紫杉醇产生菌HU1353分类地位的探讨

研究了从东北红豆杉(Taxus cuspidarta)树皮中分离到的一株内生真菌HU1353,经微生物发酵法证明可产生紫杉醇后,进一步对其群体形态和个体形态进行了观察,并探讨其分类地位为链格孢属(Alternaria)一新种。模式菌株保存于黑龙江大学微生物重点实验室。     

PadR对须糖多孢菌丁烯基多杀菌素生物合成及转运相关蛋白表达的影响

为研究padR基因表达对须糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)次级代谢产物生物合成及相关蛋白表达的影响,在对须糖多孢菌基因组测序结果的基础上,从基因组中克隆了padR基因上、下游同源臂,利用融合PCR将硫链丝菌素抗性基因插入上、下游同源臂之间,将融合片段与穿梭载体pOJ260连接,构建敲除载体pOJ260-UHA-tsr-DHA。通过接合转移将其导入野生型须糖多孢菌中,通过同源臂双交换获得须糖多孢菌敲除菌株S.pogona-ΔpadR。经HPLC检测分析,敲除菌株次级代谢产物丁烯基多杀菌素产量与原始菌株相比提高了27.3%,且有7个转运相关蛋白出现表达上调。这一研究表明padR基因的敲除能够有效促进须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成。该研究对优化须糖多孢菌丁烯基多杀菌素的生物合成途径具有一定的指导意义,为研究padR基因表达在链霉菌次级代谢产物合成中的作用打下了基础。     

球孢白僵菌菌株交配型分子鉴定

球孢白僵菌Beauveria bassiana是一种重要的虫生真菌,开发的真菌杀虫剂是一类优良的生物农药,其有性世代—球孢虫草Cordyceps bassiana也有潜在的经济价值.鉴定球孢白僵菌菌株的交配型,确立含有不同交配型标准菌株,进行菌株的快速配对,对于球孢虫草的人工栽培和球孢白僵菌的育种都具有重要的价值.通过多次重复试验,优化了扩增条件,保证了检测结果的稳定性和可靠性.该试验结果为检测球孢白僵菌菌株的交配型提供了一种简便、准确的方法,并为研究球孢白僵菌交配型基因的功能、人工栽培和育种奠定了基础.     

苏云金芽孢杆菌伴孢晶体中20-kb DNAs上染色体基因的鉴定

已有的研究表明苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)4.0718菌株菱形晶体中含有与原毒素紧密结合的20-kb DNAs,利用PCR-RFLP分析发现在这些20-kb DNAs上含有cry1Aa、cry1Ac、cry2Aa和cry2Ab基因.本研究利用特异引物从4.0718菌株中20-kb DNAs上分别扩增出带有自身调控序列的cry1Ac和cry2Aa基因,并将其分别电转至Bt无晶体菌株Cry-B中获得重组菌株Cry-B(pHC42)和Cry-B(pHC39).SDS-PAGE和透射电镜分析表明这两种重组菌株能够分别产生由130-kDa的Cry1Ac原毒素形成的菱形晶体以及由65-kDa的Cry2Aa原毒素形成的方形晶体.毒力生测的结果显示,这两种菌株的表达产物对棉铃虫(Helicoverpa armigera)幼虫具有预期的杀虫效果.重组菌株分别形成的两种晶体经不同的缓冲液溶解后能释放出与20-kb DNAs紧密结合的原毒素,同时在20-kb DNAs上均可检测到源于Bt染色体的spo0A和nprA基因片段.     

一株饮用水净化细菌的分离鉴定及安全性评价

从松花江哈尔滨段饮用水水源地中分离获得一株饮用水净化细菌ZXY30,对水样处理24h后,UV254、TOC、CODMn三种指标的去除率分别达到19.16%、25.38%和20.69%。经过菌株形态特征、生理生化以及16SrRNA序列同源性分析,鉴定该菌株为恶臭假单孢菌(Pesudomonas putida)。小鼠急性毒性实验证明,该菌株不具有相关毒性,为丰富生物强化方法净化饮用水技术提供菌种储备。     

肿大地杆菌脲酶 的产生条件、纯化、 理化特性及应用研究

从农家土厕粪土中筛选培育出一株脲酶高产菌株,经中国科学院微生物研究所检测鉴定定名为肿大地杆菌,已被中国科学院微生物菌种保藏中心收藏(As1.2690)。该菌株对人畜无致病性,经强化培养条件后每克湿菌产脲酶279.13U。提取纯化的菌体脲酶经测定其分子量为257000,等电点3.40,Km值为0.0403mol·L     

