无乙肝症状的“健康人群”中前S_2蛋白及抗前S_2的血清学调查

采用国产单克隆抗体酶标试剂盒(McAb—ELISA)对广东某地区无乙肝症状的298人作了血清前S_2蛋白及抗前S_2检测,同时检测各项乙型肝炎病毒血清学标志(HBVM)及肝功能。全部检测对象肝功能正常。前S_2阳性率7.72％。抗前S_2阳性率5.70％。前者与HBsAg及其它乙肝病毒复制标志(HBcAg、PHSA-R、HBcAg、抗-HBcIgM及HBVDNA)有平行关系,后者则与抗HBs有平行关系。结果提示前S_2可作为一项敏感的HBV复制及传染性的指标,抗前S_2是一项乙肝感染的恢复标志,二者有重要的流行病学与临床意义,检测证实人群中存在相当数量的HBV携带者和隐性感染者。     

HRP标记β_2-微球蛋白单克隆抗体的研究

用辣根过氧化物酶(HRP)标记β2-微球蛋白单克隆抗体,以此作为ELISA实验的酶标二抗.用过碘酸钠将辣根过氧化物酶(HRP)的糖的部分轻微氧化为醛基,然后与抗体氨基进行反应,形成辣根过氧化酶(HRP)与抗体的结合物.将β2-微球蛋白与过氧化物酶的结合物进行纯化,得到较纯的酶结合物,以此作为ELISA的酶标二抗.     

单克隆抗体制备中几个关键问题

随着分子生物学技术的进步,单克隆抗体的生产技术逐渐完善,但在生产中要制备出高质量的单抗仍存在许多问题。本文就动物的免疫、杂交瘤细胞的建立、融合细胞的筛选、克隆化培养及细胞冷藏、单克隆抗体的大量生产及纯化、单克隆抗体制备过程中的有关污染问题进行论述,以期对生产有一定的指导。     

Le~Y对小鼠胚泡和子宫上皮细胞分泌MMPs的影响

以单克隆抗体AH6 [特异结合LeY 寡糖 ,Fucα1_2Galβ1_4 (Fucα1_3)GlcNAc_]为工具 ,采用明胶酶谱法 ,研究细胞表面的LeY 寡糖抗原与着床期间小鼠胚泡和单层子宫上皮细胞分泌基质金属蛋白酶 (Matrixmetalloproteinase ,MMPs)之间的关系 ,从而进一步确定LeY 寡糖抗原在着床过程中的具体作用环节 .结果显示 ,不论子宫上皮细胞表面还是胚胎滋养层细胞表面的LeY 寡糖抗原被封闭后 ,都能导致MMPs的分泌减少 ,说明在LeY 寡糖抗原对胚胎着床过程的调节中 ,MMPs起着重要的作用 .认为LeY 寡糖抗原不仅参与胚泡和子宫内膜的识别 ,也通过某种机制调节胚胎着床的侵润过程     

sp18单克隆抗体对小鼠体外受精和胚胎发育的影响

免疫印迹显示,抗牛精子ｓｐ１８族膜蛋白的单克隆抗体与小鼠精子１４,１８,２２,３０和６０ｋｕ５条带有较弱的抗原信号,同时,ｓｐ１８单抗也能结合鸡卵溶菌酶。间接免疫荧光证实小鼠精子头后部存在ｓｐ１８抗原。获能２ｈ的小鼠精子与０．１８２ｍｇ／ｍＬ的ｓｐ１８单抗共孵育１５￣２０ｍｉｎ后进行体外受精,结果发现,单抗组的受精率（７７．１％）,与血清对照组（７９．２％）和空白对照组（８０．３％）间无显著差异（     

肌钙蛋白C-肌钙蛋白Ⅰ亲和层析动力学的模型

肌钙蛋白（Ｔｎ）Ｉ有着极强的心肌特异性,心肌肌钙蛋白是唯一存在于心肌细胞中的异构体,可以通过检测患者血液中的心肌ＴｎＩ含量来确诊急性心肌梗塞。根据在钙离子存在下,ＴｎＣ和ＴｎＩ特异结合的特性,可以利用亲和层析提取纯化ＴｎＩ。根据ＴｎＩ从亲和层析柱的穿透曲线,对Ａｒｎｏｌｄ等人提出的孔内扩散模型进行了分析,证明孔内扩散过程不是此亲和层析过程中的限速步骤。在缓冲液体系（ｐＨ８．０）中,提出了包括以一个正向二级、逆向一级来描述ＴｎＣ—ＴｎＩ反应速率方程,并用实验验证了该模型的正确性,从而首次阐明了ＴｎＣ—ＴｎＩ提取纯化体系的动力学机制,揭示了该过程的限速步骤为ＴｎＣ—ＴｎＩ反应过程。     

