胡萝卜籽抗氧化肽的分离纯化及活性研究

采用凝胶过滤色谱Sephadex G-50和反相高效液相色谱对胡萝卜籽中的抗氧化肽进行分离纯化.以DPPH自由基(2,2-二苯基-1-苦肼基)清除率为指标,测定多肽的抗氧化活性.采用电喷雾电离质谱法测定该多肽的相对分子质量.研究结果表明:经过分离纯化,得到一个具有较强抗氧化活性的多肽,在质量浓度为1 mg·m L-1时,其DPPH自由基清除活力达到(92.02±0.47)%,相对分子质量为339.3 u,由3个氨基酸残基组成.     

树莓干果粗黄酮纯化和活性研究

以树莓干果为原料,通过比较HP-20、D101、X-5、LX-68、AB-8、XDA-6、XDA-8、D201大孔树脂对树莓粗黄酮静态吸附率和解吸率的影响,筛选出适宜分离纯化树莓黄酮的大孔树脂为XDA-6树脂.结合静态与动态吸附解吸实验,得出用XDA-6大孔树脂分离纯化树莓黄酮的最佳工艺.将树莓粗黄酮提取原液作为上样液,以6 BV/h(1 BV为1个柱体积)的流速上样吸附,之后采用60%乙醇作为洗脱剂,以4 BV/h的流速进行洗脱,洗脱剂用量为5 BV.在此纯化条件下所得树莓黄酮质量分数为35.8%,较纯化前提高了1.21倍;干粉质量浓度在0.5 mg/m L时,对DPPH的抗氧化活性从纯化前的62.51%提高到70.36%,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、棉花枯萎菌、小麦赤霉菌均有一定的抑制作用,纯化后的抑菌效果优于纯化前.     

文蛤蛋白水解制备抗氧化活性肽的研究

以文蛤蛋白为原料,通过蛋白酶水解制备抗氧化活性肽.利用体外清除DPPH活性评价酶解产物的抗氧化活性,采用超滤、葡聚糖凝胶柱层析和HPLC对相应的活性肽进行分离纯化,通过HPLC-MS进行结构鉴定.结果表明:木瓜蛋白酶水解产物的DPPH清除活性明显高于碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶,产物质量浓度为1 mg·mL-1时,DPPH清除率为55.74%;以DPPH清除率为筛选指标,对木瓜蛋白酶酶解产物进行逐级分离,得到4个具有抗氧化活性的目的肽段,氨基酸序列分别为LNFNLEKSR(1120.3 u)、SWLRPR(814.4 u)、RIGNIISQY(1063.3 u)和LNFNLEK(877.2 u).     

甘西鼠尾草水溶性多糖提取工艺的优化及体外抗氧化活性测定

本文利用超声波辅助水提醇沉法提取甘西鼠尾草粗多糖,应用单因素和Box-Behnken响应面法进行提取工艺优化.对甘西鼠尾草粗多糖进行脱色素、脱蛋白处理得到初步纯化多糖,并对粗多糖和初步纯化多糖进行体外抗氧化活性的测定.结果表明,甘西鼠尾草粗多糖的最佳提取条件为:液料比31:1 m L/g、提取时间2. 7 h、提取温度75℃、超声波功率300 W.在此条件下,甘西鼠尾草粗多糖的提取率为6. 568%,与预测值基本一致.清除自由基实验表明,在一定浓度范围内,对·OH自由基清除活性最高清除率达64. 34%;对DPPH清除活性最大清除率达83%.     

甘草渣多糖的大孔树脂分离纯化及抗氧化活性的研究

为探讨甘草渣中多糖的分离纯化条件及抗氧化活性,进行了大孔树脂的选择实验研究,并由大孔树脂动态吸附实验及动态洗脱实验研究确定了HPD-722大孔树脂分离纯化甘草渣多糖的最佳条件,并以维生素C作为对照,对甘草渣多糖清除DPPH自由基和羟基自由基的能力进行了检测。检测与分析结果表明:HPD-722树脂对甘草多糖的吸附率为73.25%,解吸率为86.59%,适合于甘草多糖的纯化;甘草渣多糖最佳分离条件为:上样液甘草多糖浓度4.12 mg/m L、上样量2 BV、上样流速2 BV/h,洗脱剂为50%乙醇,洗脱流速3 BV/h,洗脱剂用量3BV,在最佳条件下甘草多糖的纯度由纯化前的7.64%提高为51.65%;通过抗氧化性实验显示甘草多糖具有较强的抗氧化性,能清除DPPH自由基和羟基自由基,是一种很好的天然抗氧化剂。     

