扩展青霉FS1884脂肪酶基因的定点诱变及其活性分析

为提高扩展青霉FS1884脂肪酶活性,采用一步突变法对脂肪酶(PEL)的基因进行体外M220V定点诱变,然后将其连接到表达载体pPIC3.5K中, 构建重组表达载体pPIC3.5K-M220V-PEL,电转化毕赤酵母GS115中,经甲醇诱导后脂肪酶成功分泌表达.重组脂肪酶的活性分析表明:突变体在毕赤酵母中得到活性表达,获得脂肪酶表达产物PEL-M220V-GS,在35 ℃下具有最高酶活为3 099 U/mg, 比野生型提高了5%.     

细脚拟青霉产胞外抗氧化活性成分培养基的优化

采用液体摇瓶培养的方法,以DPPH自由基清除率为指标,对一株细脚拟青霉产胞外抗氧化活性成分培养基进行了优化.确定了其产抗氧化活性物质的最佳培养基.结果表明最佳培养基为:碳源为蔗糖和麦芽糖组成的复合碳源;氮源为酵母浸出粉;微量元素及生长因子为KH2PO4、柠檬酸铵和VB;正交实验结果表明最佳培养基配方为蔗糖2%、麦芽糖1%、酵母浸出粉1.5%、KH2PO4 0.5%、柠檬酸铵0.04%、VB 0.03%.培养基优化后,该菌株发酵液中代谢产物的扰氧化活性可达73.47%.     

青霉菌丝体分子印迹吸附膜对Cr(Ⅲ)的吸附性

以发酵工业废弃菌丝体为主要吸附介质,通过分子印迹技术,制备得到青霉菌丝体分子印迹吸附膜。研究了青霉菌丝体分子印迹吸附膜对Cr ³⁺的吸附特性、影响因素以及吸附膜的稳定性。结果表明：静态饱和吸附容量可达65mg/g,最佳吸附pH为6,吸附过程符合Langmuir等温吸附方程;动态吸附实验穿透时间在400min左右,对皮革废水中的Cr ³⁺的动态吸附容量为27mg/g;该吸附膜稳定性较好,可以多次重复使用、静态使用批次已达60批次。     

蝉拟青霉深层发酵的研究

为了筛选到蝉拟青霉优良的培养基及摇瓶发酵条件,通过对碳、氮源筛选的单因素实验,筛选出葡萄糖为碳源、蛋白胨为氮源;在此基础上以筛选的碳源、氮源及无机盐K2HPO4,MgSO4.7 H2O为考察因素,以菌丝体生物量为指标,利用正交实验筛选出生物量较高的培养基组合.结果表明,最优培养基按质量分数为葡萄糖3%,蛋白胨1.5%,K2HPO40.1%,MgSO4.7 H2O0.05%.适宜的摇瓶发酵条件为培养温度25～27℃,培养基起始pH6～7,接种量6%,摇床转速为150 r/min,500 mL三角瓶最适装液量为100 mL,发酵周期为7 d.     

扩展青霉(Penicillium expansum)PF868脂肪酶的纯化及氨基酸序列测定

扩展青霉 (P. expansum) PF868所产脂肪酶通过硫酸铵沉淀、DEAE-纤维素柱层析以及Sephacryl 200柱层析等步骤被纯化了74倍,最终比活力为69.7 u/mg.纯化后的脂肪酶经过SDS-聚丙烯酰胺电泳和微内径高效液相色谱仪检测分别达到了SDS-PAGE纯和微内径高效液相色谱纯.分子量经SDS-PAGE确定为28.44 kD. 脂肪酶N-端氨基酸序列测定的结果是:ATADAAAFPD--这与其他一些真菌产的脂肪酶的序列具有较大的同源性.     

古尼拟青霉菌丝体多糖(MPPG)对肿瘤细胞产生免疫抑制因子的影响

用MTT法分别检测了MPPG对LPS诱导鼠脾细胞体外增值的影响、体外对S180的影响,检测了MPPG培养的各种肿瘤上清液对LPS诱导的鼠脾细胞体外增殖的影响、对小鼠脾NK细胞的活性的影响,以及ELISA法测定各种肿瘤上清液中TGFβ1的分泌量.100μg/m lMPPG培养的肿瘤上清液可明显减少对LPS诱导的鼠脾细胞增值和NK细胞的杀伤活性的抑制作用,同时多糖培养的肿瘤上清液中免疫抑制因子TGFβ1的含量较单纯肿瘤上清液的TGFβ1的含量明显的降低.MPPG可降低肿瘤细胞的免疫抑制作用,减少肿瘤细胞产生免疫抑制因子TGFβ1.     

虫生真菌粉质拟青霉(Paecilomycesfarinosus)培养条件的研究

本文对采自山西省的虫生真菌粉质拟青霉 990 5菌株的培养条件进行了全面的分析 ,旨在寻求一种能在山西省大面积推广应用的虫生真菌杀虫剂 .试验结果表明 ,IDA(虫粉培养基 )上菌落生长最快 ,菌落直径最大 ;2 0℃ 2 5℃是菌丝生长的最适温度 ;光照对粉质拟青霉 990 5菌丝生长及产孢量有一定的影响 .     

斜卧青霉纤维素酶的研究 Ⅱ.JU1菌株的生理特征和酶合成调控问题的初探

研究了各种培养基成分对斜卧青霉抗降解物阻遏突变株JU_1和野生菌株114—2生长和产酶的影响。初步确认了斜卧青霉的纤维素酶及其它几种糖苷酶均为部分组成型酶,不需要专门的诱导物。“诱导”只是增加酶的产量。降解物阻遏是菌株控制其产酶量的主要调节机制。抗降解物阻遏突变可能同产能代谢部分受阻有关。     

灰黄霉素高产变株与出发菌株18S rRNA基因序列的比较分析

根据真菌18S rDNA的保守序列设计引物,对灰黄霉素高产突变菌Penicillium griseofulvum F208与出发菌株Penicillium griseofulvum 3.5190的18S rRNA进行克隆测序及对比分析,并登录GenBank(序列号为EF608151和EF607282).依据18S rDNA建立的系统进化树表明突变株F208与出发菌株3.5190的遗传距离较远,而与Penicillium urticae亲缘关系最近.出发菌株3.5190与Penicillium commune亲缘关系最近.18SrDNA作为分子标记可有效地鉴别灰黄霉素产生菌(Penicillium griseofulvum)高产与低产菌株.     

纤维素分解菌——青霉和放线菌的分离选育研究

在平凉县的一蘑菇房里采集了用来种植蘑菇的潮湿木屑粉.用纤维素刚果红鉴别培养基初筛,根据水解圈与菌落直径之比大小和水解圈清晰度分离筛选出较多的产纤维素酶菌株,进一步通过测纤维素酶活力复筛,最终筛选出滤纸酶活力和羧甲基纤维素酶活力同时都较高的菌株2株,分别是27-3F (FPA:199.12U,CMCase activity:1181U)和27-1A(FPA:110.54U,CMCase activity:908.2U).经形态学鉴定菌株27-3F是青霉。菌株27-1A是为放线菌的链霉菌属.