北冬虫夏草多肽分离纯化及活性研究

目的对北冬虫夏草活性多肽进行分离纯化,并测定其抗氧化活性.方法优选北冬虫夏草多肽的提取方法;通过体外抗氧化DPPH清除率测定北冬虫夏草多肽的抗氧化活性;通过大孔树脂HP-20对北冬虫夏草多肽产物进行分离纯化,并分别测定洗脱后各浓度产物的蛋白含量和抗氧化活性,经Tricine-SDS-PAGE电泳法初步鉴定北冬虫夏草中多肽的分子量.结果 Tris-HCl作为提取液时DPPH清除率最高可达88.68%;经大孔树脂HP-20洗脱并分离纯化后,25%浓度的乙醇溶液和去离子水可作为洗脱剂; Tricine-SDS-PAGE结果显示:北冬虫夏草中富含小分子肽.结论此研究确定了北冬虫夏草多肽的最佳提取工艺,提高了初步提取多肽的产量;北冬虫夏草中的多肽具有一定的抗氧化活性.     

姬松茸多糖酶降解对D-半乳糖诱导3T3细胞氧化损伤的保护作用

目的优化并建立姬松茸多糖(Agaricus blazei polysaccharide,ABP)的酶解工艺,探讨其对D-半乳糖诱导小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)衰老的保护作用.方法采用响应面法检测姬松茸多糖最佳酶解工艺;用D-半乳糖诱导氧化损伤;采用噻唑蓝(MTT)法检测各时期细胞活力;测定抗氧化指标.结果姬松茸多糖最佳酶解工艺:加酶量为2.9%,温度为59℃,时间为2.1 h,该酶解方法姬松茸多糖提取率为11.18%.选取培养48 h的3T3细胞进行自由基活性检测,其中模型组与对照组比较细胞存活率降低,差异具有统计学意义(P0.01).给药组与对照组比较细胞存活率增加,在给药终浓度为100μg/mL时,细胞恢复效果最佳,细胞内SOD活力升高(P0.05),CAT活力降低(P0.01),MDA含量显著减少(P0.01),差异具有统计学意义,并且呈现剂量依赖性.结论该方法建立了高效、稳定的姬松茸多糖酶解工艺,获得的姬松茸多糖能够抑制细胞氧化损伤,对D-半乳糖诱导的3T3细胞衰老具有保护作用.     

梅花鹿茸多肽对小鼠成骨细胞MC3T3-E1生物学活性的影响

目的探讨3种不同提取方法的梅花鹿茸多肽对小鼠成骨细胞MC3T3-E1细胞生物学活性的影响.方法分别采用匀浆法、匀浆裂解法、匀浆超声法在新鲜梅花鹿茸中提取梅花鹿茸多肽(velvet antler polypeptiddes,VAP),用BCA法对梅花鹿茸多肽蛋白质浓度进行分析,培养MC3T3-E1细胞,采用MTT法检测3种提取方法获得的梅花鹿茸多肽对细胞增殖率的影响,利用茜素红染色对MC3T3-E1细胞进行矿化定量测定.结果匀浆法多肽得率9.08%;匀浆裂解法多肽得率15.56%;匀浆超声法多肽得率13.38%;鹿茸多肽能明显促进MC3T3-E1细胞的增殖,并且匀浆超声法的增殖作用最强.钙沉积物的比较表明:与对照组比较,匀浆法、匀浆裂解法和匀浆超声法对MC3T3-E1细胞中的矿化现象呈现递增趋势.结论 3种提取方法综合比较,采用匀浆超声破碎方法提取梅花鹿茸多肽,不仅可以节约时间,而且提高了梅花鹿茸多肽的提取量,是较为理想的鹿茸多肽提取方式,并且能明显地促进MC3T3-E1细胞的增殖和矿化.     

PI-3K转导通路在Ⅱ型糖尿病发病机制中作用的研究进展

胰岛素是通过胰岛素信号的转导通路来发挥其调节血糖并且促进其代谢合成的,其中磷脂酰肌醇-3激酶（PI-3K）在胰岛素信号转导中起关键性作用,而胰岛素信号转导通路障碍所引起的胰岛素抵抗在Ⅱ型糖尿病治疗中有着至关重要的作用．从胰岛素抵抗的发病机制、影响PI-3K的因素等几个方面综述了PI-3K在Ⅱ型糖尿病发病机制中的作用．     