文冠果种仁总皂苷的提取纯化及其抗氧化活性

研究了超声波辅助提取文冠果种仁中总皂苷的工艺条件,并探讨了大孔树脂分离纯化总皂苷的参数以及文冠果总皂苷的体外抗氧化活性。以乙醇为提取剂,通过单因素和正交实验考察了提取剂浓度、提取温度、料液比、超声功率对总皂苷提取的影响。结果表明:乙醇的体积分数70%、提取温度50℃、料液比1∶20、超声功率140 W时,提取物中总皂苷含量最高,达2.69%。采用XAD-16大孔树脂分离纯化文冠果种仁总皂苷,其最佳条件为:静态吸附与解吸时间分别是12h和4h,洗脱剂乙醇的体积分数70%;上样液密度0.12mg/mL(pH=4),上样流速10mL/min,上样液体积与柱体积比1.5,纯化后的总皂苷浓度有较大提高。以Vc作对照,研究文冠果种仁总皂苷的抗氧化活性,结果表明其还原能力和对羟自由基的清除作用高于Vc,清除DPPH自由基和对O-2自由基的能力比Vc要弱。     

两种苦瓜多糖对人白血病细胞体外增殖的影响

采用热水浸提法提取苦瓜粗多糖,经DEAE-52纤维素层析柱对其进行分离纯化,以蒸馏水和0.1mol/L NaCl进行洗脱,分别得到水洗苦瓜多糖(W-MCP)和盐洗苦瓜多糖(S-MCP).采用MTT法对这两种苦瓜多糖对人白血病系细胞K562体外增殖抑制作用进行研究,并对其抗氧化(O2-.、DPPH和脂质过氧化)活性进行测定.结果显示:W-MCP和S-MCP对K562细胞的抑制作用随着时间延长而增强,48h时抑制率趋于稳定,在72h、400μg/mL下W-MCP和S-MCP的最大抑制率分别为30.46%和28.61%;W-MCP和S-MCP对O2-.的最高清除率分别为58.52%和44.71%,对DPPH自由基的清除作用随浓度的升高而降低,最高清除率分别为19.01%和30.11%,对脂质过氧化反应的抑制作用都较小,可见苦瓜多糖具有一定的抗氧化和抑制癌细胞增殖作用.     

血红铆钉菇多糖分离纯化及抗氧化活性研究

目的探讨血红铆钉菇的多糖分离纯化及抗氧化活性方法.方法应用传统热水浸提法提取粗多糖,进行反复冻融后初步去除蛋白,再用sevage法除蛋白,纯化后苯酚-硫酸法测糖含量,考马斯亮蓝法测蛋白含量,对多糖进行超氧阴离子自由基、羟基自由基和DPPH等体外抗氧化能力试验.结果传统热水浸提方法得糖率为4. 19%,除蛋白后蛋白含量为10. 71%,并且血红铆钉菇多糖对超氧阴离子清除效果最好,而对DPPH和羟自由基的清除效果也较为明显.结论血红铆钉菇有较强的体外抗氧化活性,并且清除率随多糖的浓度增大而增加.     

大孔吸附树脂提取粗壮女贞苦丁茶总黄酮及抗氧化活性

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化苦丁茶总黄酮的最佳工艺及黄酮化合物的抗氧化活性.方法:采用大孔吸附树脂法获得总黄酮.利用紫外分光光度法测定苦丁茶总黄酮不同浓度下在体外对DPPH自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基和ABTS自由基的清除能力.结果:大孔吸附树脂提取最佳工艺为上样流速为3 mL/min,上样浓度为1.2 mg/mL,其黄酮类化合物在体外抗氧化的能力包括ABTS自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基,在不同浓度下的最大清除能力分别为88.65%、87.94%、89.11%和73.21%.结论:总黄酮对4种自由基有良好的清除效果.     

DPPH清除法评价刺枚果黄酮的抗氧化活性

应用消除自由基DPPH法评价刺枚果黄酮抗氧化活性.对刺枚果黄酮提取物用D101型大孔树脂进行纯化,得到梯度洗脱部位,测定对自由基DPPH消除能力,比较维生素C和刺枚果精制黄酮的抗氧化能力.     

