可跨膜SOD对肝癌及正常肝细胞增殖的作用

可跨膜融合蛋白PTD-SOD与肝癌细胞和正常肝细胞共培养,使细胞内SOD活力分别增加了52%和23%,提高胞内总抗氧化能力(T-AOC)水平达100%,同时降低ROS水平.实验结果显示,肝癌细胞增殖受到显著抑制,最高抑制率达91.91%,对正常肝细胞抑制率较小,为45.50%.     

影响双向电泳分离效果的若干实验条件比较研究

对第一向为载体两性电解质pH梯度等电聚焦双向电泳(ISO-DALT)中若干影响分离效果的实验条件进行了研究.结果发现,琼脂糖和尿素的纯度明显影响分离效果;加丙烯酰胺或碘乙酰胺保护经二硫苏糖醇还原的样品中的巯基,可以显著减少假斑点;厚度较薄的分离胶的分离效果较好;以琼脂糖为两性电解质载体代替聚丙烯酰胺的第一向等电聚焦电泳使分子量105Da以上蛋白质得以分离.     

大黄鱼生长激素基因的克隆与表达

采用RT-PCR方法从大黄鱼脑垂体总RNA中克隆编码生长激素基因序列,并与数据库中鱼类生长激素基因进行比较.扩增获得的生长激素基因定向克隆到表达质粒pET-22b(+),并在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达.表达的蛋白为可溶性蛋白,表达量占细胞总蛋白的5%.     

色氨酸在 Toyopearl HW-40S 凝胶填料上非理想排阻行为的研究

发现１８种氨基酸特别是色氨酸．在ＴｏｙｏｐｅａｒｌＨＷ－４０Ｓ树脂所填色谱柱上表现出非理想排阻行为的基础上，以色氨酸在该柱上的保留时间为指标，探讨不同流动相改良剂对该凝胶与色氨酸之间的相互作用，阐明这种反常行为是疏水作用，离子交换以及氢键三者综合作用的结果，而疏水作用是最主要的影响因素．实验结果表明，流动相组成对该凝胶色谱行为具有明显的影响，从而有助于确立该凝胶理想的排阻色谱条件，为利用该凝胶所具有的吸附性能分离分析肽类和氨基酸等小分子物质奠定了基础     

超声波技术在咸蛋腌制中的应用及其机理初探

通过跟踪检测咸蛋腌制过程中蛋清氯化钠浓度的变化，观察到蛋清粘度对氯化钠进入蛋清的显著作用。利用超声波降低蛋清粘度的特性，把超声波技术应用于咸蛋的腌制，明显促进氯化钠的渗透与扩散，缩短了腌制时间。这一结果从粘度的角度初步揭示了超声波促进咸蛋腌制的机理，为超声技术在咸蛋生产中的应用提供了重要的理论依据。     

肠道菌群模式菌株的HPLC分离条件优化及其表征

采用高效液相色谱分别考察了肠道菌群模式菌株及各单菌的色谱行为,成功建立了HPLC分离分析肠道菌群模式菌株的最佳洗脱方法,即阶梯式梯度洗脱.结果显示,肠道模式混合菌株经过高效液相色谱分离得到5个明显的洗脱组分,分别为0.10 mol·L~(-1)(脆弱拟杆菌和金黄色葡萄球菌)、0.20 mol·L~(-1)(青春双歧杆菌和鼠李糖乳杆菌)、0.25 mol·L~(-1)(粪肠球菌)、0.30 mol.L~(-1)(奇异变形杆菌、克雷伯肺炎杆菌和产气荚膜梭菌)和0.50 mol·L~(-1)(大肠杆菌和产气荚膜梭菌)洗脱峰.色谱柱的上样浓度为培养菌液(OD600=0.576)的5倍时,其最大上样量为500μL,且方法分辨率高、重现性好、结果稳定.     

尖吻蝮蛇类凝血酶在大肠杆菌中的表达及其优化

将尖吻蝮蛇类凝血酶基因克隆到载体pET32a(+)上,在大肠杆菌Rosetta2(DE3)中表达N端融合了硫氧还原蛋白的类凝血酶.通过SDS-PAGE检测融合蛋白条带,纤维蛋白原凝结实验检测酶学活性.确定表达菌株后,对其诱导条件进行优化,在30℃诱导3 h,诱导剂IPTG浓度为0.5 mmol·L-1条件下类凝血酶表达水平最高.     

蛹虫草整株粉、子实体粉和菌丝体粉的抗氧化性及其对经络体表电位差的影响

为研究蛹虫草整株粉、子实体粉和菌丝体粉的抗氧化性及其对经络体表电位的影响,测定了3种蛹虫草粉的DPPH自由基清除能力和氧自由基清除能力(ORAC)。召集40名健康志愿者按随机数字表法分为4组,空白组饮用100 mL蒸馏水,蛹虫草整株粉组、子实体粉组、菌丝体粉组各取相应粉末10 g冲泡于100 mL的蒸馏中饮用。选取志愿者同一条经络上的合穴和原穴作为经络体表电位的测量点,均以合穴为正极,原穴为负极,记录服用过程中经络体表电位的变化。蛹虫草整株粉、子实体粉和菌丝体粉的DPPH自由基清除能力值分别是(25.97±1.39)、(14.34±1.68)、(19.56±0.80)μmol/g(以Trolox质量计);ORAC值分别是(16.85±1.13)、(6.21±0.76)、(10.39±0.88)μmol/g(以Trolox质量计)。蛹虫草整株粉可以降低肺经、胃经、脾经、肾经、心包经、胆经和肝经的体表电位,提高小肠经的体表电位;子实体粉可以降低脾经和肾经的体表电位,提高小肠经的体表电位;菌丝体粉可以降低肾经和大肠经的体表电位,提高胃经、心包经和胆经的体表电位。抗氧化能力由高到低依次为蛹虫草整株粉、菌丝体粉和子实体粉,3种蛹虫草粉都能特异性的影响人体的经络体表电位。研究结果旨在为评价不同蛹虫草部位对人体的功效差异提供一定参考。     

重组SOD在毕赤酵母中表达的发酵工艺研究

以实验室构建的产SOD重组菌为出发菌株,研究其摇瓶发酵工艺条件以提高表达水平,进而在5L高密度发酵. 以确定接种后诱导时间（16h）、诱导剂浓度（2%）、温度（30℃）、初始pH值（6.2）和诱导时间72h为条件,摇瓶水平酶活比初始时提高了64%;经5L罐发酵实验,酶活达到40864U·mL^-1,是摇瓶的86倍.