邻苯三酚自氧化法适于测定SOD活性吗?

用邻苯三酚自氧化法测定了Cu-ZnSOD(Superoxide dismutase，SOD）及根据天然超氧化物歧化酶活性部位结构设计、合成的一些模型化合物（the models of SOD，MSOD）活性。测试结果表明：Cu-ZnSOD和含Cu（Ⅱ）、Fe(Ⅲ)、Mn(Ⅱ、Ⅲ的SOD模型化合物随浓度升高，有的对邻苯三酚氧化表现为负抑制（即促进邻苯三酚氧化）；另一部分化合物在较低浓度表现为抑制，较高浓度表现为负抑制的交替变化；或抑制率的无规则变化。本文对出现负抑制的内在根源进行了探讨，鉴于邻苯三酚自氧化的复杂反应机理；含Cu(Ⅱ)、Fe(Ⅲ)、Mn（Ⅱ、Ⅲ）SOD模型化合物的多酚氧化酶活性和Fenton反应催化活性，及MSOD中金属离子的Lewis酸性，不宜采用邻苯三酚自氧化法测定SOD活性。     

一种改进的漆酶酶活检测方法

以 2 ,2′ -连氮 -双 (3-乙基苯并噻唑 - 6 -磺酸铵 ) (简称ABTS)为漆酶A、B的底物 ,采用UV - 2 2 0 1型紫外 -可见分光光度计连续记录酶反应在 2 5℃ ,4 2 0nm波长下的时间历程曲线 ,并求取最初部分的斜率以计算漆酶酶活的方法 .该方法直观、方便、准确且可靠 .在 2 5℃的 0 .0 4mol/LBritton Robinson缓冲溶液中 ,漆酶A、B的最适 pH值分别为 4 .0和 4 .5 .在 2 5℃最适 pH值的Britton Robinson缓冲液中 ,由双倒数作图法求得漆酶A、B的米氏常数Km 分别是 6 .6 4× 1 0 - 5mol/L和 2 .2 1× 1 0 - 5mol/L ,漆酶A、B的最大米氏反应速度Vmax分别是 1 4 2 5μmol.M (L·min)和 32 5μmol.M (L·min) .漆酶A、B的酶活分别为 2 2 99μmol·min- 1·L- 1和 1 1 4 8μmol·min- 1·L- 1.     

新型显色基质法鲎试验对肺部革兰氏阴性菌感染患者的诊断意义

应用新型显色基质法鲎试验（ＮＣＬＡ）测定４１例肺部革兰阴性（Ｇ＾－）细菌感染患者）Ｇ组）；３２例肺部非革兰氏阴性细菌感染患者（非Ｇ组）；４２例无细菌感染的肺病患者（无感染组）的血浆内毒素浓度、并与１００例健康者（对照）比较，Ｇ组血浆内毒素水平明显高于对照组，非Ｇ组及无感染组（Ｐ均〈０．０１）。提示新型显色基质法鲎试验有助于肺部Ｇ细菌感染作出快速，灵敏的诊断。     

人WDR79基因启动子表达载体的构建及鉴定

人WDR79是一种重要的支架蛋白,在端粒酶组装、卡哈尔体(Cahar body)形成和DNA损伤修复等过程中发挥着重要作用。采用PCR扩增技术获得人WDR79基因启动子上游DNA序列,构建人WDR79基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-WDR79-promoter;通过双酶切、琼脂糖凝胶电泳、DNA测序和荧光素酶活性测定等实验手段,验证质粒pGL3-WDR79-promoter构建的正确性及其表达活性。本研究结果为进一步探讨人WDR79基因表达的调控机制奠定实验基础。     

