松材线虫快速检测试剂盒研制

采用引物对K09F2/R对枯死松树内分离的松材线虫、拟松材线虫及其他线虫进行检测,结果表明,所有松材线虫株系均扩增出一条340 bp的清晰、明亮的条带.而拟松材线虫、其他线虫均无扩增产物.利用引物对K09F2/R构建了松材线虫检测试剂盒.采用该试剂盒可使整个检测过程不超过2.5 h;该试剂盒检测灵敏度为1/7 条线虫,达到了对幼虫成功鉴定的目的,且检测结果便于判读,检测费用较低.     

松材线虫与拟松材线虫RAPD检测技术

采用RAPD技术对松材线虫和拟松材线虫进行了检测研究,从140个随机引物中筛选出引物OPK09与引物组合OPC18 OPN18。引物OPK09对12个松材线虫株系扩增出一条约2400bp左右的特异片段,引物组合OPC18 OPN18对10个拟松材线虫株系扩增出一条970bp左右的特异片段。实验表明,引物OPK09与引物组合OPC18 OPN18具有特异性强、灵敏度高的优点。用这两组引物可以快速、准确鉴定松材线虫和拟松材线虫。     

TGA/SDTA、DSC和Py-GC-MS分析叶醇糖苷热降解性质

为了开发热稳定型香原料，采用热重分析／同步差热分析法（TGA／SDTA）、差示扫描量热法（DSC）和在线热裂解气相色谱质谱法（Py—GC—MS）对叶醇糖苷的热降解行为及产物进行了研究．TG—DTC曲线显示主要失重区间在230—370℃，峰值为339．8℃，总失重96．9％；DTA显示在290—360℃有一个吸热峰，峰值为339．8℃；DSC显示230～340℃为吸热区间，峰值为301．3℃；Py—GC—MS测定了在200，350，500，650℃各温度下叶醇糖苷裂解的主要产物．在200℃，裂解量很少，350℃时则产生大量的叶醇和少量副产物，随着温度的升高，500℃和650℃时产生的副产物增加，使叶醇糖苷释放叶醇的最佳温度是350℃；热裂解的特征产物是叶醇，说明主要的裂解反应是氧糖苷键的断裂．     

17β-雌二醇及类似物与功能单体的相互作用

考察了17β-雌二醇（17β-E）及结构类似物与甲基丙烯酸甲酯（MMA）、甲基丙烯酸（MAA）和三氟甲基丙烯酸（TFMAA）等六种单体的相互作用。分别用紫外光谱 （UV）、红外光谱 （IR）和高效液相色谱 （HPLC）表征了用各单体的乙腈溶液分别与模板的相互作用和用沉淀聚合的分子印迹聚合物（MIP）的特性。结果表明,在全紫外聚合中,印迹17β-E 的TFMAA-co-TRIM聚合物的O—H振动吸收峰红移出现在聚合16h之后,C==O振动吸收峰则在聚合24h后发生红移。三种测试方法均证实TFMAA对17β-E有强相互作用,TFMAA-co-TRIM对雌二醇异构体（17β-E/17α-E）的印迹因子（IF）达到了3.01,分离因子α为2.28,具有良好的选择性。利用紫外法可初步检测各单体的乙腈溶液与模板相互作用强弱,再合成MIP,进行IR和HPLC表征,有助于筛选到对17β-E及结构类似物具有强相互作用的功能单体。     

白僵菌混合剂的自动喷撒装置

针对白僵菌生物粉剂农药的特点及使用现状，开发了一种白僵菌生物混合粉剂自动喷撒装置，提出该装置的原理、性能及关键参数的确定方法。在林区进行的小范围试验表明效果很好。该装置已获得了国家专利。     

脉冲超声波对黄粉虫幼虫水溶性蛋白结构的影响

采用功率1 000 W的脉冲超声波处理黄粉虫幼虫水溶性蛋白,并对蛋白的结构变化进行研究.结果表明:在脉冲超声波处理时间25 min内,蛋白的紫外吸收随着处理时间的延长而增强;蛋白的表面疏水性在处理10 min时达到最大,随后逐渐降低;游离巯基的含量在脉冲超声波处理5min时稍有降低,随后逐渐增加;蛋白粒径随着处理时间的延长而减小,当处理时间达到20 min时,粒径显著增大;蛋白二级结构中α-螺旋的含量降低,β-链及无规则卷曲的含量升高;脉冲超声波处理后蛋白的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱未发生改变,表明蛋白的一级结构未受到影响.     

