肌钙蛋白Ⅰ的提取纯化

心肌肌钙蛋白Ⅰ具有极强的心脏特异性，可以通过检测患者血清内心肌肌钙蛋白Ⅰ的含量来诊断急性心肌梗塞。利用肌钙蛋白Ｃ和肌钙蛋白Ⅰ在钙离子存在下具有特异性结合的性质，制成了肌钙蛋白Ｃ亲和凝胶。利用肌钙蛋白Ｃ－肌钙蛋白Ⅰ亲和层析，提取和纯化了人和牛心肌肌钙蛋白Ⅰ，由１００ｇ心肌中可以提取到６０ｍｇ，以后可用来制备抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ的单克隆抗体杂交瘤细胞。     

一种提取和纯化肌钙蛋白C的新方法

肌钙蛋白Ⅰ是肌钙蛋白的一个亚基，它有３种异构体：快、慢骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ和心肌肌钙蛋白Ⅰ。由于心肌肌钙蛋白Ⅰ具有极强的心脏特异性，因此引起众多学者的兴趣，研究检测患者血清内心肌肌钙蛋白Ⅰ的含量，来诊断急性心肌梗塞。利用肌钙蛋白Ｃ和肌钙蛋白Ⅰ的亲和层析来提取和纯化肌钙蛋白Ⅰ。建立了一种简单的肌钙蛋白Ｃ的提取和纯化方法，从兔肌１００ｇ中可提取肌钙蛋白Ｃ ７５ｍｇ，不仅高于以往研究结果（６０ｍｇ／１００ｇ兔肌），而且使实验周期缩短和实验操作大为简化。     

肌钙蛋白Ⅰ检测在急性心肌梗死中的应用

目的:探讨肌钙蛋白I检测在急性心肌梗死中的应用价值。方法:检测了11例AMI患者发病时肌钙蛋白I(CTnI)变化,并与CK—MB加以比较。结果:CTnI测定较心肌酶学检测有较宽的诊断时间窗,是对AMI有高敏感、高特异的生化指标。结论:急性心肌梗死(AMI)及早诊断与治疗是降低其死亡率的关键,AMI的早期诊断一直以CK—MB为“金标准”,但在AMI发作6小时内阳性率较低且对心肌特异性并非专一。     

心肌肌钙蛋白I胶体金免疫层析快速检测法的建立

为建立一种快速、简单实用的检测心肌肌钙蛋白I的胶体金免疫层析法(GICA),用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,用鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,采用胶体金免疫层析技术及双抗体夹心法原理检测心肌肌钙蛋白I,并对该方法进行敏感性、特异性和稳定性分析.结果:该方法能在10 min内完成检测;该试纸条仅与心肌肌钙蛋白I阳性样品发生特异性反应;检测心肌肌钙蛋白I的最低检出质量浓度为1.0 ng/mL;与化学发光免疫分析法(CLIA)对比检测63份临床标本,阳性符合率97.0%,阴性符合率100%,总符合率98%,试纸条性能稳定.     

肌钙蛋白I对小儿心肌炎诊断及与酶学对比研究

目的评估血清心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnⅠ）对小儿心肌炎的诊断价值,并与肌酸激酶（CK）及其同功酶MB（CK-MB）进行对比研究．方法全自动生化分析仪对cTnⅠ,CK及CK—MB进行定量检测．结果1）心肌炎组cTnI,CK及CK-MB均明显高于正常对照组（P〈0．001）．cTnⅠ升高38例,占76％;CK升高21例,占42％;CK-MB升高25例,占50％．cTnⅠ与CK,CK-MB呈正相关关系．2）治疗2周后,cTnⅠ与对照组比较有显著性差异（P〈0．001）,CK及CK-MB与对照组无显著性差异（P〉0．05）．3）心肌炎组22例ST-T改变患儿测cTnⅠ升高20例（91％）,CK升高8例（37％）,CK-MB升高6例（27％）．结论cTnⅠ及CK,CK-MB对小儿心肌炎的诊断均较敏感,其中cTnT对心肌损害的敏感性及特异性均高于CK和CK—MB．cTnⅠ诊断时间窗宽于CK,CK-MB,特异性也高于心肌酶学检查．     

