六品系猪SLA-2多肽结合区分子结构差异研究

为研究我国饲养的不同品系猪sLA_2抗原多肽结合区分子结构差异,设计引物,克隆了六品系猪SLA-2基因cDNA全长序列,用分子生物学软件分析其基因特征,比较各品系猪SLA-2分子结构差异,并通过同源模建显示变异住点的空间位置．结果表明,六品系猪SLA-2cDNA全长为1119bp,其中3-1097为编码区,共编码364个氨基酸,分别在第125,188,227,283位置出现半胱氨酸残基,含有2对链内二硫键．六品系猪SLA-2胞外区氨基酸差异主要集中在α1区的62-70及77-82和口2区的143-156．同源模建显示,这些变异位点均位于SLA-2多肽结合区的口螺旋结构上,推测可能与动物的抗病毒免疫特性有关．可为猪品系的改良及抗病毒免疫研究提供参考．     

重构猪SLA-I单链复合体及其口蹄疫病毒VP1蛋白限制性表位的筛选

目前,没有研究猪SLA-I类复合体限制性表位的系统.为了构建猪的SLA-I类复合体,研究其相应重要病毒的限制性表位,亚克隆猪主要组织相容性复合体重链基因SLA-2胞外区和轻链基因β2m成熟肽区,利用一富含甘氨酸和丝氨酸的Linker(G4S)3连接两个基因,通过SOEPCR体外构建了猪可溶性的单链复合体SC-SLA-I[SLA-2-(G4S)3-β2m],计算机方法设计3类口蹄疫病毒VP1蛋白的T细胞表位,经化学合成,分别命名为PepⅠ(FMDV/VP126—34)、PepⅡ(FMDV/VP1157—165)和PepⅢ(FMDV/VP145—53),用以结合单链复合体蛋白SC-SLA-I.酸洗脱结合质谱法测定SC-SLA-I结合表位,同时设定非相关蛋白和多肽的对照试验.结果显示,Pep Ⅰ和Pep Ⅱ均能和SC-SLA-I结合,而Pep Ⅲ及非相关多肽不能结合,对照蛋白MBP的肽结合试验显示阴性.结果表明,多肽Pep Ⅰ和Pep Ⅱ属于SLA-I类限制性表位.     

本科生科研导师制的实施及成效——以生物类专业为例

本科生导师制有助于培养本科生的创新实践能力,有利于提高本科生就业率。大连大学在生物类专业本科生的培养中,根据实际情况制定了入学教育、鼓励创新等措施,积极开展本科生科研导师制并取得了良好成效。     

本科生科研导师制实践与建议

本科生科研导师制有利于培养学生的创新实践能力,增强他们适应社会的能力.大连大学生命科学与技术学院在践行本科生科研导师制过程中,摸索并总结了一套行之有效、旨在提高学生创新实践能力的培养方法,并针对实行科研导师制实行过程中普遍存在的问题,提出了针对性的建议.     

生物工程专业本科生课外实践教学培养学生创新能力模式初探

随着时代的发展和科技的进步,企业对生物工程专业学生的要求越来越高,尤其注重学生的创新实践能力。如何在现有固定实践教学计划以外,探寻新的培养和锻炼生物专业本科生创新实践能力的模式,是一个值得研究的课题。该文提出了通过课外实践教学培养生物工程专业本科生创新实践能力的模式,包括依托导师制,建立课外创新实验培养模式;依托导师制,建立指导本科生参加科技竞赛模式和建立校内外实习实训基地。这些模式有助于提高生物工程专业本科生的创新实践能力,提升本科生的培养质量。     

pMAL-p2X系统表达SLA-Ⅰ复合体蛋白

SLA-Ⅰ/pMAL-p2X为人工构建的原核表达体系.为获取最佳表达的SLA-Ⅰ复合体蛋白及其可溶性表达含量,设计实验对其进行表达优化(pH值、温度、菌体密度、IPTG浓度、诱导时间),SDS-PAGE检查目的蛋白的表达.另外检查目的蛋白的可溶性表达含量.结果显示,SLA-Ⅰ在pMAL-p2X的最佳表达条件为pH=8.0、T(温度)=37 ℃、OD600=1.0、IPTG=0.4 mmol/L和t(诱导时间)=5 h;证明目的蛋白可溶性表达含量占总表达蛋白的70%左右.研究表明pMAL-p2X系统适合于生产可溶性的SLA-Ⅰ复合体蛋白,便于今后进一步研究SLA-Ⅰ类分子结构和功能.     

基因工程实践教学改革的探索

基因工程是生物工程专业的主干课程,重点培养学生的创新精神、实践能力和综合素质。该文根据生物工程专业的特点和人才培养要求,构建了基础综合实验-校内专业实习-研究创新实验“三层次”实践教学体系,介绍了实践教学的设计原则、实践教学的环节与内容、实践教学的组织与实施、实践教学的考核与收获。通过实践教学的改革,培养了学生分析问题、解决问题和实验操作能力,从而达到培养学生创新精神和实践能力的目的。     

基因工程开放实验中的几点体会

基因工程开放实验能够培养学生的实践动手能力,增强学生学习专业知识的兴趣,提高实验室资源的利用率,密切师生关系,增强教师的责任感。基因工程开放实验最终有利于该课程教学质量的提高和培养学生的创新能力。     

基因工程开放实验网络平台的建立

基因工程开放实验网络平台是基于基因工程实验教学而创建，主要方便师生进行交流学习。本文主要介绍实验网络平台的设计和制作，进一步讨论网络平台建立的意义和作用，并对一些需要改进的问题进行了探讨。     

SLA-Ⅰ重链分子的表达及结构分析

为研究SLA-Ⅰ重链分子在pMAL-p2X载体表达条件,从培养基pH值、温度、菌体密度、IPTG浓度、时间5个条件设计了优化条件的实验.SDS-PAGE筛选出在pMAL-p2X系统上表达SLA-Ⅰ重链分子的最佳条件,并运用EXPASY服务器上的SOPMA法对SLA-Ⅰ重链分子和HLA-A2进行2级结构的预测,同时同源模建其3级结构.结果表明：pH8.0,37℃,0.2 mmol/LIPTG,培养5 h,D600 nm=0.8是SLA-Ⅰ重链分子蛋白表达的最佳条件.2级结构预测和分析发现,猪和人MHCⅠ类分子重链2级结构成分上非常相似,其同源率远远大于氨基酸的同源率;同源模建发现,猪和人、小鼠的MHCⅠ类分子3级结构非常相似.