松树体内寄生线虫种类及其致病性

松树是我国重要的造林先锋树种与景观绿化树种,然而,近年来在许多地方发现有不明原因、不同症状的枯萎松树,不同种类的寄生线虫在枯萎松树中被发现.笔者对松树体内的寄生线虫以及这些寄生线虫的致病性进行了综述.到目前为止,在我国松树上已经发现寄生线虫有11属42种以及11个未定种.除松材线虫外,一些线虫如拟松材线虫、Bursaphelenchus sexdentati等也能够引起某些松树的死亡.     

应用PCR-RFLP技术鉴别松材线虫与拟松材线虫

应用PCR—RFLP技术分析松材线虫与拟松材线虫之间的差异。实验扩增出松材线虫rDNA—ITS区片段长度约为890bp，拟松材线虫rDNA—ITS区片段长度约为930bp。用5种限制性内切酶对两种线虫的ITS区扩增产物进行酶切，结果表明：（1）DraⅠ酶切松材线虫群体均产生两个长度约510bp和380bp的片段，而拟松材线虫均不能被DraⅠ酶切；（2）所有的松材线虫群体与拟松材线虫群体的ITS区扩增产物均不能被ApaⅠ酶切；（3）用MspⅠ酶切松材线虫群体，除GZ02不能够被酶切外，其余样本能够产生两条长度分别为530bp和360bp的谱带。拟松材线虫群体，都能产生3条一致的亮带，长度分别为340bp、290bp、180bp；（4）所有松材线虫样本均不能被SalⅠ酶切，而拟松材线虫群体均能够被酶切为两个720bp和220bp的片段；（5）XhoⅠ酶切松材线虫ITS区为两条大小分别为520bp和370bp的谱带。而拟松材线虫产生两条大小分别为530bp和400bp的谱带。因此，内切酶DraⅠ、SalⅠ可以用于检测松材线虫与拟松材线虫。MspⅠ、ApaⅠ、XhoⅠ不宜用于鉴别松材线虫与拟松材线虫。     

顺-3-己烯基-β-D-吡喃葡萄糖苷的合成、纯化与表征

为开发热稳定型香原料,采用改进的Koenigs-knorr法立体选择性地合成了顺-3-己烯基-β-D-吡喃葡萄糖苷即叶醇糖苷(LGLY)--一种糖苷类香料前体;以反相液相色谱法(RP-HPLC)检测并确定最优反应条件.优化后的反应条件为:在新制备加担持剂的银盐催化剂作用下,在二氯甲烷溶剂中避光回流反应4 h.硅胶柱层析色谱梯度洗脱分离制备样品,收率56%,产物纯度99.6%.然后综合IR,LC-MS-MS,1H-NMR,13C-NMR进行了结构鉴定,确证产物为目标糖苷.对香料前体叶醇糖苷的合成、纯化及结构表征进行了系统的研究.     

几种甾醇异构体在TFMAA-co-TIRM 分子印迹聚合物中的热力学特征

以17β-雌二醇为模板,三氟甲基丙烯酸(TFMAA)作功能单体,三羟甲基丙烷三甲基丙烯酸酯为交联剂的17β-雌二醇TFMAA-co-TIRM分子印迹聚合物(MIP)已被制备.本文主要以HPLC为手段调查MIP的热力学特性,评价了四种甾醇化合物在识别过程中的焓(△H)、熵(△S*)和自由能(△G)的热力学参数的变化,结果发现MIP的选择性识别特性受到焓驱动,MIP对印迹分子和它的结构类似物的识别还依赖于具有与模板分子良好地吻合的三维孔穴.