用合成多肽免疫制备抗人心肌肌钙蛋白Ⅰ单克隆抗体的研究

介绍一种用合成的多抗原肽免疫动物来制备与天然人心肌肌钙蛋白Ⅰ特异反应的单克隆抗体新方法。从人心肌肌钙蛋白ⅠＮ端，根据多肽分子氨基酸的亲水性值选出了ＰＡＰＡＰＩＡＡＡＳＳ１１个氨基酸片段。将它用有八位点的赖氨酸核连接成多抗原肽后，以它为抗原用Ｒｉｂｉ佐剂进行免疫。将小鼠脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞融合，获１１株抗此多肽的杂交瘤细胞株。对其中７株属于ＩｇＧ亚类的细胞进行了ＥＬＩＳＡ分析，发现这７株细胞均与天然的人心肌肌钙蛋白Ⅰ呈特异性反应，而不与人骨骼肌肌钙蛋白Ⅰ发生交叉反应。利用３Ａ２细胞株所分泌的单克隆抗体对急性心肌梗塞患者、手术患者和正常人的血样进行了ＥＬＩＳＡ检测，证明它只对心肌梗塞患者血清发生阳性反应。获得了较为满意的结果。此细胞株所分泌的抗体有望用于心肌梗塞临床检测。     

人心肌肌钙蛋白I和C亚基的基因工程表达及两者的结合实验

心肌肌钙蛋白I(cTnI)是检测心肌损伤的理想标志物,具有很高的特异性,在病人体内可停留较长时间．以人心肌cDNA为模板,通过PCR方法克隆了人的cTnI和cTnC基因,将cTnI和cTnC基因插入到原核表达载体pBV220中,转化E．coli DH5α菌株并诱导表达,经SDS-PAGE分析,分别发现分子质量为28ku和18ku的特异性蛋白条带．cTnI经Western blotting检测,结果与天然蛋白一致．将纯化得到的cTnI免疫小鼠后,用人天然标准抗原检测小鼠的抗血清效价在1：16000以上,并且呈高度特异性,与cTnC无交叉反应．而表达的cTnC可以在一定条件下和cTnI结合,证明2种基因工程蛋白是具有天然构象和结合功能的．cTnI和cTnC的表达及2种蛋白结合试验的研究结果为进一步研发免疫诊断试剂奠定了良好的基础．     

肌钙蛋白的结构和功能

肌钙蛋白（troponin）在节肌肉收缩中起到了重要的作用，因此一直成为研究的热点。本文分别介绍了troponin是如何发现的，及其结构与功能．此外还简要阐述了troponin所参与的肌肉收缩的钙调节机制。     

一步法免疫亲和层析纯化重组人肿瘤坏死因子

提出一种简便的免疫亲和层析方法，有效地分离纯化重组人肿瘤坏死因子（ｒＨＴＮＦ），此法不需预先分离纯化单克隆抗体．用交联刘ｄｉｍｅｔｈｙｌｓｕｂｅｒｉｍｉｄａｔｅ使抗ＴＮＦ的单克隆重抗体和ｐｒｏｔｅｉｎＡ—ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－４Ｂ共价结合，成为稳定的免疫基质，制备免疫亲和层析柱，将重组ＴＮＦ粗制品一步纯化为均一组份．     

分段法研究烧结矿还原的动力学过程

根据工业生产烧结矿的还原动力学特点,从冶金传输原理的质量传输和化学反应的基本原理出发,针对还原过程中的不同阶段分别建立了立方体颗粒的化学反应过程动力学和分子扩散过程的新模型.在所建立模型的基础上采用分段法研究了CO还原烧结矿的反应过程动力学,得出不同限速性环节转换的时间点和相关的动力学参数,进而给出了动力学参数与温度的关系式.通过对工业生产烧结矿还原过程中的微观结构变化的观察验证了该模型对不同限速环节判断的准确性及其合理性.采用分段法可以确定出不同控制环节的转换时间点和动力学参数可以普适地用在其他反应过程动力学的研究中.     

重组人心肌肌钙蛋白Ⅰ基因工程菌的构建与表达

人心肌肌钙蛋白Ⅰ(hcTnI)是临床检测心肌损伤及预后提供诊断的生物学指标,由于来源有限,采用基因重组技术,以期获得高表达量的人心肌肌钙蛋白Ⅰ.人工合成hcTnI基因,将其插入pET-11a载体中,通过酶切鉴定正确后转入表达宿主菌BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白.采用蛋白免疫印迹反应(Western Blot,WB)鉴定表达目的蛋白的免疫特异性.经SDS-PAGE证实重组蛋白的相对分子质量约为2.6×104,凝胶密度扫描软件检测到目的蛋白占总蛋白比例为30.1%,WB实验验证诱导后目的蛋白特异性良好.成功构建了重组hcTnI基因在大肠杆菌表达的工程菌株,并获得表达,为制备高特异性的抗体及临床检测应用和测定标准化奠定了基础.     

