解烃高温细菌的特性及矿场试验

针对大港油田官69断块的油藏条件和流体特性选育出高温细菌N80。在缺氧条件下对菌的生长代谢和改善原油性质等方面进行了评价。在油藏温度(73℃)条件下用人造均质岩芯进行的物理模拟驱油实验表明，微生物驱较水驱提高石油采收率6．6％．在官69－19井进行的吞吐处理试验表明，产出液菌浓较处理前升高了2个数量级，共增产原油401吨，油中的石蜡和胶质沥青含量均有下降，证明N80菌适应地层条件，具有增采和改善原油性质的作用。     

烃降解菌HL-6的分类鉴定、降解性能及应用研究

从新疆油田石油污染土壤中分离到一株烃降解细菌HL-6,经生理生化实验和分子生物学方法初步鉴定为红球菌(Rhodococcussp.).研究表明,利用乙醇无机盐培养基培养液体种子是适宜的,菌体浓度可达108CFU/mL.在以柴油为唯一碳源的无机盐培养基中,25℃振荡培养3d,烃降解率达到78.5%.该菌降解烷烃的范围很广泛,对C11~C36均有不同程度的降解.将乙醇制备的种子液与沸石按照2∶1的比例制备成固体菌剂加入以柴油为唯一碳源的无机盐培养基中进行25℃振荡培养7d,同时与以相同菌浓液体菌剂接种的降解情况进行对照,最终降解率液体菌剂达到82.8%,固体菌剂达到74.6%.固体菌剂和液体菌剂可分别用于海洋滩涂和土壤石油污染的生物修复研究.     

嗜热解烃菌NG80-2的鉴定及其特性

利用细胞形态、生理生化特征、不同碳源发酵产酸试验及16SrDNA的进化树分析的方法。对分离获得的嗜热解烃细菌NG80-2进行了鉴定，确定为Geobacillus thermodenitrificans，其16S rDNA与Geobacillus thermodenitrificans BGSC94A1的相似性最高，达到99．80％．该菌最适生长温度为65℃，最适pH为7．2，能在以原油为唯一碳源的无机盐培养基中生长，并且能选择性降解C15～C36直链烷烃，其中对正-十六烷（C16）的降解率高达58．9％．优良的烃降解性能对微生物开采重质原油和治理石油污染具有潜在的应用价值．     

黄原胶溶液热稳定剂的研究

对碱金属硼氢化钠作为黄原胶溶液的热稳定剂进行了研究。结果表明,硼氢化钠浓度为８０￣３２０ｍｇ／Ｌ,合成海水盐浓度为４％和甲醛浓度为０．４％时,在无氧条件下,黄原胶溶液８５℃高温处理６０ｄ,其溶液性能基本保持不变,粘度损失仅为２％￣６％。该研究结果为黄原胶在高温油藏三次采油中的应用提供了新的途径。     

混合菌群对原油的降解作用

从本研究室保藏的菌种中筛选到一组处理油田污水的混合菌群,经鉴定该菌群由N1、N2（假单胞菌属Pseu-domonas sp.）,N3（不动杆菌属Acinetobacter sp.）,N4（微杆菌属Microbacterium sp.）,N5（纤维单胞菌属Cellu-lomonas sp.）,N6（棒杆菌属Corynebacterium sp.）组成,利用气相色谱分析了各组成菌在降解原油中的作用和效果,证实N5和N6是关键菌株,N1－N4菌株起辅助作用,它们的协同作用使混合菌群得以高效降解目标原油。     

二苯并噻吩单加氧酶基因(dszC)的克隆及其在大肠杆菌中的表达

利用PCR法从红球菌DS-3中克隆了dszC基因,序列测定结果与报道的Rhod ococcus ery throp olisIGTS8中d szC基因有99%的同源性.构建了含dszC基因的表达载体paC 5并在E.coli中实现高效表达,重组蛋白(D szC)在降温条件下重组菌表达量可达20%.可溶性D szC经N i2 亲和层析纯化达到电泳纯(95%以上).用纯化的D szC制备一抗血清进行免疫印记检测,证明工程菌表达产物中存在目的蛋白.纯化的D szC酶活可达0.36 U.D szC能作用于DBT及其甲基取代物,但不能利用无硫的DBT类似物及无机硫源.     

生物聚合物Ss合成菌的分类鉴定及发酵条件的初步研究

菌株TP-3能合成一种具有增稠性和假塑性的新型生物聚合物Ss,通过形态观察、生理生化实验和16S rDNA同源性序列分析,初步鉴定该菌为鞘氨醇单胞菌（Sphingomonas sp．）的一个新种．发酵条件优化结果表明,生物聚合物Ss合成的最适培养基为葡萄糖40g／L,豆饼粉2．5g／L,NaCl 0．5g／L,MgSO4 0．3g／L,MnCl2 0．004g／L,FeSO4 0．005g／L,CaCO3 1．0g／L,最适培养温度为30℃,最适初始pH为7．5,最适培养周期为60h．     

苏云金杆菌中国品系Bt ken—Ag 10t罐发酵研究

苏云金杆菌Btken-Ag在10t发酵罐中,以豆饼粉和玉米淀粉为底物发酵30h,发酵液毒力效价平均达2096IU／μL。粉剂产品回收率为84．5％,其性能指标分别达到：毒力效价为17000IU／mg,活孢子数在3×1010个／g以上,细度为95％通过300目标准筛,悬浮率在85％以上,含水量在5％以内,润湿性在15s以下。     

高温解烃菌NG80-2黄素还原酶基因的克隆、表达及其酶学性质研究

对1株高温解烃菌NG80-2黄素还原酶基因,nfr进行了克隆,并在E.coli BL21中实现高效表达.对纯化的Nfr酶学性质进行研究,发现Nfr可以利用NADH、NADPH、FMN、FAD分别作为供氢体和氢受体,其中NADPH和FMN为最适底物.Nfr的最适反应温度为60～70℃,最适反应pH为5.0.在耐受性试验中,此酶在65℃高温中保温30 min后可保持47.3%的相对酶活.在受试的金属离子中,Fe2+对酶活性的抑制作用最大.     

Bacillus subtilis MO-L010中ComA蛋白对脂肽合成的影响及高产工程菌株的构建

脂肽是一类用途广泛的生物活性物质．本文研究了早期感受态基因comA表达对脂肽合成的影响,并据此构建了脂肽高产基因工程菌株,其产量较原菌株提高了约20％,达到450mg／L.