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人心肌肌钙蛋白I和C亚基的基因工程表达及两者的结合实验 总被引：5，自引：1，他引：4
心肌肌钙蛋白I(cTnI)是检测心肌损伤的理想标志物,具有很高的特异性,在病人体内可停留较长时间．以人心肌cDNA为模板,通过PCR方法克隆了人的cTnI和cTnC基因,将cTnI和cTnC基因插入到原核表达载体pBV220中,转化E．coli DH5α菌株并诱导表达,经SDS-PAGE分析,分别发现分子质量为28ku和18ku的特异性蛋白条带．cTnI经Western blotting检测,结果与天然蛋白一致．将纯化得到的cTnI免疫小鼠后,用人天然标准抗原检测小鼠的抗血清效价在1：16000以上,并且呈高度特异性,与cTnC无交叉反应．而表达的cTnC可以在一定条件下和cTnI结合,证明2种基因工程蛋白是具有天然构象和结合功能的．cTnI和cTnC的表达及2种蛋白结合试验的研究结果为进一步研发免疫诊断试剂奠定了良好的基础． 相似文献
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