥ     

人亲环素A单克隆抗体的制备及鉴定

制备人亲环素Ａ特异性单克隆抗体并鉴定其特性。方法：利用基因重组技术大量表达人亲环素Ａ蛋白,纯化后作为抗原免疫的ＢＡＢＬ／ｃ小鼠,经细胞融合和筛选,制备特异单克隆抗体。结果和结论;共建立三株稳定分泌抗人ＣｙＰＡ的杂交瘤细胞株,其所产生的单克隆抗体均为ＩｇＭ型,轻链为ｋ。     

抗乙型脑炎病毒单克隆抗体重链可变区基因在烟草中的表达

自Hiatt等1989年首次报道了在植物中进行抗体基因的表达研究以来,至今短短数年,这类研究已日益广泛深入。目前,利用转基因植物和植物细胞表达工程抗体基因进行抗体的生产、作物抗病育种以及植物代谢调控和发育的研究已经成为生物技术中的一个新途径,新的生长点。这是免疫学和植物科学在分子水平上有机结合的产物。现有的证据表明,不仅高等植物,单细胞绿藻也可以表达抗体基因。高等植物不仅可以表达简单的单域抗体基因,也可以表达更加复杂的IgA-G杂合抗体基因,并在体内装配出双分子dIgA-G和带分泌组分(SC)的SIgA-G,利用转抗体基因植物进行抗病育种,植物代谢和发育的研究也取得令人瞩目的进展。     

抑制羧肽酶A催化活性的单克隆抗体的制备及性质测定

以羧肽酶Ａ为抗原，经动物免疫、细胞融合、筛选及３次克隆化培养，获得了一株稳定分泌对羧肽酶Ａ肽酶活性有抑制作用的单克隆抗体的杂交瘤细胞株１Ｇ１０。染色体数目为８０～９０；ＥＬＩＳＡ测定腹水效价为１０６；亲和常数为１．５９×１０９（ｍｏｌ／Ｌ）－１；免疫球蛋白属ＩｇＧ１型；分子量为１５０Ｋｄ。羧肽酶Ａ与该抗体反应后测定肽酶活性，显示出该抗体能抑制羧肽酶Ａ的肽酶活性，Ｄｉｘｏｎ法作图表明类似竞争性抑制反应，测得其表观抑制常数为１．１７×１０－７ｍｏｌ／Ｌ。该抗体可能针对羧肽酶Ａ的活性中心部位，为制备具有抗原内影像作用的抗独特型抗体酶打下了基础     

抗家蚕抗菌肽单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立

首次报道了抗家蚕抗菌肽（一种小分子多肽）单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立．用ＦＰＬＣ纯化家蚕抗菌肽（ＡＢＰ）获得了电泳一条带的均一样品；将它与辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）偶联，以此偶联物免疫ＢＡＬＢ／Ｃ鼠．以抗菌肽—牛血清白蛋白（ＡＢＰ－ＢＳＡ）做包被物ＥＬＩＳＡ筛选出５个阳性杂交瘤细胞株，冻存复苏后得到三个稳定分泌抗体的阳性细胞株，抗体ＩｇＧ亚型为ＩｇＧ２ａ．统计了杂交瘤的染色体数     

单克隆抗体导向的肿瘤诊断与治疗

单克隆抗体导向的肿瘤诊断与治疗ＭｏｎｏｃｌｏｎａｌＡｎｔｉｂｏｄｙ－ＭｅｄｉａｔｅｄＤｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄＴｈｅｒａｐｙｏｆＨｕｍａｎＣａｎｃｅｒｓ谢蜀生（北京医科大学免疫学系，教授北京１０００８３）俞莉章，郭应禄，顾方六（北京医科大学泌尿外科研究...     

抗人尿激酶单克隆抗体的制备

采用常规免疫和脾内免疫相结合的方法，利用杂交瘤技术得到两个能分泌抗人尿激酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株１０Ｈ１０，１０Ｄ１２。它们分泌的单克隆抗体主要识别Ｍｒ．５４，０００的高分子量尿激酶和Ｍｒ．１８，０００的尿激酶Ａ链。两种单克隆抗体与胰蛋白酶，胰蛋白酶原，胰凝乳蛋白酶和胰凝乳蛋白酶原等丝氨酸蛋白酶和酶原无交叉反应。