超螺旋PGEM-1重组质粒的提取、纯化与鉴定

本文采用Sepharose2B层析法去除粗提物中的RNA,用0.7％低融点琼脂糖凝胶回收超螺旋质粒,使质粒的纯化过程费时较少且获得令人满意纯度的超螺旋质粒。     

血小板生长因子及其受体与疾病的关系

血小板生长因子(PDGF)是一种无处不在的生长因子,它由A、B两链组成,是一种碱性的蛋白质,PI9.8～10,分子量30KDa。血小板生长因子受体是一种存在于细胞膜上的糖蛋白,由α、β两个亚基组成,PDGF与其相应受体结合发挥特有的生物学作用。PDGF不仅在正常体内起作用且与某些疾病密切相关。 1974年Ross等人发现血凝块或全血中存在有促进间充质细胞(如成纤维细胞等)分裂作用的物质,由于这种物质来源于血小板,故被定义为血小板生长因子,但是分泌血小板生长因子不只限于血小板,其它许多细胞如:某些赘生物或肿瘤细胞、血管内皮     

CO2激光治疗尖锐湿疣烟雾中HPV DNA检测及致病性的研究

目的 探讨CO2激光治疗尖锐湿疣过程中所排放的烟雾是否有人类乳头瘤病毒（HPV DNA）存在，这些病毒的致病性如何。方法 收集32例尖锐湿疣患者的烟尘标本共96份，距烧灼部位1cm处、3cm处、5cm处各32个；用PCR方法检测烟尘标本中的HPV DNA，观察其阳性率；用烟尘标本涂擦30只大白鼠的阴道、外阴粘膜，对有皮损的部位做病理切片及PCR检测。结果 用CO2激光治疗尖锐显疣的过程中，有HPV DNA存在。经大白鼠感染试验，有一定的致病性。结论 用CO2激光治疗的烟尘中有HPV DNA存在；烟尘中的HPV DNA有一定的致病性；排烟设备距烧灼部位1cm以下最为安全。     

肿瘤坏死因子的抗肿瘤活性及临床应用

肿瘤坏死固子(tumor necrosis factor,TNF)是近年来研究较深入,应用较广泛的一种新型细胞因子,而人们对其功能的认识及其经验性应用却已有相当的历史。早在19世纪末人们就发现某些肿瘤患者感染细菌或注射细菌混合物后,肿瘤缩小。如Coley于1891年曾报告,当患肉瘤的病人再患丹毒时肉瘤可出现自发消退的现象。由此引发出临床上采用菌苗抗癌的免疫疗法,并认识到细菌的有效成分是内毒素。本世纪30年代初,Gratia和Shear分别报道,当给移植瘤小鼠静脉注射脂多糖后,肿瘤会发生出血、结痂,而小鼠得到治愈。接着,Ribi等人将卡介苗(BCG)和脂多糖联合来治疗豚鼠移植性肝癌,使肿瘤缓解率有所提高。1975年Garswell等发现,经卡介菌感染的小鼠静脉注射大肠杆菌内毒素2小时后,其血清活性较高的肿瘤细胞毒因子,此种因子可使带瘤动物的肿瘤发生明     

肿瘤坏死因子受体的进展

肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis,TNF)由活化的单核/巨噬细胞产生(称为TNF_α),也可由活化的T淋巴细胞及NK细胞产生(称为TNFβ及TNF_α)。TNF最明显的活性特征是可以在体内或体外特异地杀伤肿瘤细胞,对正常组织细胞则无明显的毒性作用。TNF的生物效应是通过TNF受体(TNFR)产生,TNF分为TNF_α及TNFβ。本文着重对TNF_αR近年来的研究进展作一综述。     

P53反义RNA表达载体的构建

目的：针对突变型P^53基因的致癌性,采用反义RNA技术以阻断癌细胞内源突变型P^53的表达,构建真核细胞内P^53反义RNA表达载体。方法：采用定向克隆法将人野生型P^53基因cDNA反向插入到哺乳动物表达载体P^CR3.1的Ecor RⅠ和XbaⅠ位点,构建了反义P^CR3.1-P^53（AS）表达载体。结果：反义P^CR3.1-P^53(AS)表达载体构建成功。结论：此研究结果既为肿瘤发生提供理论基础,也为肿瘤基因治疗奠定基础。     

大肠杆菌JM105的转化及快速鉴定

用CaCL_2处理JM105空白的大肠杆菌,使之成为感受态细菌,然后将含白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)的cDNA的质粒PGEM-72f~(( ))转化到感受态细菌中去,涂布于含有氨苄青霉素的LB固体培养基中,培养过夜,挑取生长良好的单菌落,再接种到含氨苄青霉素的LB液体培养基中,培养过夜,用溶菌酶法裂解细菌细胞壁,用0.8％。琼脂糖凝胶电泳检测质粒,在紫外反射透射仪上观察结果。此方法简便,快速,不需特殊设备及试剂。     

h TNF-α cDNA的酶切鉴定

本文对Sepharose 2B层析分离后的重组质粒pGEM-1用E CORI及HindⅢ限制性内切酶进行切割,电泳分析结果表明用Sepharose 2B层析分离的质粒纯度可满足于克隆片段的酶切图谱分析。