超声辅助提取桑葚多酚及抗氧化活性分析

采用超声辅助提取技术从桑葚中提取多酚,通过正交设计方法分别考察溶剂浓度、料液比和超声时间3个因素对桑葚多酚提取效果的影响,以优化桑葚多酚的提取工艺.并通过DPPH自由基抗氧化试验、ABTS+自由基清除试验和铁离子还原力来评价桑葚多酚的抗氧化活性.结果表明,桑葚多酚的最适提取工艺条件为:超声时间70 min,浸提溶剂70%乙醇,料液比1∶30(g∶m L).在此条件下总酚提取率为4.014%.在抗氧化活性试验中发现,在一定浓度范围内随样品浓度的增加其抗氧化能力越强.大孔吸附树脂纯化前后桑葚多酚的铁离子还原力、DPPH和ABTS自由基清除能力IC50分别为0.730、0.682、0.586 mg/m L和0.4536、0.556、0.290 mg/m L.由此可知,纯化前后桑葚多酚均具有较强的自由基清除能力,且纯化后的桑葚多酚抗氧化能力比纯化前的强,这表明多酚是桑葚抗氧化活性的物质基础.     

芭蕉叶挥发油的提取及其抗氧化活性研究

采用水蒸气蒸馏法提取了芭蕉叶挥发油,对挥发油进行了GC-MS分析,鉴定出29种成分.通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法和β-胡萝卜素漂白法,测定了芭蕉叶挥发油的抗氧化活性;当挥发油浓度为0.30mg/mL时,对DPPH自由基的清除率达82.2%;在乳化脂质体系中,当挥发油浓度为50μg/mL时,β-胡萝卜素漂白抑制率达到92.0%.抗氧化活性研究表明:芭蕉叶挥发油具有较强的抗氧化活性.因此,芭蕉叶挥发油可以作为一种新型的天然抗氧化物质.     

橘皮黄酮提取的响应面优化及抗氧化活性研究

以黄酮得率为指标,采用Box-Behnken中心组合实验和响应面分析法,研究了料液比、提取温度和提取时间对橘皮中黄酮类化合物提取的影响;用AB-8型大孔吸附树脂为色谱柱填充料,对橘皮黄酮提取物进行了纯化;以橘皮黄酮对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羟基自由基的清除率为指标,研究了橘皮黄酮的体外抗氧化活性.结果表明：橘皮黄酮的适宜提取工艺是以水为提取溶剂、料液比为1∶38（g/mL）、于99℃浸提2 h,该条件下橘皮黄酮的最大得率为11.028 mg/g;AB-8型大孔吸附树脂对橘皮黄酮类化合物的纯化效果明显,纯化后橘皮黄酮的纯度提高了383.312%;对DPPH自由基、羟基自由基清除率的半抑制浓度（IC50）分别为0.019和0.557 mg/mL,纯化后橘皮黄酮对DPPH和羟基自由基的清除能力分别提高了96.185%和65.122%,表明橘皮黄酮是一种良好的天然抗氧化剂.     

龙井茶叶多糖的再认识及其结合物的抗氧化活性研究

对龙井茶叶多糖及其结合物的抗氧化和清除自由基活性开展研究。采用水提醇沉法提取龙井茶叶多糖,经除蛋白和纯化后得到精制多糖(LP),将LP在三氟乙酸条件下水解完全,经C18柱层析分离后得到水洗脱部分(LP-HCW)和甲醇洗脱部分(LP-HCM),利用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法和普鲁士蓝法测定LP、LP-HCM和LP-HCW的清除自由基和抗氧化能力。结果显示:LP、LP-HCM和LP-HCW的DPPH自由基清除率分别为38.49%,59.48%和24.81%;还原力指数分别为0.062,0.036和0.030。实验证明:龙井茶叶多糖及其结合物均有较强的药理作用,具有清除自由基和抗氧化活性。     

雪樱子粗多糖提取、纯化工艺及抗氧化活性研究

以雪樱子为原料,优化雪樱子粗多糖水提醇沉提取法及AB-8型树脂纯化工艺。并以维生素C作为对比,以羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、DPPH自由基清除能力作为指标,对雪樱子粗多糖进行了体外抗氧化活性的测定。结果表明,雪樱子粗多糖的优化提取工艺为:醇沉乙醇体积分数80%、料液比(g/mL)1∶20、提取温度95℃、提取时间6h,粗多糖得率为(1.421±0.081)mg/g。雪樱子多糖优化纯化工艺为:上样液质量浓度1.00mg/mL,上样液pH值5,吸附速率2BV/h,乙醇洗脱剂体积分数25%,洗脱速率2BV/h,回收率为44.99%±1.23%。雪樱子粗多糖具有较好的体外抗氧化活性。研究结果为雪樱子多糖活性分析和功能性产品开发提供了技术支持。     

