抗甲胎蛋白单克隆抗体的研制及其在免疫组化中的应用

以高纯AFP为抗原,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞和小鼠SP2/0 Ag14骨髓瘤细胞融 合,经2次亚克隆,建立5株稳定分泌抗AFP特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。应用经纯化 的该单克隆抗体进行了原发性肝癌组织切片的免疫组织化学实验,结果显示全部5种抗AFP单 克隆抗体对肝癌亚细胞组分均呈现特异性结合。表明已筛选出适于制作甲胎蛋白临床诊断试 剂盒所需的特异性单克隆抗体。     

流行性出血热病毒单克隆抗体的制备及其IgM捕获ELISA的建立

用灭活的流行出血热病毒免疫小鼠获得４株能分泌ＥＨＦＶ特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果表明４株ＭｃＡｂ能专一地识别ＥＨＦ病毒的分子量为５６ｋＤ的囊膜糖蛋白Ｇ２。     

抗人膀胱癌单抗的导向治疗实验研究

用北医大泌尿所建成的人体膀胱移行细胞癌细胞系BIU 87免疫BALB/c小鼠,制备了一株抗人膀胱癌单克隆抗体,多项鉴定表明此单抗特异性较好。用此单抗与放射性同位素~131I偶联后,注入载瘤裸鼠体内,肿瘤显像明显,进一步证实单抗的导向作用。然后用这种单抗通过顺乌头酸与抗肿瘤药物阿霉素偶联,用膀胱癌细胞BIU-87和E-J二种作为靶细胞,大肠癌细胞Lovo作为对照,检查免疫偶联物在体外的杀伤活性,结果表明阿霉素与单抗的龟疫偶联物对Lovo细胞没有杀伤作用,对BIU-87及E-J细胞有明显的杀伤作用,而两种膀胱癌细胞对免疫毒素的敏感性是有所不同的。单独使用单抗在体外没有杀伤作用,单独使用药物会产生非特异性杀伤作用。单抗与阿霉素混合使用其作用与单独药物相同。载瘤裸鼠体内用药实验结果表明免疫偶联物能抑制肿瘤生长,单独使用单抗,通过体内补体激活也可起一定治疗作用,但不如免疫毒素明显。停药后有些肿瘤有增长趋势,提示今后临床用药应注意治疗间隔时间及用药方案。     

制备和鉴定肝细胞胆管侧膜极性分布的单克隆抗体

为制备肝细胞胆管膜侧的呈极性分布单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性,利用密度梯度离心法提取大鼠肝细胞胆管侧膜小体,测定特异酶活性。分离成功的肝细胞胆管侧膜小体免疫BALB/c小鼠,利用标准的杂交瘤技术制备单克隆抗体。利用ELISA法检测抗体分泌的效价。采用免疫组织化学方法观察其组织定位。Western blot对其识别的抗原进行分析。结果成功地获得1株特异性分布于肝细胞胆管膜侧的mAb1。免疫组织化学显示其分布在肝细胞胆管侧膜,在肾脏组织中也呈极性分布。Western blot结果显示mAb1分子量为110 kDa左右。说明成功地获得了肝细胞胆管膜侧特异性mAb1,并鉴定其作为极性分子分布于肝细胞胆管膜侧,它可能参与胆汁的分泌和代谢。     

抗羊布鲁菌核糖体蛋白L7/L12单克隆抗体制备及初步鉴定

制备抗羊布鲁菌核糖体蛋白L7／L12的单克隆抗体（mAb）,为进一步研制布鲁菌检测方法和免疫制剂提供基础。常规动物免疫、细胞融合、克隆化制备抗核糖体蛋白L7／L12的mAb,并用Western blot和ELISA方法对其特异性、抗原识别表位及相对亲和力等做了初步鉴定。获得了4株抗L7／L12蛋白的mAb：1B1,2A2,2H9和2H10,相对亲和力为2A2〉2H10〉2H9〉181,4株mAb识别的抗原表位相近,但仍存在一定的差异。得到的4株稳定的杂交瘤细胞系分泌的mAb能特异结合L7／L12蛋白。     

褪黑素单克隆抗体的制备及鉴定

为了获得抗褪黑素(MT)高效价的单克隆抗体,用甲醛将MT连结到BSA上,然后用连结物背部皮下多点免疫Balb／c小鼠,用PEG诱导免疫鼠脾细胞与Sp2／0细胞融合,经ELISA法筛选阳性克隆株及测定效价,用抗体与同类物之间的交叉反应进行特异性鉴定．最后获得5株(4C9D7、3E12C7H11E7、3E12A9D7、6A6A3A2C3、1E1E2H2H6)能稳定分泌高效价抗MT的单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞。     

全球抗肿瘤抗体药物研究热点分析

分析了近10年全球抗肿瘤单克隆抗体核心文献的研究主题，通过研究主题的演变揭示领域发展趋势，确定近年来7个热点研究方向。通过专业数据库及机构网站对具体热点方向进行深度分析，挖掘国内外处于临床试验阶段及已上市药品的靶点、作用机制等相关信息。研究发现，已上市抗体药物有效性和安全性监测及药物联用、双特异性抗体及抗体药物偶联物等新型抗体药物研发，以及以4-1BB为代表的新靶点开发是近年来的研究热点和重点。中国应加强对上市药品的不良事件监测，加大力度支持新型抗体药物的研发。     

￣(211)At标记单克隆抗体3H11及其Fab片段对人胃癌细胞免疫结合和杀伤效应的研究

采用间接标记方法，通过对砹（２１１Ａｔ）苯甲酸中间体，制得２１１Ａｔ与单克隆抗体３Ｈ１１和Ｆａｂ片段的偶联物，其放化产率分别为３０％和３５％．２１１Ａｔ－３Ｈ１１和２１１Ａｔ－３Ｈ１１Ｆａｂ在体外稳定，对Ｍ８５人胃癌细胞具有明显的特异免疫结合和杀伤作用．核素前体掺入法的初步研究结果表明，２１１Ａｔ－３Ｈ１１和２１１Ａｔ－３Ｈ１１Ｆａｂ是通过对癌细胞ＤＮＡ和ＲＮＡ合成的抑制，特别是合成ＲＮＡ的抑制杀伤癌细胞的