抗癌药物紫杉醇产生菌原生质体形成及释放规律

详细研究了抗癌药物紫杉醇产生菌树状多节孢原生质体形成和释放的规律 .从酶系组成、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂、pH值、培养基成分、培养方式、预处理等因素对树状多节孢原生质体形成和释放的影响进行了研究 ,得出了该菌的最佳原生质体制备条件及其规律 ,为以后通过原生质体技术构建紫杉醇产生菌的工程菌株奠定了基础 .     

树状多节孢HQD_(33)遗传转化体系建立的影响因素研究

利用根癌农杆菌(Agrobacterium tum efaciens)介导的转化方法,以紫杉醇产生菌———树状多节孢HQD33的分生孢子为受体材料,分析影响转化效率的主要因素.获得高效的遗传转化体系,转化率最高可达1.3×10-4.PCR检测表明,T-DNA已整合进树状多节孢HQD33的基因组中,而且大多数都是以单拷贝的形式整合,转化子都能够稳定遗传.结果表明,根癌农杆菌菌株类型、菌株生长状态、分生孢子浓度、共培养时间以及乙酰丁香酮的诱导等因素对转化效率都具有重要影响.通过对以上因素的分析,为建立紫杉醇产生菌———树状多节孢HQD33稳定的遗传转化体系奠定了基础.     

海口东湖降解磷细菌研究初报

对海口东湖磷细菌研究的结果表明:至少有芽孢杆菌属等13个属的不同菌株以其对磷化合物的分解能力推动着湖泊中磷的循环;在以芽孢杆菌属,假单孢菌属,微球菌属为优势的菌属中,假单孢菌属的解磷能力最强。     

粉锈宁对蚕豆叶部真菌的毒力研究

在实验室不同温度条件下，探讨了不同浓度的粉锈宁对７种蚕豆茎叶分离所带真菌毒性的作用，同时测定了粉锈宁对其中４种真菌孢子萌发、芽管生长及对３种真菌产孢的影响。结果表明，７种参试真菌菌落生长速度均随温度升高而加快。粉锈宁≥１００×１０－６时对蚕豆根腐病原镰刀菌具有明显杀菌作用，而对引致蚕豆主要叶病——赤斑病和轮斑病的葡萄孢和尾孢表现出较强的抑菌作用。粉锈宁在较高浓度下能明显的抑制供试的镰刀菌、聚端孢及轮枝孢的孢子萌发，４种真菌芽管生长均随粉锈宁浓度的增加而减小     

链格孢属真菌对农作物的危害

链格孢属(Altemaria)真菌是农作物的主要致病菌之一,它能引起包括玉米、小麦、烟草、马铃薯、番茄、苹果、梨等几十种农作物发病,其发病机理主要是由病菌的代谢产物——毒素导致的,由于毒素的作用使农作物产生各种症状,如黑斑病、褐斑病、茎枯病、赤星病等等,严重影响了农作物的产量,给我国农业生产带来了巨大损失。     

3种促生菌对豌豆和大豆种子萌发及幼根生长的影响

以链霉菌Streptomyces sp. FXP04、侧孢短芽孢杆菌Brevibacillus laterosporus Y、皮尔瑞俄类芽孢杆菌Paenibacillus peoriae NT 3种促生菌为研究对象，调查它们对豌豆和大豆种子萌发及幼根生长的影响．结果表明，3种促生菌在不同浓度下(OD₆₀₀=0.5,OD₆₀₀=1)对豌豆和大豆种子的萌发都没有显著促进作用．菌株Brevibacillus laterosporus Y和菌株Paenibacillus peoriae NT能够促进豌豆和大豆幼根伸长，菌株Streptomyces sp. FXP04可以促进大豆幼根伸长，对豌豆幼根伸长无显著促进作用．3种促生菌都能够促进豌豆和大豆侧根的数量增多．     

甘肃地区冬虫夏草液体发酵研究

自甘肃地区采摘的冬虫夏草子座和内核菌上经组织分离得到冬虫夏草菌,经形态学鉴定为中国被毛孢,利用该菌株进行液体发酵.结果表明：温度18℃、溶氧量160 r/min、接种量10％、pH自然;优化配方为：葡萄糖30 g/L、蚕蛹粉20 g/L、KH2PO4 1.0 g/L、MgSO4·7H2O 0.9 g/L,2 g/L（NH4）2SO4＋0.1 g/L VB1,发酵8天可得菌丝体产率为17.36 g/L.     