不同体积分数洗脱剂对海边月见草茎提取物抗氧化活性的影响

海边月见草茎提取物经X-5大孔树脂吸附,用体积分数为10%、30%、50%、70%的乙醇溶液进行洗脱,得到4种洗脱级分.采用二苯代苦肼自由基(DPPH·)体系、羟自由基体系、超氧阴离子自由基体系及抗卵黄脂蛋白脂质过氧化体系对4个级分的抗氧化活性进行了测定.结果表明,海边月见草茎提取物4种洗脱级分具有不同程度的清除自由基能力,其中30%乙醇级分的抗氧化活性最强.该级分对DPPH自由基的清除率为82.60%,对H2O2/Fe2 产生羟自由基的清除率为65.43%,对邻苯三酚自氧化产生超氧阴离子自由基的抑制率为26.16%,对卵黄脂蛋白PUFA过氧化的抑制率为80.97%.综合评价其抗氧化活性比芦丁好或相当,但比槲皮素略差.同时显示抗氧化活性与其黄酮体积分数有一定的相关性.     

小腊树黄酮的分离纯化及抗氧化研究

研究了大孔树脂分离纯化小腊树黄酮的工艺,以及纯化前后对DPPH自由基的清除作用.结果表明:AB-8型树脂是分离纯化黄酮的适宜大孔树脂;AB-8型大孔树脂分离纯化黄酮的最佳工艺条件为:提取物上样量为6BV(以湿树脂体积计),先用水淋洗,再用30%的乙醇洗脱,洗脱剂用量为3.3倍湿树脂体积.纯化后黄酮对DPPH自由基的清除效果要低于纯化前.     

麻栎树皮多酚含量的测定及抗氧化活性的研究

采用分光光度法、DPPH法和连苯三酚红(PR)法对麻栎树皮提取物进行多酚化合物含量及抗氧化活性测定,讨论了用不同溶剂提取对多酚含量的影响.结果表明采用70%乙醇进行提取,提取物中多酚含量最高,为(6 589.91±43.32)mg/100 g.抗氧化活性测试中,麻栎树皮的不同溶剂提取物对DPPH自由基和羟自由基都表现出较高的清除率,其中麻栎树皮70%丙酮提取物的活性最好,在0.18 mg/m L质量浓度下,对DPPH自由基清除率为70%,在0.38 mg/m L质量浓度下,对羟自由基氧化率为75%.     

不同提取方法对姬菇多糖抗氧化活性的影响

本研究采用传统水提法、超声波提取法、超声波辅助水提法、酸提法、碱提法、超声波辅助酸提法和超声波辅助碱提法7种方法提取姬菇多糖,测定还原力、羟自由基(·OH)清除率、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除能力、DPPH自由基清除力作为体外抗氧化作用的评价指标,并与Vc对照.结果表明酸法提取多糖得率最高,可达6.58%.总体来看,超声波辅助水提法所得姬菇多糖的抗氧化活性最好,多糖浓度为10 mg·m L~(-1)时其还原力达到2.18,·OH清除率为95.56%;多糖浓度为1 mg·m L~(-1)时,O_2~-·的清除率达到62.35%;多糖浓度为2 mg·m L~(-1)时,对DPPH自由基的清除率达到80.32%.超声波辅助碱提法所得多糖的抗氧化活性也较好,而超声波辅助酸提法所得多糖的抗氧化活性最差.由此可见,采用超声波辅助水提法所得多糖有利于姬菇多糖生物活性方面的研究.     

木棉花黄酮的大孔树脂纯化及其祛痘功效分析

以广东肇庆木棉花为原料,经过超声辅助醇提后,筛选最适大孔树脂类型并确定木棉花黄酮粗提物的纯化工艺,采用体外抑菌圈实验方法测定纯化精制的木棉花黄酮对表皮葡萄球菌和痤疮丙酸杆菌的抑制效果;采用体外美白活性方法测定木棉花黄酮对酪氨酸酶的抑制率,并通过斑马鱼胚胎黑色素抑制测试法对木棉花黄酮的美白活性进行进一步验证;最后采用体外抗氧化活性测定方法考察木棉花黄酮对ABTS·⁺和DPPH等自由基的清除能力。通过对比8种大孔树脂对木棉花黄酮的吸附率和解析率,筛选出D101为最佳树脂类型,同时考察得出其解析液最佳的乙醇体积分数为60%;其最佳的动态吸附-解析条件为：上样体积2 BV,解析液洗脱体积0.625 BV。纯化后木棉花黄酮的纯度由32.5%提高至98.2%。精制的木棉花黄酮对ABTS·⁺和DPPH自由基清除率的IC₅₀（半抑制浓度）值分别为（616.90±11.15） mg/L和（11.80±0.62） mg/L。木棉花黄酮对酪氨酸酶抑制率的IC₅₀值为（1.69±0.01） g/L。木棉花黄酮质量浓度在1....