TGFB晶体在混合溶剂中的生长和动力学研究

用定态体视显微镜法测量了ＴＧＦＢ晶体在５％,８％,１０％的甘油—水混合溶剂中的生长速率（Ｒ）与相对过饱和度（σ）的函数关系,Ｒ与σ的关系符合Ｂｕｒｔｏｎ,Ｃａｂｒｅｒａ和Ｆｒａｎｋ提出的关于晶体生长的螺旋位错机制的面扩散模型．根据Ｂｅｎｎｅｍａ修正的ＢＣＦ模型估算了ＴＧＦＢ生长的动力学参数．     

猪垂体Poly（A）~＋RNA的制备及其体外翻译

本文用ＬｉＣｌ沉淀法提取了猪垂体总ＲＮＡ，经。ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ柱亲和层析，分离纯化了猪垂体Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ．用自制的兔网织红细胞体外翻译体系鉴定，表明该Ｐｏｌｙ／（Ａ）＋ＲＮＡ具有较高的翻译活性．ＳＤＳ－ＰＡＯＥ，放射自显影分析翻译产物提示，在制各的猪垂体Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ＲＮＡ中，编码猪生长激素前体的ｍＲＮＡ占有较高的比例．     

用柱层析技术纯化孕血清中的早孕因子（EPF）

采用ＤＥＡＥ，Ｓ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦ·Ｆ离子交换层析，ＣｏｎＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ，ＨｅｐａｒｉｎＳｅｇｈａｒｏｓｅ亲和层析，从１１０例妊娠３～８周早孕妇女混合静脉血清中提取，纯化早孕因子（ＥＰＦ）。以玖瑰花结抑制试验（Ｅａ－ＲＩＴ）检测孕血清及各阶段提取物的ＥＰＦ活性，盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其纯度．结果表明提取，纯化的ＥＰＦ达电泳纯，在国内尚未见报导。     

胸腺内双阴胸腺细胞重建动态的数学模型

根据小鼠的胸腺细胞实验数据,建立了描述胸腺细胞（ｔｈｙｍｏｃｙｔｅ）发育过程的数学模型,该模型考虑了胸腺细胞与胸腺基质细胞（ｔｈｙｍｉｃ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ,ＴＳＣ）之间的相互作用,能够模拟ＣＤ４－ＣＤ８－ＤＮ细胞重建动态及正常小鼠胸腺细胞的发育过程,研究表明,模型中的一些参数应该是含有时间延迟的,通过模型研究了胸腺细胞与ＴＳＣ之间亲和力在胸腺选择过程中的阳性与阴性选择中的差异,理论预言与实     

寄生植物锁阳种子萌发抑制物质的研究

锁阳种子休眠的重要原因之一，就是其种子内存在抑制萌发物质，根据种子萌发试验和对春种子休眠物质进行提取，分离纯化，ＴＬＣ及ＨＰＬＣ分析结果，确认该抑制物存在于种皮中，并鉴定为脱落酸（ＡＢＡ）。     

黑麂粪便DNA的简易提取方法

收集九龙山自然保护区野外自然条件下的黑麂粪便样品,用无水乙醇保存于-70℃冰箱,经十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）裂解液温浴粪便、酚／氯仿抽提及聚合酶链反应（PCR）纯化试剂盒纯化等步骤提取黑麂粪便DNA,并扩增线粒体DNA细胞色素b基因和2个微卫星位点进行检测;同时提取黑麂肌肉和皮毛样品的DNA作为对照．结果显示,该方法可以从粪便中提取到高质量的黑麂DNA,并可进行有效扩增,为黑麂及其他濒危鹿科动物的非损伤取样提供了一种简易方法．     

评价和控制投资估算精度的一种方法

提出了一种用ＤＥＡ（ｄａｔａｅｎｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎａｌｙｓｉｓ）模型（Ｃ２Ｒ）评价和控制建设项目投资估算精度的方法。该方法根据拟投资项目在评价模型中的最优目标函数值来判断其投资估算的合理性。最后给出了一个应用案例。     

Mo原子表面扩散激活能的计算及Mo2C膜成膜机理

应用Ｃｏｌｌｉｎｓ模型,计算了Ｍｏ原子表面扩散激活能。根据实验结果,论证了如下结论：在制备Ｍｏ２Ｃ膜的过程中,Ｍｏ（ＣＯ）６的变化遵从先被基底吸附,发生相变再进行级联式分解的两步机制;其成膜过程是Ｍｏ（ＣＯ）６先分解,再由Ｍｏ碳化为Ｍｏ２Ｃ成膜。用Ｇｉｂｂｓ函数最小的原理,探讨了成膜的适宜温度。     

尿激酶亲和层析分离中吸附和洗脱过程的速率模型模拟

采用非平衡层析速率模型，对尿激酶的亲和层析过程进行了模拟计算。利用亲和层析，可以将粗品原料净化为高纯度尿激酶产品；层析所用的亲和载体是采用对氨基苯甲脒作为配基，将琼脂糖凝胶进行活化制得的。通过问歇实验，测定了吸附等温线并进行吸附动力学研究。借助于VERSE—LC模拟软件，采用速率模型作为基本方程，对亲和层析的实验现象进行了数值模拟分析，与实验结果进行对比发现，速率模型可以较准确地描述固定床中的亲和层析过程。