铁离子还原法(FRAP)测定中国被毛孢菌丝体提取物抗氧化活性

FRAP法测定了6批人工培养中国被毛孢(Hirsutella sinensis)菌丝体热水和乙醇提取物的抗氧化活性.结果表明:1 mg/mL人工培养中国被毛孢丝体水提物和乙醇提取物的平均抗氧化活性分别相当于(327.5±42.1)μmol/mL Fe2+和(107.1±13.5)μmol/mL Fe2+;方法学研究显示重现性为3.8%;精密度为3.1%;可靠性相关系数R2为1.0000;回收率分别为(105.4±5.8)%(水提物)和(104.2±8.8)%(醇提物);该方法在30 min内结果的变异系数为3.0%.这些结果表明:中国被毛孢菌丝体热水和乙醇提取物均具有一定的抗氧化活性,用FRAP法测定具有良好的重现性、精密度、可靠性、回收率和稳定性.     

不同寄主红花寄生叶提取物抗氧化能力的研究

采用FRAP法和TEAC法测定了6种寄主植物(女贞、石榴、荷花玉兰、长梗柳、桑、夹竹桃)来源的红花寄生叶提取物抗氧化能力,并采用RP-HPLC检测了提取物中槲皮素和山奈酚质量分数.结果表明:红花寄生叶提取物具有较强的抗氧化能力,且活性强弱受不同提取剂和寄主植物的影响显著(p＜0.05).在3种提取剂中,以体积分数为80...     

5种海南岛药用植物抗肿瘤活性部位的筛选

筛选猪屎豆、蒌叶、喜光花、广南天料木和红花天料木等5种药用植物的抗肿瘤有效部位.采用MTT法测试了该5种药用植物不同溶剂萃取物对四种癌细胞的体外抑制活性.证明了该5种药用植物的部分提取物对4种肿瘤细胞增殖有较强的抑制作用,量-效关系明显.     

抗土霉素单克隆抗体的制备及其在虾中土霉素残留的检测应用

研究目的：抗土霉素单克隆抗体的制备和特性分析，并用于间接竞争酶联免疫吸附测定法（icELISA）分析虾样品中土霉素的残留。创新要点：本研究建立分泌抗土霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株，筛选出对虾中土霉素残留检测具有较高灵敏度的单克隆抗体2．4F。研究方法：重要结论：用细胞杂交技术使土霉素．牛血清白蛋白偶联物免疫的BALC／c雌性小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，建立三株分泌抗土霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株（2—4F、7-3G和11-11A），并制备它们的单克隆抗体。通过ieELISA法分析单克隆抗体对土霉素的半抑制质量浓度（IC-50）和交叉反应率，明确其灵敏度和特异性。实验结果发现单克隆抗体2—4F具有最高的灵敏度，对土霉素的IC50为7．01ng／ml，且该单抗特异性强，仅与罗利环素之间有强烈的交叉反应，而与非相关抗生素不发生交叉反应。当利用单克隆抗体2-4F检测虾样品中的土霉素含量时，其批内和批间回收率分别为82％～118％和96％～113％，变异系数分别为3．9％～13．9％和5．5％～14．9％。因此，单克隆抗体2．4F可用于虾产品中土霉素残留分析试剂盒的开发。     

Presence of hepcidin-25 in biological fluids: Bile,ascitic and pleural fluids

AIM: To examine body fluids such as ascitic fluid (AF),saliva,bile and pleural effusions for the presence of hepcidin using a novel radioimmunoassay (RIA).METHODS: Serum samples were collected from 25 healthy volunteers (mean age: 36 ± 11.9 years,11 males,14 females).In addition bile was obtained from 12 patients undergoing endoscopic retrograde cholangiopancreatography (mean age: 66.9 ± 16.7 years,M:F = 5:7).Saliva was collected from 17 healthy volunteers (mean age: 35 ± 9.9 years,M:F = 8:9).Pleural and AF...     

亚洲玉米螟性信息素的扩大合成及生测效果

本文进行了亚洲玉米螟性信息素的扩大合成研究,使合成的诸条件进一步完善,确定了最佳碱浓度,为小批量制备提供了可靠数据。田间生测实验的结果表明,所合成的药剂每亩仅用2.2mg即具有明显的防治亚洲玉米螟的效果。