长白山天池水中一株产海藻糖菌种的鉴定

从长白山天池水中分离得到一株产海藻糖的菌株ＣＢ３９,并进行鉴定,结果表明,该菌株为胶样菌属的一个新种。     

石油降解菌株的分离筛选及降解性能研究

从大庆油田石油污染土壤中分离出8株能够以原油为唯一碳源和能源的石油降解菌株,经鉴定分属假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、微球菌属(Micrococcus sp.)、产碱菌属(Alcaligenes sp.)、动性球菌属(Planococcus sp.)和纤维单胞菌属(Cellulononas sp.)5个属。同时对其中石油降解能力较好的两株菌进一步研究了其石油降解特性,发现原油浓度、pH值、N∶P等对菌株的降解能力有较强的影响。     

一株纤维素降解菌的分离、鉴定及降解特性初步研究

从长沙宁乡灰汤温泉附近的水样中分离获得1株具有较强纤维素降解能力的菌株,命名为NX1-1,该菌株最适生长温度为40℃,最适生长pH5.0~8.0.菌株形态学以及ITS rDNA和28S rDNA D1/D2序列分析的鉴定结果表明,该菌株属于Aspergillus fumigatus这个种.对该菌株产酶特性进行了初步研究,最适产酶条件为:氮源(NH4)2SO4,接种量10%,40℃,初始pH6.0,培养60~96 h.     

厌氧消化池产甲烷菌的筛选及特性研究

从厌氧消化池活性污泥中采集样品,利用特定培养基进行厌氧培养,分离筛选得到2株菌,分别编号为A、B．通过特定荧光反应检测鉴定A、B均为产甲烷菌．利用甲醇液体培养基对A、B两种菌株进行培养,20d后两株菌均产生甲烷,且通过自制气体收集装置测定其产气量发现,B菌株的产气量高于A菌株．     

玉米丝黑穗病苗的快速鉴定

通过提取玉米根和叶片组织的DNA,再选用玉米丝黑穗病菌的特异性引物(GSP)进行PCR扩增检测,结果发现,GSP引物在玉米根组织中丝黑穗病的检测率在80%,叶片中玉米丝孢堆黑粉菌的检测率为15%.表明,可以利用GSP引物通过检测玉米根部组织,快速发现玉米丝黑穗病病苗.     

肌酐测定工具酶产生菌-烟草节杆菌02181的筛选及其产酶条件

肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶是肌酐测定酶学方法的主要工具酶，我们从兰州市郊土壤中筛选到一株能同时高产这3种酶的菌株02181，经中国科学院微生物研究所鉴定为烟草节杆菌，正式定名为烟草节杆菌02181(Arthrobacter nicotianae 02181)．该菌适宜的培养温度为28℃；增加氧溶量有利于细菌细胞生长和产酶；肌酐的存在对产酶至关重要，推测为酶基因开放的诱导剂；蛋白胨是该菌生长和产酶的良好氮、碳源；在有肌酐和蛋白胨存在时，添加葡萄糖能促进细菌细胞生长，但产酶量降低；镁盐、钾盐和磷酸盐为细菌生长和产酶所必需．优化产酶条件后，肌酐酶、肌酸酶和肌氨酸氧化酶的最高产酶量分别达145．00U／g湿菌、75．77U／g湿菌和21．30U／g湿菌．该菌不仅具有用于发酵生产的潜力，也为我们进行肌酐测定3种主要工具酶的基因克隆奠定了基础。     

产脂肪酶菌株的分离、鉴定及其产酶条件优化

从长沙岳麓山和湘江等地富含油脂的样品中分离得到一株产脂肪酶菌株CS 1-1,经18S rDNA序列分析,确定该菌株为黑曲霉(Aspergillus,niger).对该菌株的产酶条件进行优化,发现该菌株在以体积分数为1%的橄榄油为诱导物,5 g/L蔗糖为碳源,40 g/L蛋白胨为有机氮源,1 g/L(NH4)2SO4为无机氮源,pH为6.5的培养基中,于28℃,180 r/min摇床培养48 h,可达最大酶产量(37.6±0.8)mmol·min-1·L-1.