荧光法酶免疫分析测定血清中肝癌细胞的研究

采用以辣根过氧化物酶作抗体标记物的双抗体夹心技术,以对羟基苯乙酸作底物测定荧光来检测酶的活性,从而实现对肝细胞的定量检测．其线性范围为１０－８～１０－５ｇ／ｍＬ,检测限为１０－９ｇ／ｍＬ,ＲＳＤ为３．０％,结果与肝癌检测盒所测定的结果吻合较好,具有较高的可靠性和准确度．     

用In－111通过1B4M－DTPA标记单克隆抗体的研究

研究了双功能联接剂１－（４－异硫氰基苄基）－４－甲基二乙三胺五乙酸（１Ｂ４Ｍ－ＤＴＰＡ）与抗体偶联反应以及用Ｉｎ－１１１标记偶联物的条件，得到了体内外稳定的Ｉｎ－１１１标记抗体；用高纯Ｉｎ－１１１通过１Ｂ４Ｍ－ＤＴＰＡ标记了抗胃癌单抗３Ｈ１１，标记抗体免疫活性保持完好，放射性比活度为２．０×１０￣（１１）Ｂｑ／ｇ；荷瘤裸鼠注射标记物２４ｈ后，即得到靶目标的清晰显像，１６８ｈ的瘤／肝放射性比值为２．０。     

HMG＿（14）单克隆抗体杂交瘤株的建立

以北京鸭红细胞提取的ＨＭＧｓ（ＨＭＧ＿１，ＨＭＧ＿（２ａ），ＨＭＧ＿（２ｂ），ＨＭＧ＿（１４），ＨＭＧ＿（１７））免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，取其脏压细胞与Ｓｐ２／０（小鼠骨髓瘤细胞）融合，经选择培养，阳性筛选，克隆化以及冻存复苏，获得了三株稳定分泌抗ＨＭＧ＿（１４）的杂交瘤细胞株（１Ｃ＿（１２），１Ｏ＿３和２Ｆ＿２），经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ鉴定，与其它几种ＨＭＧ无反应，抗体为ＩｇＧ＿１亚型。腹水ＨＭＧ＿（１４）单克隆抗体经ＳｅｐｈａｄａｘＣＬ－４Ｂ亲和柱得到了纯化。     

应用多种单克隆抗体联合检测大肠癌的早期诊断探索

应用４种单克隆抗体、通过免疫组化Ｓ－Ｐ法，对大肠癌、大肠腺癌、癌旁粘膜和正常大肠粘膜进行标志．７２例大肠癌组织中阳性表达率分别为ＳＣ１２Ａ８７．５％；ＳＣ１６Ａ７６．３％；ＣＳＡ９１．６６％；ＣＥＡ９５．８％，与正常大肠粘膜阳性表达１３．３％比较，均有非常显著差异．２７例脉瘤组织中阳性表达率分别为ＳＣ１２Ａ５９．２５％；ＳＣ１６Ａ５９．２５％：ＣＳＡ７０．３７％；ＣＥＡ７０．３７％；和正常大肠粘膜比较有显著差异（Ｐ＜０．０５）；和大肠癌比较、除ＳＣ１６Ａ无显著差异（Ｐ＞０．０５）外，其它三种均有高度差异（Ｐ＜０．０１），对排除癌有一定意义．４９例癌旁粘膜阳性表达率分别为：ＳＣ１２Ａ５７．１％；ＳＣ１６Ａ４６．９％；ＣＳＡ６７．３％；ＣＥＡ５１％阳性细胞分布虽然主要在腺腔内缘．范围较局限．但这么高的抗原表达，支持了Ｆｉｌｉｐｅ等的“移行粘膜”学说