桂枝浸出物对小鼠巨噬细胞内α-TNF基因表达的影响

目的：检测小鼠应用桂枝浸出物后腹腔巨噬细胞内TNFα-mRNA含量的变化。方法：雌雄小鼠随机分组，口服给药后制备巨噬细胞涂片。克隆人TNF－DNA的PGEM-1质料转化EcoliJM103，选择培养扩增。随机引物法制备地高辛标记的探针，利用原位杂交技术检测巨噬细胞内TNFα-mRNA的表达。结果：抗肿瘤中草药桂枝等浸出物可增强小鼠腹腔巨噬细胞内TNFα－mRAN－mRAN表达。结论：分子生物学的方法与手段可用于揭示抗肿瘤中草药的作用机理。     

流感病毒NS1蛋白在复制中的作用研究

流感病毒NS1基因敲除毒株(delNS1毒株)的获得可以使我们建立更有效的生物学关系,主要表现在流感病毒繁殖周期和致病的过程中,流感病毒NS1蛋白和双链RNA活性蛋白激酶(PKR)之间的生物学关系.实验结果表明,缺少功能性的PKR可以使delNS1毒株在其他非允许宿主中繁殖,这表明流感病毒NS1蛋白的主要功能是对抗或阻止PKR调解抗病毒效应.     

玉米须蚕茧总皂苷提取工艺条件优化研究

目的 为充分利用玉米须蚕茧资源,研究提取玉米须蚕茧总皂苷的最佳工艺条件.方法 选用提取时间、提取次数、提取温度和加水倍数作为考查因素,采用纯物理的工艺流程从玉米须中提取总皂苷,通过正交试验,筛选玉米须蚕茧总皂苷的提取工艺条件.结果 玉米须蚕茧总皂苷提取最佳条件为乙醇浓度70%,料液比为1:20,60℃回流提取1.5 h.结论 可以通过正交试验优化提取玉米须总皂苷的最佳工艺条件.     

参归多维口服液对小鼠抗疲劳功能的影响

目的研究参归多维口服液对正常小鼠抗疲劳功能的影响.方法以参归多维口服液浓缩液0.1,1.0,3.0 m L/kg作为低、中、高剂量组,小鼠连续灌胃给药30 d,末次给药30 min后,小鼠负荷5%体质量,进行负重游泳实验,观察小鼠负重游泳时间及对小鼠增重的影响;末次给予参归多维口服液30 min、游泳90 min、休息60 min后采血,进行血清尿素含量测定;末次给予参归多维口服液30 min后处死小鼠取肝脏,测定肝糖原;末次给予参归多维口服液30 min后采血,不负重游泳10 min,在游泳后立即(游泳后0 min)和游泳后休息20 min采血,测定以上3个时间点的血乳酸值.结果参归多维口服液各剂量组小鼠增重与阴性对照组比较差异无统计学意义(P0.05),高剂量组游泳时间明显长于阴性对照组(P0.01);参归多维口服液高剂量组小鼠游泳后血清尿素低于阴性对照组(P0.05);与阴性对照组比较,参归多维口服液各剂量组肝糖原储备比较差异无统计学意义(P0.05);与阴性对照组比较,参归多维口服液高剂量组小鼠游泳后3个时间点血乳酸曲线下面积有所降低.结论参归多维口服液具有缓解体力疲劳的功能.     

肿瘤坏死因子的抗肿瘤活性及临床应用

肿瘤坏死固子(tumor necrosis factor,TNF)是近年来研究较深入,应用较广泛的一种新型细胞因子,而人们对其功能的认识及其经验性应用却已有相当的历史。早在19世纪末人们就发现某些肿瘤患者感染细菌或注射细菌混合物后,肿瘤缩小。如Coley于1891年曾报告,当患肉瘤的病人再患丹毒时肉瘤可出现自发消退的现象。由此引发出临床上采用菌苗抗癌的免疫疗法,并认识到细菌的有效成分是内毒素。本世纪30年代初,Gratia和Shear分别报道,当给移植瘤小鼠静脉注射脂多糖后,肿瘤会发生出血、结痂,而小鼠得到治愈。接着,Ribi等人将卡介苗(BCG)和脂多糖联合来治疗豚鼠移植性肝癌,使肿瘤缓解率有所提高。1975年Garswell等发现,经卡介菌感染的小鼠静脉注射大肠杆菌内毒素2小时后,其血清活性较高的肿瘤细胞毒因子,此种因子可使带瘤动物的肿瘤发生明     

青霉素与糜蛋白酶联合治疗淋病

作者用青霉素与糜蛋白酶联合治疗淋病34例,取得良好效果。本文介绍了药物的剂量、治疗方法及疗效观察,其治疗组与对照组相比治愈率有高度显著性差异。作者认为糜蛋白酶在淋病治疗中可多方面增强抗生素作用,而且疗程短、价格低、药源丰富是目前治疗淋病的有效方法之一,值得推广使用。